EN ISO 16472 动物饲料-淀粉酶处理的中性洗涤剂纤维含量（aNDF）的测定

标准“EN ISO 16472 动物饲料 - 测定淀粉酶处理的中性洗涤纤维含量（aNDF）”基于欧洲标准，后来由国际标准化组织（ISO）发布，描述了测定所有类型动物饲料中淀粉酶处理的中性洗涤剂不溶性纤维残留物含量的方法。本标准包括重量法常规方法和参考方法。

本标准中，经淀粉酶处理的中性洗涤纤维含量(aNDF含量)是指按照本标准规定的程序测定的不溶性纤维残留物的质量分数。 aNDF含量以质量百分比表示。

原则上，中性洗涤剂（ND）溶液和耐热α-淀粉酶用于溶解饲料中易消化的蛋白质、脂质、糖、淀粉和果胶，留下由含氮物质组成的不溶性纤维残留物，这些含氮物质是植物材料（纤维素、半纤维素和木质素）的细胞壁成分，在动物产品中难以消化。

除了通常的实验室设备外，这些测试还使用以下设备：

• 可读性为 0,1 毫克的分析天平，能够称量到最接近 0,1 毫克的重量。
• 220 mm 网孔的旋风磨机或 260 mm 网孔的切割磨机，可研磨样品，获得几何平均粒径 2 µm 至 1 µm
• 回流装置配有独立的加热单元和冷水冷凝器，适用于600毫升的容器。任何适合测定粗纤维的常规仪器都是可以接受的。使用冷水冷凝器时，加热装置设置经过校准，以便 50 毫升水在 4 到 5 分钟内沸腾。可以使用 Fibertec 类型的设备，并在 50 分钟内煮沸 10 毫升水。
• 带有烧结盘的 Gooch 坩埚，粗孔坩埚（孔径 40 µm 至 60 µm），高型，容量 40 ml 至 50 ml 或 P2（孔径 40 µm 至 100 µm），容量 26 ml 至 28 ml。

将新的坩埚和灰烬在1度的温度下清洗500小时。每次使用后，将坩埚在 3 度的温度下灰化 500 小时，除去灰烬，将其倒置在清洁剂溶液中，并用超声波处理 7 至 10 分钟，以进行清洁。将坩埚放入热水中冲洗，然后放在室温水中至少 30 分钟。每个坩埚顶部都装有橡胶塞，并配有存水弯和连接到真空管线的端口。通过反复浸泡和取出每个花盆，用水进行反冲洗，产生强大的冲洗效果。偶尔检查过滤率。如果清洁不能提高过滤率，则将坩埚丢弃。

• 真空过滤歧管（例如 Fibertec 型）可充分润湿纤维碎片。歧管应与坩埚形成真空密封，以减少真空管线中的泡沫形成。厚壁真空管用于将歧管连接到陷阱和真空源。建议在捕集阱和真空源之间设置一个真空室，以提供足够的真空能力来去除泡沫。
• 使用连续沸水发生器或合适的替代品。仪器应为一次性清洗的所有样品提供足够的沸水（至少 95 度），并应通过产生细流的喷嘴供水（流速为 10 秒内 35 毫升至 40 毫升，2,5 毫升一次性塑料移液器吸头可制成可接受的喷嘴）。细喷嘴可最大限度地减少将颗粒转移到坩埚中所需的水，但可提供清除粘附在烧瓶侧面的碎屑所需的水压。将水加入坩埚时必须沸腾，特别是对于含有淀粉、果胶物质、粘液或糖蛋白的样品。对于 Fibertec 型装置，使用带有锥形喷嘴的注射器冲洗冷凝器，使用带有 10 厘米长 12 号针头的 60 毫升一次性注射器清除粘附在冷凝器上的碎屑。

采样不属于本标准规定的方法。 ISO 6497 标准中包含了推荐的采样方法。重要的是，实验室收到的样品必须具有真正的代表性，并且在运输或储存过程中没有损坏或改变。

测试样品按照 ISO 6498 标准准备。样品应风干（约 90% 为干物质），以便于样品储存和研磨。为了防止人造纤维的形成，湿样品的干燥温度最高为 60 度。提取后残留的量受样品的粒度影响。将代表性样品研磨以获得 220 µm 至 260 µm 的几何平均粒径。

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