Qualité de l'eau ISO 9308 - Comptage des Escherichia Coli et des bactéries coliformes

Qualité de l'eau ISO 9308 - Comptage des Escherichia Coli et des bactéries coliformes

La norme ISO 9308, élaborée par l'Organisation internationale de normalisation (ISO), comprend les sections suivantes sous le titre principal « Qualité de l'eau - Dénombrement d'Escherichia coli et de bactéries coliformes » :

Qualité de l'eau ISO 9308 - Comptage des Escherichia Coli et des bactéries coliformes

  • ISO 9308-1 Partie 1 : Méthode de filtration membranaire pour les eaux à faible flore bactérienne de fond
  • ISO 9308-2 Partie 2 : Méthode du nombre le plus probable
  • ISO 9308-3 Partie 3 : Surface et eaux usées e. détection et dénombrement de coli (nombre le plus probable)

La norme ISO 9308-1 décrit une méthode de dénombrement d'Escherichia coli (E. coli) et des coliformes. Cette méthode repose sur la filtration sur membrane, suivie d'une culture sur milieu gélosé chromogène pour coliformes et du calcul du nombre de micro-organismes cibles dans l'échantillon. En raison de la faible sélectivité du milieu gélosé différentiel, la croissance bactérienne résiduelle empêche un dénombrement fiable d'E. coli et des coliformes, notamment dans les eaux de surface ou les eaux de puits peu profonds. Cette méthode n'est donc pas adaptée à ces eaux. La norme est particulièrement adaptée aux eaux faiblement chargées en bactéries, présentant moins de 100 colonies sur gélose chromogène pour coliformes. Il peut s'agir d'eau potable, d'eau de piscine désinfectée ou d'eau traitée provenant des stations de traitement d'eau potable. Certaines souches d'E. coli, telles qu'Escherichia coli O157, qui sont bêta-D-glucuronidase négatives, ne sont pas détectées. Comme elles sont positives à la bêta-D-galactosidase, elles apparaissent comme des bactéries coliformes sur cette gélose chromogène.

Aux fins de la présente norme,

  • Les bactéries coliformes font référence aux membres des entérobactéries qui expriment la bêta-D-galactosidase.
  • Escherichia coli fait référence à un membre des entérobactéries qui exprime la bêta-D-galactosidase et la bêta-D-glucuronidase.

La norme ISO 9308-2 décrit une méthode de dénombrement d'Escherichia coli et de coliformes dans l'eau. Cette méthode repose sur la culture des organismes cibles en milieu liquide et le calcul du nombre le plus probable d'organismes. Elle est applicable à tous les types d'eau, y compris celles contenant des quantités importantes de matières en suspension et de bactéries hétérotrophes avec un niveau de fond élevé. Cependant, elle ne doit pas être utilisée pour le dénombrement des coliformes dans l'eau de mer. Dans ce cas, une dilution au 1/10 dans de l'eau stérile est généralement requise, bien que la méthode se soit avérée efficace avec certaines eaux de mer présentant des concentrations en sel inférieures à la normale. En l'absence de données justifiant l'utilisation de la méthode sans dilution, une dilution au 1/10 est appliquée.

Aux fins de la présente norme,

  • Les bactéries coliformes font référence à un membre des entérobactéries qui expriment l'enzyme bêta-D-galactosidase.
  • Escherichia coli fait référence à un membre des entérobactéries qui exprime à la fois les enzymes bêta-D-galactosidase et bêta-D-glucuronidase.

La norme ISO 9308-3 décrit une méthode simplifiée de détection et de dénombrement d'Escherichia coli dans les eaux de surface et les eaux usées par inoculation en milieu liquide. Cette méthode est applicable à tous les types d'eaux de surface et d'eaux usées, notamment celles riches en matières en suspension. Elle ne convient pas à l'eau potable ni aux autres types d'eaux dont la concentration limite est inférieure à 15 UFC/100 ml. Cette méthode ne convient pas non plus au dénombrement et à la détection des coliformes autres qu'E. coli.

Aux fins de la présente norme, Escherichia coli fait référence à des microorganismes positifs à la bêta-D-glucuronidase se développant à une température d'incubation de 4 degrés dans un milieu liquide spécifié contenant du 44-méthylumbelliféryl-bêta-D-glucuronide.

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