การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์

การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ถูกออกแบบมาเพื่อประเมินความเป็นพิษทั่วไปของอุปกรณ์และวัสดุทางการแพทย์ การทดสอบเกี่ยวข้องกับการแยกอุปกรณ์ในอาหารเลี้ยงเซลล์จากนั้นให้ของเหลวที่สกัดได้ไปยังเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของเมาส์ (L929) เซลล์จะได้รับอนุญาตให้เติบโตในของเหลวที่สกัดได้ในช่วงเวลาหนึ่งก่อนที่เซลล์จะได้รับการประเมินโดยใช้วิธีการเชิงคุณภาพหรือเชิงปริมาณ การทดสอบจะดำเนินการกับอุปกรณ์ทางการแพทย์วัตถุดิบและอุปกรณ์ทั้งหมดที่มีการตรวจสอบความถูกต้องในการทำความสะอาดหรือการผลิตสารตกค้างที่สัมผัสกับผู้ป่วย

มาตรฐานที่บังคับใช้

• ANSI/AAMI/ISO 10993-5
• ANSI/AAMI/ISO 10993-12

คุณสมบัติตัวอย่าง

• CTX101: 400 mm2 หรือ 2 กรัม; ควรแบ่งออกเป็น 100 ส่วนคือ 100 มม. หรือ 3 มก
• CTX110: อุปกรณ์ครบ 1 ชิ้นแต่ละเครื่องควรมีขนาด 120 cm2 หรือ 4 กรัม
• CTX112: จำนวนตัวอย่าง: 120 ซม. ²หรือ 4 กรัม เวลาตอบสนองคือ 14 วันนับจากใบเสร็จรับเงินตัวอย่าง
• CTX115: อุปกรณ์ครบ 1 ชิ้นแต่ละเครื่องควรมีขนาด 120 cm2 หรือ 4 กรัม
• CTX116: อุปกรณ์ครบวงจรที่มีพื้นที่ผิว = 60 ซม. 2 อุปกรณ์หลายชิ้นสามารถจัดกลุ่มเข้าด้วยกันเพื่อกำหนดพื้นที่ผิวขั้นต่ำ
• CTX117: อุปกรณ์ครบวงจรที่มีพื้นที่ผิว = 60 ซม. 2 อุปกรณ์หลายชิ้นสามารถจัดกลุ่มเข้าด้วยกันเพื่อกำหนดพื้นที่ผิวขั้นต่ำ
• CTX125: อุปกรณ์ครบ 1 ชิ้นแต่ละเครื่องควรมีขนาด 120 cm2 หรือ 4 กรัม

โครงร่างการทำงานสำหรับความเป็นพิษต่อเซลล์ / MEM / Agar Plating

การกำจัด MEM

โดยปกติอุปกรณ์ / วัสดุจะถูกสกัดที่อุณหภูมิ 37 ±1ºCในอาหารเลี้ยงเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่เสริมซีรั่ม (MEM) หลังจากการสกัดสารสกัดจะสัมผัสกับเซลล์ L-929 ขนาดเดียว (เซลล์ไฟโบรบลาสต์ของหนู) จากนั้นเซลล์จะได้รับอนุญาตให้เติบโตในของเหลวสกัดตามช่วงเวลาที่กำหนดก่อนที่จะประเมินโดยใช้วิธีการเชิงคุณภาพหรือเชิงปริมาณ

เชิงคุณภาพ

การประเมินเชิงคุณภาพรวมถึงการสังเกตเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์และกำหนดระดับความเป็นพิษต่อเซลล์ (0-4) เกรดจะขึ้นอยู่กับเปอร์เซ็นต์การแตก (การตาย) และสัณฐานวิทยา (ลักษณะ) ของเซลล์โดยประมาณ หากคะแนนพิษต่อเซลล์เท่ากับ≤ 2 (การสลายตัว 50%) วัสดุทดสอบจะผ่านการทดสอบ

เชิงปริมาณ

การประเมินเชิงปริมาณใช้สีย้อมเตตระโซเลียมที่ใช้ในการประเมินกิจกรรมการเผาผลาญของเซลล์ ผลลัพธ์จะรายงานเป็นเปอร์เซ็นต์ความมีชีวิต (เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่มีชีวิต) วัสดุทดสอบผ่านการทดสอบหากเปอร์เซ็นต์ความมีชีวิตเท่ากับ 70% โดยปกติแล้วการเจือจางสารสกัดหลายชนิดจะรวมอยู่ในการทดสอบแต่ละครั้ง

วุ้นแบ่งปัน

วัสดุวางอยู่บนแผ่นอะกาโรสที่วางอยู่ด้านบนของเซลล์ L-929 โมโนชั้นเดียวและบ่มที่ 24 ± 26 ° C ใน 37 ± 1% CO5 เป็นเวลา 1 - 2 ชั่วโมง หลังจากการฟักตัวเขตการทำลายเซลล์จะถูกวัดและให้คะแนนตามมาตราส่วน 10993-5 ที่ระบุไว้ใน AAMI / ANSI / ISO 0-4 หากการตอบสนองต่อพิษต่อเซลล์ไม่เกินเกรด 2 (มีปฏิกิริยาเล็กน้อย) แสดงว่าวัสดุเป็นไปตามข้อกำหนด ISO แม้ว่า Agar Overlay จะเป็นวิธีการทดสอบที่ได้รับการยอมรับในอดีต แต่ก็อาจเหมาะสมเมื่อจัดส่งไปยังหน่วยงานกำกับดูแลบางแห่ง

ข้อผิดพลาดของความเป็นพิษต่อเซลล์

ในบางครั้งอุปกรณ์หรือวัสดุจะมีระดับการเกิดปฏิกิริยาต่อเซลล์สูงกว่ามาตรฐาน ANSI / AAMI / ISO 10993-5 ที่อนุญาตและจะส่งผลให้การทดสอบล้มเหลว แม้ว่าผลิตภัณฑ์ของคุณจะล้มเหลวในการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ แต่ก็ไม่ได้หมายความว่าอุปกรณ์หรือสิ่งของของคุณไม่ปลอดภัยสำหรับการใช้งานทางคลินิก นั่นหมายความว่าคุณต้องระบุแหล่งที่มาของข้อผิดพลาดและประเมินความเสี่ยงทางพิษวิทยา

ผู้เชี่ยวชาญของเราสามารถช่วยได้

มีสาเหตุที่เป็นไปได้หลายประการสำหรับความล้มเหลวของความเป็นพิษต่อเซลล์และ EUROLAB ให้บริการเพื่อช่วยคุณระบุและประเมินข้อผิดพลาด ผู้เชี่ยวชาญของเราสามารถประเมินความเสี่ยงทางพิษวิทยาที่เป็นไปได้เพื่อความปลอดภัยของผู้ป่วย

เราประเมินวัสดุและกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับอุปกรณ์ จากข้อมูลนี้ผู้เชี่ยวชาญของเรามักจะแนะนำเคมีวิเคราะห์ที่ตรงเป้าหมายเพื่อหาสาเหตุของความล้มเหลว จากนั้นเราสามารถทำงานร่วมกับลูกค้าเพื่อพิสูจน์ข้อผิดพลาดผ่านการทดสอบและประเมินผล

การปรึกษาหารือกับผู้เชี่ยวชาญของเราเพื่อหาสาเหตุของความล้มเหลวในการเกิดพิษต่อเซลล์และการพัฒนาแผนปฏิบัติการทำให้ผู้ผลิตสามารถส่งอุปกรณ์ของตนเพื่อขออนุมัติตามกฎข้อบังคับได้สำเร็จโดยไม่ต้องดำเนินการใด ๆ

EUROLAB พร้อมด้วยทีมงานที่มีความเชี่ยวชาญสูงและห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองระดับสากล การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ มันทำการทดสอบการวิเคราะห์การวัดการประเมินผลและบริการสร้างรายงานทั้งหมดอย่างสมบูรณ์และเชื่อถือได้