EN ISO 16472 Aliments pour animaux - Détermination de la teneur en fibres traitées à l'amylase et au détergent neutre (aNDF)

La norme « EN ISO 16472 Aliments pour animaux - Détermination de la teneur en fibres insolubles dans un détergent neutre traitées à l'amylase (aNDF) », basée sur une norme européenne et publiée ultérieurement par l'Organisation internationale de normalisation (ISO), décrit les méthodes de détermination de la teneur en résidus de fibres insolubles dans un détergent neutre traitées à l'amylase dans tous les types d'aliments pour animaux. Cette norme comprend une méthode de routine gravimétrique et une méthode de référence.

Aux fins de la présente norme, la teneur en fibres au détergent neutre traitées à l'amylase (teneur en aNDF) fait référence à la fraction massique de résidus de fibres insolubles déterminée par la procédure spécifiée dans la présente norme. La teneur en aNDF est exprimée en pourcentage massique.

En principe, une solution de détergent neutre (ND) et une alpha-amylase thermostable sont utilisées pour dissoudre les protéines, les lipides, les sucres, les amidons et les pectines facilement digestibles dans les aliments, laissant un résidu fibreux insoluble composé de substances azotées qui sont des composants de la paroi cellulaire des matières végétales (cellulose, hémicellulose et lignine) et indigestes dans les produits animaux.

En plus du matériel de laboratoire habituel, le matériel suivant est utilisé dans ces tests :

• Balance analytique avec une précision de lecture de 0,1 mg, capable de peser à 0,1 mg près.
• Broyeur cyclone avec maille de 220 mm ou broyeur à couteaux avec maille de 260 mm qui peut broyer des échantillons pour obtenir une granulométrie moyenne géométrique de 2 µm à 1 µm
• Appareil à reflux avec unités de chauffage séparées et condenseurs d'eau froide, adapté aux récipients de 600 ml. Tout instrument conventionnel adapté à la détermination des fibres brutes est acceptable. Lors de l'utilisation de condenseurs à eau froide, les réglages de l'unité de chauffage sont calibrés de manière à ce que 50 ml d'eau bout en 4 à 5 minutes. Un appareil de type Fibertec peut être utilisé et devrait faire bouillir 50 ml d'eau en 10 minutes.
• Creuset Gooch avec disque fritté, creuset poreux grossier (taille des pores 40 µm à 60 µm), forme haute, capacité de 40 ml à 50 ml ou P2 (taille des pores 40 µm à 100 µm), capacité de 26 ml à 28 ml.

Les nouveaux creusets et les cendres sont nettoyés à 1 degrés pendant 500 heure. Après chaque utilisation, les creusets sont nettoyés par incinération à 3 degrés pendant 500 heures, en retirant les cendres, en les retournant dans la solution détergente et en les soniquant pendant 7 à 10 minutes. Les creusets sont rincés à l’eau chaude et laissés dans de l’eau à température ambiante pendant au moins 30 minutes. Un bouchon en caoutchouc est fixé au sommet de chaque creuset, équipé d'un siphon et d'un orifice relié à la ligne de vide. En trempant et en retirant chaque pot à plusieurs reprises, il est lavé à contre-courant avec de l'eau, créant un fort effet de rinçage. Le taux de filtration est vérifié occasionnellement. Si le nettoyage n’améliore pas le taux de filtration, le creuset est jeté.

• Collecteur de filtre à vide (type Fibertec par exemple) permettant un mouillage adéquat des débris fibreux. Le collecteur doit assurer une étanchéité au vide avec le creuset afin de réduire la formation de mousse dans les conduites de vide. Un tube à vide à paroi épaisse est utilisé pour connecter le collecteur à un piège et à une source de vide. Une chambre à vide est recommandée entre le piège et la source de vide pour fournir une capacité de vide adéquate pour éliminer la mousse.
• Un générateur d’eau bouillante continue ou une alternative appropriée est utilisé. L'instrument doit fournir suffisamment d'eau bouillante (au moins 95 degrés) pour tous les échantillons lavés en même temps et doit être alimenté par une buse qui produit un jet fin (un débit de 10 ml à 35 ml en 40 secondes, une pointe de pipette en plastique jetable de 2,5 ml constitue une buse acceptable). Une buse fine minimise l’eau nécessaire pour transférer les particules dans le creuset, mais fournit la pression d’eau nécessaire pour éliminer les débris adhérant au côté du flacon. Il est essentiel que l’eau bout lorsqu’elle est ajoutée aux creusets, en particulier pour les échantillons contenant de l’amidon, des substances pectiques, du mucilage ou des glycoprotéines. Pour l'appareil de type Fibertec, une seringue avec une buse de pulvérisation conique est utilisée pour rincer les condenseurs et une seringue jetable de 10 ml avec une aiguille de calibre 12 de 60 cm de long est utilisée pour éliminer les débris adhérant aux condenseurs.

L’échantillonnage ne fait pas partie de la méthode spécifiée dans cette norme. Une méthode d’échantillonnage recommandée est incluse dans la norme ISO 6497. Il est important que le laboratoire reçoive un échantillon véritablement représentatif et qui n’a pas été endommagé ou altéré pendant le transport ou le stockage.

Les échantillons d’essai sont préparés conformément à la norme ISO 6498. Les échantillons doivent être séchés à l’air (environ 90 % de matière sèche) pour faciliter le stockage et le broyage des échantillons. Pour éviter la formation de fibres artificielles, les échantillons humides sont séchés à un maximum de 60 degrés. La quantité de résidus restant après l’extraction est affectée par la taille des particules de l’échantillon. Des échantillons représentatifs sont broyés pour obtenir une taille de particules moyenne géométrique de 220 µm à 260 µm.

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