Test cytotoksyczności

Test cytotoksyczności ma na celu ocenę ogólnej toksyczności wyrobów i materiałów medycznych. Test polega na ekstrakcji urządzeń w pożywce do hodowli komórkowej, a następnie wystawieniu płynu ekstrakcyjnego na działanie mysich fibroblastów (L929). Komórki pozostawia się do wzrostu w płynie ekstrakcyjnym przez pewien okres czasu, zanim komórki zostaną ocenione metodami jakościowymi lub ilościowymi. Badanie przeprowadzane jest na wszystkich wyrobach medycznych, surowcach i urządzeniach, które zostały zwalidowane do czyszczenia lub wytwarzają pozostałości w kontakcie z pacjentem.

Obowiązujące normy

• ANSI/AAMI/ISO 10993-5
• ANSI/AAMI/ISO 10993-12

Przykładowe funkcje

• CTX101: 400 mm2 lub 2 gramy; Należy go podzielić na 100 części, 100mm lub 3mg
• Kompletne urządzenie CTX110: 1, każde urządzenie powinno mieć 120 cm2 lub 4 gramy
• CTX112: Ilość próbki: 120 cm² lub 4 gramy. Czas realizacji wynosi 14 dni od otrzymania próbki.
• Kompletne urządzenie CTX115: 1, każde urządzenie powinno mieć 120 cm2 lub 4 gramy
• CTX116: kompletne urządzenie o powierzchni = 60 cm2. Wiele urządzeń można zgrupować, aby zapewnić minimalną wymaganą powierzchnię.
• CTX117: kompletne urządzenie o powierzchni = 60 cm2. Wiele urządzeń można zgrupować, aby zapewnić minimalną wymaganą powierzchnię.
• Kompletne urządzenie CTX125: 1, każde urządzenie powinno mieć 120 cm2 lub 4 gramy

Szkice robocze cytotoksyczności / MEM / posiew agaru

Elucja MEM

Wyroby/materiały są zwykle ekstrahowane w pożywce do hodowli komórek ssaków uzupełnionej surowicą (MEM) w temperaturze 37 ± 1ºC. Po ekstrakcji ekstrakty kontaktuje się z monowarstwą komórek L-929 (mysich fibroblastów). Następnie komórki pozostawia się do wzrostu w płynie ekstrakcyjnym przez określony czas przed oceną przy użyciu metod jakościowych lub ilościowych.

jakościowy

Ocena jakościowa obejmuje obserwację komórek pod mikroskopem i przypisanie stopnia cytotoksyczności (0-4). Stopień opiera się na szacunkowym procencie lizy (śmierci) i morfologii (wyglądzie) komórek. Jeśli wynik cytotoksyczności wynosi 2 (50% liza), materiały testowe zdają test.

ilościowy

Ocena ilościowa wykorzystuje barwnik tetrazolowy stosowany do oceny aktywności metabolicznej komórek. Wyniki podaje się jako procent żywotności (procent żywotnych komórek). Materiały testowe przechodzą test, jeśli procent żywotności wynosi 70%. Każde badanie obejmuje zwykle wielokrotne rozcieńczenia ekstraktu substancji testowej.

Agar udostępnił

Materiał umieszcza się na arkuszu agarozowym umieszczonym na wierzchu monowarstwy komórek L-929 i inkubuje w 24% ± 26% CO37 w temperaturze 1 ± 5°C przez 1-2 godzin. Po inkubacji mierzy się miejsce zniszczenia komórek i ocenia zgodnie ze skalą 10993-5 wymienioną w AAMI/ANSI/ISO 0-4. Jeśli odpowiedź cytotoksyczna nie jest większa niż stopień 2 (łagodnie reaktywna), materiał spełnia wymagania ISO. Chociaż Agar Overlay był historycznie akceptowaną metodą testowania, może być odpowiedni w przypadku przedkładania go niektórym agencjom regulacyjnym.

Błędy cytotoksyczności

Czasami urządzenie lub materiał wykazuje poziom reaktywności cytotoksycznej wyższy niż dopuszcza norma ANSI / AAMI / ISO 10993-5, co skutkuje niepowodzeniem testu. Nawet jeśli Twój produkt nie przeszedł testu cytotoksyczności, nie oznacza to, że Twoje urządzenie lub materiał nie są bezpieczne do użytku klinicznego. Oznacza to po prostu, że musisz zidentyfikować źródło błędu i ocenić ryzyko toksykologiczne.

Nasi eksperci mogą pomóc

Istnieje kilka możliwych przyczyn niepowodzenia cytotoksyczności, a EUROLAB oferuje usługi, które pomogą Ci zidentyfikować i ocenić niepowodzenie. Nasi specjaliści mogą ocenić potencjalne zagrożenia toksykologiczne dla bezpieczeństwa pacjentów.

Oceniamy materiały i procesy związane z urządzeniem. Na podstawie tych informacji nasi eksperci często zalecają ukierunkowaną chemię analityczną w celu określenia przyczyny niepowodzenia. Następnie możemy współpracować z klientami w celu uzasadnienia błędu poprzez testy i ocenę.

Konsultacje z naszymi ekspertami w celu ustalenia przyczyny niepowodzenia cytotoksyczności i opracowania planu działania prowadzą producentów do pomyślnego przedłożenia swoich urządzeń do zatwierdzenia przez organy regulacyjne bez dalszych działań.

EUROLAB ze swoim wysoce wyspecjalizowanym zespołem i międzynarodowymi akredytowanymi laboratoriami, Test cytotoksyczności Wszystkie usługi związane z testami, analizami, pomiarami, ocenami i generowaniem raportów są wykonywane całkowicie i niezawodnie.