Lo standard “OECD TG 442E Sensibilizzazione cutanea in vitro – Test di attivazione della linea cellulare umana (h-CLAT)”, pubblicato nell’ambito delle linee guida OCSE sulla condotta aziendale responsabile per le imprese multinazionali (linee guida OCSE), è proposto per affrontare l’attivazione delle cellule dendritiche, un evento chiave nel percorso di esito avverso della sensibilizzazione cutanea.
Questa linea guida per i test affronta il rischio per la salute umana, ovvero la sensibilizzazione cutanea a seguito dell'esposizione a una sostanza chimica in esame. La sensibilizzazione cutanea si riferisce a una risposta allergica conseguente al contatto cutaneo con la sostanza chimica in esame, come definito dal Sistema mondiale armonizzato di classificazione ed etichettatura delle sostanze chimiche delle Nazioni Unite.
Questo standard fornisce quattro metodi di test in vitro che affrontano lo stesso evento chiave nel percorso del risultato negativo:
Tutti questi metodi vengono utilizzati per supportare la distinzione tra sensibilizzanti cutanei e non sensibilizzanti, in conformità con il Sistema mondiale armonizzato di classificazione ed etichettatura delle sostanze chimiche delle Nazioni Unite. I metodi di prova descritti in questa guida quantificano le variazioni nell'espressione di un insieme di geni associati al processo di attivazione di monociti e cellule dendritiche (firma del biomarcatore genomico) a seguito dell'esposizione a marcatori di superficie cellulare o sensibilizzanti.
Lo standard OCSE TG 442E è un robusto test in vitro per l'identificazione di potenziali sensibilizzanti chimici cutanei, con ampia applicabilità e un'accuratezza predittiva superiore al 90%. Questo test fornisce una previsione binaria che classifica i campioni di prova come sensibilizzanti o non sensibilizzanti cutanei. Lo scopo di queste linee guida è determinare se una sostanza chimica può causare sensibilizzazione cutanea, ovvero dermatite allergica da contatto, attivando specifiche risposte immunitarie senza dover effettuare test sugli animali.
Il test di attivazione della linea cellulare umana (h-CLAT) è un test in vitro (non su animali) utilizzato per valutare se una sostanza chimica può causare sensibilizzazione cutanea. La sensibilizzazione cutanea è una reazione allergica causata da una reazione eccessiva del sistema immunitario a una sostanza dopo il contatto con la pelle. L'h-CLAT è progettato per modellare un passaggio biologico chiave nello sviluppo della sensibilizzazione cutanea: l'attivazione delle cellule dendritiche (un tipo di cellula immunitaria) da parte di una sostanza chimica sensibilizzante.
Questo metodo di prova è importante perché sostituisce i vecchi test sugli animali. Inoltre, lo standard OCSE TG 442E è apprezzato perché fornisce metodi standardizzati, scientificamente convalidati e accettati a livello internazionale per valutare se le sostanze chimiche causano sensibilizzazione cutanea, un tipo di reazione allergica causata da ripetute esposizioni cutanee.
Il metodo h-CLAT quantifica le variazioni nell'espressione dei marcatori di superficie cellulare associati al processo di attivazione di monociti e cellule dendritiche nella linea cellulare di leucemia monocitaria umana THP-1 in seguito all'esposizione a sensibilizzanti. I livelli di espressione misurati dei marcatori di superficie cellulare delle cellule dendritiche vengono quindi utilizzati per supportare la distinzione tra sensibilizzanti e desensibilizzanti cutanei.
Questo metodo è un test in vitro che misura le variazioni nell'espressione dei marcatori di superficie cellulare nelle cellule THP-1 della linea cellulare di leucemia monocitaria umana dopo 24 ore di esposizione a una sostanza chimica in esame. Queste molecole di superficie sono tipici marcatori dell'attivazione dei monociti THP-1 e possono mimare l'attivazione delle cellule dendritiche, che svolgono un ruolo fondamentale nell'innesco delle cellule T. Le variazioni nell'espressione dei marcatori di superficie vengono misurate mediante citometria a flusso dopo colorazione cellulare con anticorpi marcati con fluorocromo. La misurazione della citotossicità viene eseguita simultaneamente per valutare se si verifica un aumento dell'espressione dei marcatori di superficie a concentrazioni subcitotossiche. L'intensità di fluorescenza relativa dei marcatori di superficie rispetto al controllo solvente/veicolo viene calcolata e utilizzata nel modello predittivo per supportare la distinzione tra sensibilizzanti e non sensibilizzanti.
In breve, la linea guida 442 dell'OCSE è essenziale per supportare test di sicurezza etici, affidabili e globalmente coerenti su sostanze chimiche e prodotti di consumo, in particolare alla luce dell'evoluzione delle normative e della richiesta pubblica di una scienza cruelty-free.
La nostra organizzazione, che da anni supporta aziende di tutti i settori attraverso un'ampia gamma di attività di test, misurazione, analisi e valutazione, si avvale di un solido team di dipendenti che seguono da vicino gli sviluppi scientifici e tecnologici globali e si migliorano costantemente. In questo contesto, forniamo anche servizi di test alle aziende in conformità con lo standard OCSE TG 442E Sensibilità cutanea in vitro - Test di attivazione della linea cellulare umana (h-CLAT).
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