OECD 208 Test av landväxter: Test av plantuppkomst och planttillväxt

Standarden ” OECD 208 Terrestrial plant testing: Seedling emergens and seedling growth testing” , publicerad enligt OECD:s riktlinjer för ansvarsfullt affärsuppförande för multinationella företag (OECD:s riktlinjer), är utformad för att bedöma effekterna på plantuppkomst och tidig tillväxt av högre växter efter exponering för ett testämne som applicerats på jordytan eller jorden.

Fröna placeras i kontakt med jord som behandlats med testsubstansen och utvärderas med avseende på effekter, vanligtvis 14 till 21 dagar efter att 50 procent av plantorna i kontrollgruppen har kommit upp. De mätta slutpunkterna är visuell bedömning av plantornas uppkomst, biomassamätningar, skottlängd och synliga skadliga effekter på olika växtdelar. Testet kan utföras med en enda koncentration/dos för att bestämma dos-responskurvan eller som ett gränstest beroende på studiens syfte. Lämplig statistisk analys används för att erhålla den effektiva koncentrationen eller effektiva appliceringsdosen för de mest känsliga parametrarna av intresse. Dessutom kan koncentrationen utan observerad effekt och den lägsta observerade effektkoncentrationen beräknas i detta test.

Organisationen för ekonomiskt samarbete och utveckling (OECD) utvecklar standardiserade testriktlinjer för att bedöma kemikaliers potentiella faror för människors hälsa och miljön. Bland dessa är OECD-standard 208 ett viktigt verktyg för att bedöma ämnens fytotoxicitet för högre växter.

OECD 208-riktlinjen är utformad för att utvärdera effekterna av ett testämne, såsom allmänna kemikalier, biocider, växtskyddsmedel eller komposterat material, på plantornas uppkomst och tidiga tillväxt hos landväxter. Den används ofta för att avgöra om ett ämne är giftigt för växter, inklusive komposterat material från biologiskt nedbrytbara produkter såsom plast. Denna riktlinje är särskilt viktig i regelverk som ASTM D6400, som bedömer miljösäkerheten hos komposterat material.

Denna testmetod fokuserar på två primära resultat:

• Plantuppkomst: Frönas förmåga att gro och komma upp ur jord som behandlats med testsubstansen.
• Tidig tillväxt: Tillväxt och utveckling av plantor mätt med parametrar som skottlängd, biomassa och synliga fytotoxiska effekter.

Genom att utvärdera dessa slutpunkter hjälper OECD 208-standarden till att identifiera potentiella negativa effekter av kemikalier eller material på växtutveckling och säkerställer att produkter som kommer in på marknaden är säkra för ekosystem.

OECD 208-testet innebär att frön från utvalda växtarter exponeras för jord som behandlats med ett testämne, antingen applicerat på jordytan eller blandat i jorden. Testet tar vanligtvis 14 till 21 dagar efter att 50 procent av kontrollgruppens plantor har kommit fram.

Denna standard rekommenderar att man testar en mängd olika växtarter för att ta hänsyn till taxonomisk mångfald och säkerställa tillförlitliga resultat. Vanligtvis väljs sex till tio arter från olika växtfamiljer. Till exempel:

• Monokotyledoner: Till exempel havre, majs.
• Dikotyledoner: Till exempel raps, sojabönor, tomat, gurka.
• Icke-jordbruks- eller vilda arter: Till exempel vanlig rölleka eller ringblomma.

Valet av art beror på testsubstansens egenskaper och dess avsedda användning, såsom herbicider eller veterinärmedicinska läkemedel.

Testmetoden utförs under kontrollerade förhållanden för att säkerställa konsekvens och repeterbarhet:

• Jordberedning: Jorden siktas till ett djup av 2 mm och dess egenskaper (t.ex. andel organiskt kol, pH och elektrisk ledningsförmåga) mäts. För standardtester kan konstgjord jord bestående av kvartsand, vitmossa, kaolinlera och kalciumkarbonat användas.
• Krukstorlek: Vanligtvis tre krukor per kontroll- och testsubstansgrupp, 15 cm i diameter.
• Miljöförhållanden: Temperatur 22 grader plus/minus 1 grad, luftfuktighet 70 procent plus/minus 25 procent, fotoperiod minst 16 timmar ljus och ljusintensitet 350 plus/minus 50 µE/m2/sek, våglängd 400-700 nm.
• Testlängd: 14–21 dagar beroende på art och studiedesign.

Testet kan administreras i två format:

• Dos-responstestning: Flera koncentrationer av testsubstansen tillämpas för att bestämma en dos-responskurva, vilket gör det möjligt att beräkna mätvärden som EC50 (den koncentration som orsakar 50 procents effekt).
• Gränstest: En enda koncentration testas för att bekräfta om ämnet har betydande fytotoxiska effekter.

Fröna planteras i den behandlade jorden och testkrukorna återbevattnas med näringslösning efter behov. Observationer görs med jämna mellanrum (t.ex. på dag 7, 14 och 21) för att bedöma:

• Plantornas uppkomsthastighet.
• Under hela exiltiden.
• Skjut med färskvikt eller biomassa.
• Synliga fytotoxiska effekter (t.ex. kloros, nekros eller onormal tillväxt).

För att testet ska anses giltigt måste följande kriterier vara uppfyllda:

• I kontrollgruppen bör plantornas framväxt vara minst 70 procent.
• Kontrollplantor bör inte uppvisa synliga fytotoxiska effekter.
• Minst 90 procent av kontrollplantorna som uppstod måste överleva studiens varaktighet.

OECD 208-standarden tillämpas i stor utsträckning i en mängd olika reglerings- och miljösammanhang:

• Kemikaliesäkerhetsbedömning: Används för att bedöma fytotoxiciteten hos industrikemikalier, bekämpningsmedel och biocider enligt förordningar som Europeiska unionens registrering, utvärdering, godkännande och begränsning av kemikalier (REACH).
• Biologisk nedbrytningstestning: Som en del av ASTM D6400-standarden utvärderar OECD 208-standarden säkerheten hos komposterade material som härrör från biologiskt nedbrytbara plaster, och säkerställer att de inte släpper ut giftiga komponenter i miljön.
• Veterinärmedicinska läkemedel: Denna standard har anpassats för att testa effekterna av ämnen som appliceras på gödsel och sedan blandas i jorden, vilket simulerar verkliga jordbruksscenarier.
• Utveckling av herbicider: Denna standard hjälper till att utvärdera effekterna av herbicider på icke-målväxter, vilket säkerställer att de inte skadar biologisk mångfald eller ekosystem.

OECD 208-standarden är en stark riktlinje, men vissa utmaningar kvarstår:

• Artkänslighet: Växtarter återspeglar inte alltid känsligheten hos vilda eller icke-målväxter, vilket har lett till att icke-växtarter har inkluderats i uppdaterade riktlinjer.
• Testlängd: Perioden på 14–21 dagar kanske inte återspeglar långsiktiga reproduktionseffekter. Detta behandlas i kompletterande standarder som OECD 227 (för sprayapplikationer) eller ISO 22030.
• Uppkomstvariabilitet: Vissa arter som inte är grödor uppfyller inte kriteriet på 70 procents uppkomst och kräver förbehandling av fröna, såsom kallstratifiering, för att förbättra groningen.

Nyligen genomförda uppdateringar av denna standard har åtgärdat dessa problem genom att öka antalet rekommenderade testtyper och förtydliga myndighetskrav, vilket ger bredare tillämpbarhet och förbättrad känslighet. OECD 208-standarden anses vara tillräcklig för långsiktig riskbedömning vid testning av en mängd olika arter.

OECD 208-standarden är därför en hörnsten inom miljötoxikologi och tillhandahåller en standardiserad metod för att bedöma de fytotoxiska effekterna av kemikalier och komposterat material på landväxter. Dess rigorösa metod, mångsidiga artval och kontrollerade förhållanden säkerställer tillförlitliga och reproducerbara resultat, vilket gör den till ett viktigt verktyg för tillsynsmyndigheter, branschfolk och forskare. Genom att identifiera potentiella risker för växtlivet bidrar denna standard till säker utveckling och användning av kemikalier, skydda ekosystem och främja hållbara metoder.

Vår organisation, som har varit verksam i många år och noggrant följer den globala utvecklingen inom vetenskap och teknik, har ett team av erfarna yrkesmän och en bred infrastruktur för att utföra tester, mätningar och analyser inom en mängd olika områden för företag inom alla sektorer. I detta sammanhang tillhandahåller vi även testtjänster i enlighet med OECD 208 Terrestrial Plant Testing: Seedling Emergence and Seedling Growth Testing-standarden.