Lo standard “OECD TG 435 Metodo di test in vitro con barriera a membrana per l'irritazione cutanea” pubblicato nell'ambito delle linee guida OCSE sulla condotta aziendale responsabile per le società multinazionali (linee guida OCSE) descrive un metodo di test in vitro con barriera a membrana utilizzato per identificare sostanze chimiche corrosive. Questo metodo di test utilizza una membrana artificiale progettata per reagire alle sostanze chimiche corrosive in modo simile alla pelle degli animali.
Il metodo di test della barriera a membrana in vitro può essere utilizzato per testare solidi, liquidi ed emulsioni. Tuttavia, le sostanze acquose con valori di pH compresi tra 4,5 e 8,5 generalmente non sono adatte per i test.
Il metodo di prova descritto consente l'identificazione di sostanze chimiche e miscele corrosive e la sottocategorizzazione delle sostanze corrosive come consentito nel sistema armonizzato a livello globale di classificazione ed etichettatura delle sostanze chimiche. Questa classificazione si basa sul tempo di penetrazione della sostanza attraverso la barriera della membrana.
Questo sistema di test è costituito da due componenti:
Quando si applica questo sistema di prova, viene preparato un numero appropriato di repliche per ciascuna sostanza di prova e i suoi controlli corrispondenti. I tempi di applicazione della sostanza in esame alla barriera della membrana vengono registrati e scaglionati. Il tempo (in minuti) che intercorre tra l'applicazione della sostanza in esame alla membrana e la penetrazione della barriera viene utilizzato per determinare la corrosività della sostanza in esame.
La corrosività della pelle viene tradizionalmente determinata applicando la sostanza chimica in esame sulla pelle di animali vivi e valutando il grado di danno tissutale dopo un determinato periodo di tempo. Oltre allo standard OCSE TG 435, sono stati adottati numerosi altri metodi di test in vitro come alternative alla procedura standard in vivo sulla pelle di coniglio (OCSE TG 404) utilizzata per identificare le sostanze chimiche corrosive. Le linee guida dell'OCSE raccomandano l'uso di metodi di test in vitro convalidati e accettati.
In questo approccio modulare, i risultati positivi dei metodi di test in vitro vengono utilizzati per classificare una sostanza chimica come corrosiva senza la necessità di test sugli animali. In questo modo si mira a impedire l'uso di animali nei test e a prevenire il dolore e l'angoscia che potrebbero derivare dall'utilizzo degli animali a tale scopo.
Questo metodo di prova rileva i danni alla barriera della membrana causati dalle sostanze chimiche in esame corrosive al momento dell'applicazione della sostanza chimica in esame sulla superficie della barriera della membrana macromolecolare sintetica tramite un "sistema di rilevamento chimico", possibilmente mediante gli stessi meccanismi di irritazione che operano nella pelle viva.
La penetrazione o la rottura della barriera della membrana può essere misurata mediante numerose procedure o sistemi di rilevamento chimico, compreso il cambiamento nel colore del colorante indicatore di pH o un'altra proprietà della soluzione indicatrice sotto la barriera.
È necessario stabilire che la barriera a membrana sia valida per l'uso previsto, ovvero pertinente e affidabile. Ciò include la garanzia che i diversi preparati siano coerenti in termini di proprietà barriera, ad esempio la capacità di mantenere una barriera contro le sostanze chimiche non corrosive, la capacità di classificare le proprietà corrosive delle sostanze chimiche nelle sottocategorie di corrosività del sistema armonizzato a livello mondiale per la classificazione e etichettatura dei prodotti chimici. La classificazione assegnata si basa sul tempo impiegato da una sostanza chimica per attraversare la barriera della membrana e penetrare nella soluzione indicatrice.
Prima dell'uso di routine del metodo di prova con barriera a membrana in vitro, i laboratori devono conformarsi a questo standard e dimostrare la propria competenza tecnica classificando correttamente le sostanze di qualificazione proposte. Se una sostanza elencata non è disponibile o è giustificata, può essere utilizzata un'altra sostanza per la quale sono disponibili dati di riferimento in vivo e in vitro sufficienti.
I test devono essere eseguiti a temperatura ambiente (intervallo 17-25 gradi) e i componenti devono essere conformi alle condizioni specificate nella norma.
Prima di eseguire il test sulla barriera della membrana, viene eseguito un test di compatibilità chimica per determinare se la sostanza chimica in esame è rilevabile dal sistema di rilevamento chimico. Se il sistema di rilevamento della sostanza chimica non rileva la sostanza chimica in esame, il metodo di prova con barriera a membrana non è adatto per valutare la potenziale corrosività della sostanza chimica in esame e occorre utilizzare un metodo di prova diverso. Il sistema di rilevamento chimico e le condizioni di esposizione utilizzati per i test di compatibilità dovrebbero riflettere l'esposizione nei successivi test sulla barriera della membrana.
Se idonea al metodo di prova, una sostanza chimica in esame qualificata mediante test di compatibilità dovrebbe essere sottoposta a un test di categoria temporale, che è un test di screening per distinguere tra acidi o basi deboli e forti. Ad esempio, nel metodo di prova di riferimento convalidato, viene utilizzato un test di categorizzazione su scala temporale per indicare quali due scale temporali dovrebbero essere utilizzate a seconda che vengano rilevate riserve acide o alcaline significative. A seconda della riserva acida o alcalina della sostanza chimica in esame, per determinare la corrosività dovrebbero essere utilizzate due diverse scale dei tempi di passaggio e il sistema armonizzato a livello globale per la classificazione e l'etichettatura delle sottocategorie di corrosività cutanea delle sostanze chimiche.
La barriera della membrana è costituita da due componenti: un gel acquoso macromolecolare proteico e una membrana di supporto permeabile. Il gel proteico dovrebbe essere impermeabile ai liquidi e ai solidi ma può essere eroso e reso permeabile. La barriera a membrana completamente costruita deve essere conservata in condizioni predeterminate che hanno dimostrato di prevenire la degradazione del gel, come essiccazione, crescita microbica, taglio o fessurazione, che ne degraderebbero le prestazioni. È necessario determinare un periodo di conservazione accettabile e i preparati barriera a membrana non devono essere utilizzati dopo questo periodo. La membrana di supporto permeabile fornisce supporto meccanico al gel proteico durante il processo di gelificazione e l'esposizione alla sostanza chimica in esame. La membrana di supporto deve impedire al gel di cedere o spostarsi e deve essere facilmente permeabile a tutte le sostanze chimiche in esame.
In termini di sistema di rilevamento chimico, la soluzione indicatrice, che è la stessa soluzione utilizzata per i test di compatibilità, deve rispondere alla presenza di una sostanza chimica in esame. Dovrebbe essere utilizzato un colorante indicatore di pH o una combinazione di coloranti, come il rosso cresolo e l'arancio metile, che mostreranno un cambiamento di colore in risposta alla presenza della sostanza chimica in esame.
Tra i numerosi studi di testing, misurazione, analisi e valutazione che fornisce ad aziende di diversi settori, la nostra organizzazione fornisce anche i servizi di testing definiti nello standard "OCSE TG 435 Metodo di test in vitro con barriera a membrana per l'irritazione cutanea", con personale formato ed esperto e attrezzature tecnologiche avanzate.
Puoi chiederci di compilare il modulo per ottenere un appuntamento, ottenere informazioni più dettagliate o richiedere una valutazione.
EUROLAB attività di reporting e certificazione, United Accreditation Foundation (UAF), Agenzia turca di accreditamento (TÜRKAK), Fondazione per l'accreditamento delle imprese (EAF) sulla base dell'accreditamento fornito dal suo istituto. La Enterprise Accreditation Foundation (EAF) è anche firmataria delle Nazioni Unite (UN GLOBAL COMPACT).
