Testy cytotoksyczności

Test cytotoksyczności ma na celu ocenę ogólnej toksyczności wyrobów i materiałów medycznych. Test obejmuje ekstrakcję urządzeń do pożywki do hodowli komórek, a następnie wystawienie wyekstrahowanego płynu na mysie komórki fibroblastów (L929).

Komórki mogą rosnąć w ekstrahowanym płynie przez pewien okres czasu, zanim komórki zostaną ocenione przy użyciu metod jakościowych lub ilościowych. Badanie przeprowadza się na wszystkich urządzeniach medycznych, surowcach i urządzeniach z walidacją czyszczenia lub produkcją pozostałości, które mają kontakt z pacjentem.

Obowiązujące normy

• ANSI/AAMI/ISO 10993-5
• ANSI/AAMI/ISO 10993-12

Przykładowe funkcje

• CTX101: 400 mm2 lub 2 gramy; Należy go podzielić na 100 części, 100mm lub 3mg
• Kompletne urządzenie CTX110: 1, każde urządzenie powinno mieć 120 cm2 lub 4 gramy
• CTX112: Ilość próbki: 120 cm² lub 4 gramy. Czas realizacji wynosi 14 dni od otrzymania próbki.
• Kompletne urządzenie CTX115: 1, każde urządzenie powinno mieć 120 cm2 lub 4 gramy
• CTX116: kompletne urządzenie o powierzchni = 60 cm2. Wiele urządzeń można zgrupować, aby zapewnić minimalną wymaganą powierzchnię.
• CTX117: kompletne urządzenie o powierzchni = 60 cm2. Wiele urządzeń można zgrupować, aby zapewnić minimalną wymaganą powierzchnię.
• Kompletne urządzenie CTX125: 1, każde urządzenie powinno mieć 120 cm2 lub 4 gramy

Szkice robocze cytotoksyczności / MEM / posiew agaru

Elucja MEM
Urządzenia / materiały są zwykle ekstrahowane w temperaturze 37 ± 1 ° C w pożywce do hodowli komórek ssaków wzbogaconej surowicą (MEM). Po ekstrakcji ekstrakty kontaktuje się z monowarstwą komórek L-929 (mysie fibroblasty). Następnie komórki pozostawia się do wzrostu w płynie ekstrakcyjnym przez określony czas, zanim zostaną ocenione metodami jakościowymi lub ilościowymi.

jakościowy

Ocena jakościowa obejmuje obserwację komórek pod mikroskopem i przypisanie stopnia cytotoksyczności (0-4). Stopień opiera się na szacunkowym procencie lizy (śmierci) i morfologii (wyglądzie) komórek. Jeśli wynik cytotoksyczności wynosi 2 (50% liza), materiały testowe zdają test.

ilościowy

Ocena ilościowa wykorzystuje barwnik tetrazolowy stosowany do oceny aktywności metabolicznej komórek. Wyniki podaje się jako procent żywotności (procent żywotnych komórek). Materiały testowe przechodzą test, jeśli procent żywotności wynosi 70%. Każde badanie obejmuje zwykle wielokrotne rozcieńczenia ekstraktu substancji testowej.

Agar udostępnił
materiały są zwykle testowane na powierzchni co najmniej 100 mm. Może być również stosowany do płynów, żeli lub proszków, używając co najmniej 100 mg na dołek. Materiał umieszcza się na arkuszu agarozowym, który umieszcza się na wierzchu monowarstwy komórek L-929 i inkubuje w temperaturze 24 ± 26 ° C w 37 ± 1% CO5 przez 1 - 2 godzin. Po inkubacji mierzy się strefę zniszczenia komórek i ocenia zgodnie ze skalą 10993-5 wymienioną w AAMI / ANSI / ISO 0-4. Jeśli odpowiedź cytotoksyczna nie jest większa niż 2 stopień (lekko reaktywny), materiał spełnia wymagania ISO. Chociaż Agar Overlay jest tradycyjnie akceptowaną metodą testowania, może być odpowiedni w przypadku wysyłki do niektórych agencji regulacyjnych.

Błędy cytotoksyczności

Czasami wyrób lub materiał będzie wykazywał wyższy poziom reaktywności cytotoksycznej niż pozwala na to norma ANSI / AAMI / ISO 10993-5 i zakończy się niepowodzeniem. Nawet jeśli Twój produkt nie przeszedł testu cytotoksyczności, nie oznacza to, że Twoje urządzenie lub przedmiot nie jest bezpieczny do użytku klinicznego. Oznacza to po prostu, że musisz zidentyfikować źródło błędu i ocenić wszelkie ryzyko toksykologiczne.

Nasi eksperci mogą pomóc

Istnieje kilka możliwych przyczyn niepowodzenia cytotoksyczności, a EUROLAB zapewnia usługi, które pomogą Ci zidentyfikować i ocenić błąd. Stamtąd nasi eksperci mogą ocenić potencjalne zagrożenia toksykologiczne dla bezpieczeństwa pacjenta.

Oceniamy materiały i procesy związane z urządzeniem. Na podstawie tych informacji nasi eksperci często zalecają ukierunkowaną chemię analityczną w celu określenia przyczyny niepowodzenia. Następnie możemy współpracować z klientami w celu uzasadnienia błędu poprzez testy i ocenę.

Dyskusja z naszymi ekspertami w celu zidentyfikowania przyczyny niepowodzenia cytotoksyczności i opracowania planu działania prowadzi producentów do udanego przedłożenia swoich wyrobów do zatwierdzenia przez organy regulacyjne bez dalszych działań.

EUROLAB ze swoim wysoce wyspecjalizowanym zespołem i międzynarodowymi akredytowanymi laboratoriami, Testy cytotoksyczności Wszystkie usługi związane z testami, analizami, pomiarami, ocenami i generowaniem raportów są wykonywane całkowicie i niezawodnie.