Sitotoksisite Testleri

Sitotoksisite testi, tıbbi cihazların ve malzemelerin genel toksisitesini değerlendirmek için tasarlanmıştır. Test, bir hücre kültürü ortamındaki cihazların ekstre edilmesini ve daha sonra ekstre sıvısının fare fibroblast hücrelerine (L929) maruz bırakılmasını içerir.

Hücrelerin, kalitatif veya kantitatif yöntemler kullanılarak değerlendirilmeden önce, hücrelerin ekstre sıvısında belirli bir süre büyümesine izin verilir. Test, hasta ile temas eden tüm tıbbi cihazlarda, hammaddelerde ve temizlik validasyonu veya kalıntı üretimi yapılan cihazlarda gerçekleştirilir.

Geçerli Standartlar

• ANSI / AAMI / ISO 10993-5
• ANSI / AAMI / ISO 10993-12

Örnek Özellikler

• CTX101: 400 mm2 veya 2 gram; 100mm veya 100mg olmak üzere 3 parçaya bölünmelidir
• CTX110: 1 tam cihaz, her cihaz 120 cm2 veya 4 gram olmalıdır
• CTX112: Numune Miktarı: 120 cm² veya 4 gram. Geri Dönüş Süresi örnek makbuzundan 14 gündür.
• CTX115: 1 tam cihaz, her cihaz 120 cm2 veya 4 gram olmalıdır
• CTX116: Yüzey alanı = 60 cm2 olan bir tam cihaz. Minimum yüzey alanı gereksinimini sağlamak için birden fazla cihaz bir araya toplanabilir.
• CTX117: Yüzey alanı = 60 cm2 olan bir tam cihaz. Minimum yüzey alanı gereksinimini sağlamak için birden fazla cihaz bir araya toplanabilir.
• CTX125: 1 tam cihaz, her cihaz 120 cm2 veya 4 gram olmalıdır

Sitotoksisite / MEM / Agar Kaplama için Çalışma Anahatları

MEM Elüsyonu
Cihazlar / materyaller genellikle serum takviyeli memeli hücre kültürü ortamında (MEM) 37 ± 1ºC ekstrakte edilir. Ekstraksiyondan sonra, ekstraktlar L-929 hücrelerinin (fare fibroblastları) bir tek tabakası ile temas ettirilir. Daha sonra hücreler, kalitatif veya kantitatif yöntemler kullanılarak değerlendirilmeden önce, ekstraksiyon sıvısında belirli bir süre boyunca büyümeye bırakılır.

Nitel

Kalitatif değerlendirme, hücrelerin mikroskop altında gözlemlenmesini ve bir sitotoksik derecenin atanmasını içerir (0-4). Derece, tahmini bir yüzde lizisine (ölüm) ve hücrelerin morfolojisine (görünüm) dayanmaktadır. Sitotoksik skor ≤ 2 (%% 50 liziz) ise test materyalleri testi geçer.

Nicel

Kantitatif değerlendirme, hücrelerin metabolik aktivitesini değerlendirmek için kullanılan bir tetrazolium boyası kullanır. Sonuçlar, yaşayabilirlik yüzdesi (canlı hücrelerin yüzdesi) olarak rapor edilir. Test malzemeleri, eğer canlılık yüzdesi ≥% 70 ise testi geçer. Test maddesi ekstraktının çoklu dilüsyonları genellikle her teste dahil edilir.

Agar paylaşımlı
malzemeleri genellikle en az 100 mm, yüzey alanı ile test edilmiştir. Ağırlık, oyuk başına en az 100 mg kullanılarak sıvılar, jeller veya tozlar için de kullanılabilir. Materyal, bir L-929 hücrelerinin tek tabakasının üstüne yerleştirilen ve 24 - 26 saat boyunca 37 ± 1 ° C'de% 5 ± 1 CO2 içinde inkübe edilen bir agaroz tabakasına yerleştirilir. İnkübasyondan sonra, hücre imha bölgesi, AAMI / ANSI / ISO 10993-5'te listelenen 0-4 ölçeğine göre ölçülür ve puanlanır. Sitotoksik yanıt derece 2'den (hafif reaktif) büyük değilse, malzeme ISO gereksinimlerini karşılar. Agar Overlay, tarihsel olarak kabul edilmiş bir test yöntemi olmasına rağmen, bazı düzenleyici kurumlara gönderilirken uygun olabilir.

Sitotoksisite Hataları

Bazen, bir cihaz veya malzeme, ANSI / AAMI / ISO 10993-5 standardının izin verdiğinden daha yüksek ve başarısız bir testle sonuçlanacak bir seviyede sitotoksik reaktivite sergileyecektir. Ürününüz sitotoksisite testinde başarısız olmuş olsa da, cihazınızın veya malzemenizin klinik kullanım için güvenli olmadığı anlamına gelmez. Bu sadece hatanın kaynağını belirlemek ve herhangi bir toksikolojik riski değerlendirmek zorunda olduğunuz anlamına gelir.

Uzmanlarımız Yardımcı Olabilir

Sitotoksisite başarısızlığının birkaç olası nedeni vardır ve EUROLAB, hatayı tanımlamanıza ve değerlendirmenize yardımcı olacak hizmetler sunar. Oradan, uzmanlarımız hasta güvenliği için olası toksikolojik riskleri değerlendirebilir.

Cihazla ilişkili materyalleri ve süreçleri değerlendiriyoruz. Bu bilgilere dayanarak, uzmanlarımız genellikle başarısızlığın nedenini belirlemek için hedeflenmiş analitik kimyayı önerecektir. Daha sonra test ve değerlendirme yoluyla hatayı haklı çıkarmak için müşterilerle birlikte çalışabiliriz.

Sitotoksisite başarısızlığının nedenini belirlemek ve bir eylem planı geliştirmek için uzmanlarımızla yapılan bir tartışma, üreticilerin cihazlarını başka bir işlem yapmadan düzenleyici onay için başarıyla göndermelerine yol açar.

EUROLAB, konusunda son derece uzman ekibiyle ve uluslararası akredite laboratuvarlarıyla birlikte, Sitotoksisite Testleri kapsamında tüm test, analiz, ölçüm, değerlendirme ve rapor oluşturma hizmetlerini eksiksiz ve güvenilir bir şekilde gerçekleştirir.