Essai sur plantes terrestres OCDE 208 : Essai de levée et de croissance des plantules

La norme « OCDE 208 Essais sur les plantes terrestres : Essais de levée et de croissance des plantules » , publiée dans le cadre des lignes directrices de l’OCDE sur la conduite responsable des entreprises multinationales (lignes directrices de l’OCDE), est conçue pour évaluer les effets sur la levée et la croissance précoce des plantules de plantes supérieures après exposition à une substance d’essai appliquée à la surface du sol ou au sol.

Les graines sont placées en contact avec le sol traité avec la substance d'essai et leurs effets sont évalués, généralement 14 à 21 jours après la levée de 50 % des plantules du groupe témoin. Les paramètres mesurés sont l'évaluation visuelle de la levée des plantules, la mesure de la biomasse, la longueur des pousses et les effets néfastes visibles sur différentes parties de la plante. L'essai peut être réalisé avec une seule concentration/dose pour déterminer la courbe dose-réponse ou comme essai limite, selon l'objectif de l'étude. Une analyse statistique appropriée permet d'obtenir la concentration efficace ou la dose d'application efficace pour les paramètres d'intérêt les plus sensibles. De plus, cet essai permet de calculer la concentration sans effet observé et la concentration minimale avec effet observé.

L'Organisation de coopération et de développement économiques (OCDE) élabore des lignes directrices normalisées pour les essais visant à évaluer les dangers potentiels des produits chimiques pour la santé humaine et l'environnement. Parmi celles-ci, la norme OCDE 208 est un outil essentiel pour évaluer la phytotoxicité des substances pour les plantes supérieures.

La ligne directrice OCDE 208 est conçue pour évaluer les effets d'une substance d'essai, telle que des produits chimiques courants, des biocides, des produits phytosanitaires ou des matières compostées, sur la levée des plantules et la croissance précoce des plantes terrestres. Elle est largement utilisée pour déterminer la toxicité d'une substance pour les plantes, y compris les matières compostées issues de produits biodégradables comme les plastiques. Cette ligne directrice est particulièrement importante dans les cadres réglementaires tels que la norme ASTM D6400, qui évalue la sécurité environnementale des matières compostées.

Cette méthode de test se concentre sur deux résultats principaux :

• Levée des semis : Capacité des graines à germer et à émerger du sol traité avec la substance d’essai.
• Croissance précoce : Croissance et développement des plantules mesurés par des paramètres tels que la longueur des pousses, la biomasse et les effets phytotoxiques apparents.

En évaluant ces paramètres, la norme OCDE 208 permet d’identifier les effets néfastes potentiels des produits chimiques ou des matériaux sur le développement des plantes et garantit que les produits entrant sur le marché sont sans danger pour les écosystèmes.

L'essai OCDE 208 consiste à exposer des semences d'espèces végétales sélectionnées à un sol traité avec une substance d'essai, appliquée à la surface du sol ou mélangée à celui-ci. L'essai dure généralement de 14 à 21 jours après la levée de 50 % des plantules du groupe témoin.

Cette norme recommande de tester diverses espèces végétales afin de tenir compte de la diversité taxonomique et de garantir des résultats fiables. Généralement, six à dix espèces de différentes familles végétales sont sélectionnées. Par exemple :

• Monocotylédones : Par exemple, l’avoine, le maïs.
• Dicotylédones : Par exemple, le colza, le soja, la tomate, le concombre.
• Espèces non agricoles ou sauvages : Par exemple, l'achillée millefeuille ou le souci.

Le choix des espèces dépend des propriétés de la substance d’essai et de son utilisation prévue, comme les herbicides ou les médicaments vétérinaires.

La méthode d’essai est réalisée dans des conditions contrôlées pour garantir la cohérence et la répétabilité :

• Préparation du sol : Le sol est tamisé sur une profondeur de 2 mm et ses propriétés (par exemple, teneur en carbone organique, pH et conductivité électrique) sont mesurées. Pour les tests standards, un sol artificiel composé de sable de quartz, de tourbe de sphaigne, d’argile kaolinique et de carbonate de calcium peut être utilisé.
• Taille du pot : Généralement trois pots par groupe de substances de contrôle et d'essai, de 15 cm de diamètre.
• Conditions environnementales : température 22 degrés plus/moins 1 degré, humidité 70 pour cent plus/moins 25 pour cent, photopériode minimum 16 heures de lumière et intensité lumineuse 350 plus/moins 50 µE/m2/sec, longueur d'onde 400-700 nm.
• Durée du test : 14 à 21 jours selon l’espèce et la conception de l’étude.

Le test peut être administré sous deux formats :

• Test dose-réponse : plusieurs concentrations de la substance d'essai sont appliquées pour déterminer une courbe dose-réponse, permettant de calculer des paramètres tels que la CE50 (la concentration qui provoque un effet à 50 %).
• Test limite : Une seule concentration est testée pour confirmer si la substance a des effets phytotoxiques significatifs.

Les graines sont plantées dans le sol traité, et les pots d'essai sont sub-irrigués avec une solution nutritive selon les besoins. Des observations sont effectuées à intervalles réguliers (par exemple, les jours 7, 14 et 21) pour évaluer :

• Taux d'émergence des plantules.
• Tout au long de l'exil.
• Tirez du poids frais ou de la biomasse.
• Effets phytotoxiques visibles (par exemple, chlorose, nécrose ou croissance anormale).

Pour que le test soit considéré comme valide, les critères suivants doivent être remplis :

• Dans le groupe témoin, l’émergence des plantules doit être d’au moins 70 pour cent.
• Les semis témoins ne devraient pas présenter d’effets phytotoxiques visibles.
• Au moins 90 pour cent des semis témoins qui ont émergé doivent survivre pendant toute la durée de l’étude.

La norme OCDE 208 est largement appliquée dans divers contextes réglementaires et environnementaux :

• Évaluation de la sécurité chimique : utilisée pour évaluer la phytotoxicité des produits chimiques industriels, des pesticides et des biocides dans le cadre de réglementations telles que l'enregistrement, l'évaluation, l'autorisation et la restriction des substances chimiques de l'Union européenne (REACH).
• Tests de biodégradation : Dans le cadre de la norme ASTM D6400, la norme OCDE 208 évalue la sécurité des matériaux compostés dérivés de plastiques biodégradables, garantissant qu'ils ne libèrent pas de composants toxiques dans l'environnement.
• Médicaments vétérinaires : Cette norme a été adaptée pour tester les effets des substances appliquées au fumier puis mélangées au sol, simulant des scénarios agricoles réels.
• Développement d’herbicides : cette norme permet d’évaluer l’impact des herbicides sur les plantes non ciblées, garantissant qu’ils ne nuisent pas à la biodiversité ou aux écosystèmes.

La norme OCDE 208 est une ligne directrice solide, mais certains défis demeurent :

• Sensibilité des espèces : Les espèces végétales ne reflètent pas toujours la sensibilité des plantes sauvages ou non ciblées, ce qui a conduit à l’inclusion d’espèces non végétales dans les lignes directrices mises à jour.
• Durée de l'essai : La période de 14 à 21 jours peut ne pas refléter les effets à long terme sur la reproduction. Ce point est abordé dans des normes complémentaires telles que l'OCDE 227 (pour les applications par pulvérisation) ou l'ISO 22030.
• Variabilité de l'émergence : Certaines espèces non cultivées ne répondent pas au critère d'émergence de 70 % et nécessitent des prétraitements des semences tels que la stratification à froid pour améliorer la germination.

Les récentes mises à jour de cette norme ont résolu ces problèmes en augmentant le nombre de types d'essais recommandés et en clarifiant les exigences réglementaires, offrant ainsi une applicabilité plus large et une sensibilité améliorée. La norme OCDE 208 est considérée comme adéquate pour l'évaluation des dangers à long terme lors de tests sur diverses espèces.

La norme OCDE 208 est ainsi une pierre angulaire de la toxicologie environnementale, fournissant une méthode normalisée d'évaluation des effets phytotoxiques des produits chimiques et des matières compostées sur les plantes terrestres. Sa méthodologie rigoureuse, la sélection d'espèces diversifiées et les conditions contrôlées garantissent des résultats fiables et reproductibles, ce qui en fait un outil essentiel pour les autorités de réglementation, les professionnels de l'industrie et les chercheurs. En identifiant les risques potentiels pour la vie végétale, cette norme contribue au développement et à l'utilisation sûrs des produits chimiques, à la protection des écosystèmes et à la promotion de pratiques durables.

Notre organisation, établie depuis de nombreuses années et suivant attentivement les avancées scientifiques et technologiques mondiales, dispose d'une équipe de professionnels expérimentés et d'une infrastructure complète pour réaliser des tests, des mesures et des analyses dans un large éventail de domaines pour des entreprises de tous secteurs. Dans ce contexte, nous proposons également des services d'essais conformes à la norme OCDE 208 « Essais sur les plantes terrestres : Essais de levée et de croissance des plantules ».