Tiêu chuẩn EN 13704: Đánh giá hoạt tính diệt bào tử của các chất khử trùng hóa học được sử dụng trong môi trường thực phẩm, công nghiệp, gia đình và các cơ sở công cộng.

Tiêu chuẩn châu Âu “EN 13704 Chất khử trùng hóa học - Thử nghiệm định lượng huyền phù để đánh giá hoạt tính diệt bào tử của chất khử trùng hóa học được sử dụng trong môi trường thực phẩm, công nghiệp, gia đình và cơ sở - Phương pháp thử nghiệm và yêu cầu (giai đoạn 2, bước 1)” mô tả phương pháp thử nghiệm (giai đoạn 2, bước 1) và các yêu cầu tối thiểu đối với hoạt tính diệt bào tử của các sản phẩm khử trùng hóa học được sử dụng trong môi trường thực phẩm, công nghiệp, gia đình và cơ sở, tạo thành một chế phẩm đồng nhất, ổn định về mặt vật lý trong nước cứng. Các sản phẩm được sử dụng trên mô sống không thuộc phạm vi của tiêu chuẩn này, ngoại trừ các khu vực và tình huống cần khử trùng y tế và các sản phẩm được sử dụng để vệ sinh tay trong các khu vực đã đề cập.

Tiêu chuẩn này áp dụng cho ít nhất các trường hợp sau:

• Chế biến, phân phối và bán lẻ các sản phẩm sau:
• Thức ăn có nguồn gốc động vật:
• Sữa và các sản phẩm từ sữa
• Thịt và sản phẩm thịt
• Cá, hải sản và các sản phẩm liên quan
• Trứng và sản phẩm trứng
• thức ăn gia súc
• Và vân vân
• Thực phẩm có nguồn gốc thực vật:
• đồ uống
• Trái cây, rau quả và các sản phẩm chế biến từ chúng (bao gồm đường và các sản phẩm chưng cất)
• Bột mì, sản phẩm xay xát và bánh mì
• thức ăn gia súc
• Và vân vân
• Khu vực công cộng và dân cư:
• Cơ sở thực phẩm
• Không gian công cộng
• Giao thông công cộng
• trường
• Vườn ươm
• Trung tâm thương mại
• phòng tập thể dục
• Thùng chứa rác
• khách sạn
• nhà ở
• Các khu vực không nhạy cảm về mặt lâm sàng trong bệnh viện
• văn phòng
• Và vân vân
• Các lĩnh vực công nghiệp khác:
• Vật liệu đóng gói
• Công nghệ sinh học (men, protein, enzyme)
• ma túy
• Mỹ phẩm và các sản phẩm chăm sóc cá nhân
• dệt may
• Ngành công nghiệp vũ trụ, ngành công nghiệp máy tính
• Và vân vân

Với tiêu chuẩn này, không thể xác định hoạt tính diệt bào tử của sản phẩm chưa pha loãng vì luôn xảy ra hiện tượng pha loãng khi thêm vắc xin và chất can thiệp. Sản phẩm chỉ có thể được thử nghiệm ở nồng độ 80% hoặc thấp hơn.

Phương pháp được mô tả được thiết kế để xác định hoạt tính của các chế phẩm thương mại hoặc hoạt chất đối với bào tử trong điều kiện sử dụng.

Thử nghiệm trong phòng thí nghiệm mô phỏng sát với điều kiện ứng dụng thực tế. Các điều kiện được lựa chọn (thời gian tiếp xúc, nhiệt độ, trạng thái huyền phù, v.v.) phản ánh các thông số thường gặp trong thực tế, bao gồm cả các điều kiện có thể ảnh hưởng đến hiệu quả của chất khử trùng. Mỗi nồng độ sử dụng thu được từ thử nghiệm này tương ứng với các điều kiện thí nghiệm đã được xác định. Các điều kiện này được thiết kế để phục vụ mục đích chung và cung cấp một tham chiếu giữa các phòng thí nghiệm và các loại sản phẩm. Tuy nhiên, các điều kiện sử dụng được khuyến nghị cho một sản phẩm có thể khác nhau đối với một số ứng dụng, và do đó, có thể cần thêm các điều kiện thử nghiệm khác.

Yêu cầu cơ bản là: Khi được thử nghiệm theo bảng có tiêu đề "Điều kiện thử nghiệm tối thiểu và bổ sung" được đưa ra trong tiêu chuẩn, sản phẩm phải cho thấy sự giảm ít nhất 3 đơn vị logarit thập phân (lg).

Nguyên tắc thử nghiệm bao gồm việc thêm một dung dịch huyền phù bào tử vi khuẩn trong dung dịch chất ức chế, mô phỏng điều kiện sạch hoặc bị ô nhiễm, vào mẫu sản phẩm cần kiểm tra, được pha loãng trong nước cứng (hoặc nước đối với các sản phẩm dùng sẵn). Hỗn hợp được duy trì ở nhiệt độ thử nghiệm cụ thể là ±1 độ C trong thời gian tiếp xúc xác định (±10 giây). Nếu thời gian tiếp xúc là 1 phút, dung sai cho phép là ±5 giây.

Trong thời gian tiếp xúc này, một mẫu được lấy ra, và tác dụng diệt bào tử trong mẫu này ngay lập tức được trung hòa hoặc ức chế bằng một phương pháp đã được kiểm chứng. Phương pháp ưu tiên là pha loãng-trung hòa. Nếu không có chất trung hòa phù hợp, phương pháp lọc màng sẽ được sử dụng. Số lượng bào tử vi khuẩn còn sống sót trong mỗi mẫu được xác định, và mức giảm số lượng vi khuẩn sống được tính toán.

Tóm lại, tiêu chuẩn EN 13704 chứa một phương pháp tiêu chuẩn hóa để đánh giá hoạt tính diệt bào tử của các chất khử trùng hóa học. Bản cập nhật mới nhất của tiêu chuẩn này đã đưa ra các yêu cầu nghiêm ngặt hơn.

Bào tử vi khuẩn, chẳng hạn như của các loài Bacillus và Clostridium, nằm trong số những dạng vi sinh vật có khả năng kháng thuốc cao nhất. Chúng có thể sống sót trong điều kiện khắc nghiệt, bao gồm nhiệt độ cao, khô hạn và nhiều hóa chất, khiến chúng trở thành mối lo ngại đáng kể trong môi trường nơi ô nhiễm có thể dẫn đến bùng phát dịch bệnh, chẳng hạn như các nhà máy chế biến thực phẩm (ví dụ: Bacillus subtilis phổ biến trong đất và thực phẩm). Mặc dù các chất khử trùng thông thường có thể tiêu diệt vi khuẩn ở dạng sinh dưỡng, nhưng chúng có thể không hiệu quả đối với bào tử, vì vậy các tuyên bố về khả năng tiêu diệt bào tử cụ thể cần có bằng chứng xác thực.

Tiêu chuẩn EN 13704 cung cấp một phương pháp nhất quán, có thể lặp lại để kiểm tra xem chất khử trùng có thể vô hiệu hóa bào tử một cách hiệu quả trong điều kiện được kiểm soát hay không. Tiêu chuẩn này đặc biệt quan trọng đối với các môi trường không phải y tế, ngoại trừ khử trùng y tế hoặc các sản phẩm được sử dụng trên mô sống (ngoại trừ vệ sinh tay trong các lĩnh vực này).

Tiêu chuẩn này áp dụng cho các chất khử trùng được sử dụng trong các lĩnh vực sau:

• Chế biến thực phẩm và đồ uống (ví dụ: các sản phẩm từ sữa, thịt, trái cây).
• Các cơ sở công nghiệp.
• Môi trường gia đình và các cơ sở khác (ví dụ: trường học, dịch vụ ăn uống, phương tiện giao thông công cộng).

Phương pháp được mô tả là thử nghiệm giai đoạn 2, bước 1. Đó là thử nghiệm huyền phù trong phòng thí nghiệm mô phỏng hiệu quả cơ bản (không phải sử dụng trên bề mặt hoặc trong điều kiện thực tế, đây là thử nghiệm giai đoạn 2, bước 2).

Để được kiểm nghiệm theo tiêu chuẩn này, các sản phẩm phải tạo thành một hỗn hợp đồng nhất và ổn định trong nước cứng.

Phương pháp này là một thử nghiệm định lượng huyền phù:

• Các bào tử của vi sinh vật thử nghiệm được treo trong dung dịch chứa chất ức chế (0,3 g/L hoặc 3 g/L albumin bò để mô phỏng điều kiện sạch hoặc bị ô nhiễm, và thêm sữa cho các thử nghiệm đặc thù về sữa).
• Chất khử trùng được thêm vào ở nồng độ quy định (ít nhất 80% đối với các sản phẩm pha sẵn).
• Sau một khoảng thời gian tiếp xúc nhất định (1-60 phút, có thể có khoảng nghỉ), hỗn hợp được trung hòa hoặc lọc để chấm dứt tác dụng.
• Số lượng bào tử sống sót được đếm và mức giảm số lượng bào tử sống được tính toán.

Các điều kiện thử nghiệm bao gồm:

• Nhiệt độ: Thông thường là 20 độ C, nhưng có thể lên đến 75 độ C nếu phù hợp với mục đích sử dụng sản phẩm.
• Vi sinh vật bắt buộc: Bacillus subtilis.
• Các thành phần bổ sung cho các mục đích sử dụng cụ thể: Clostridium sporogenes (kỵ khí), Bacillus cereus (hiếu khí).

Để được công nhận có khả năng diệt bào tử, chất khử trùng phải đạt được mức giảm ít nhất 3 log10 (tiêu diệt 99,9%) số lượng bào tử sống trong điều kiện thử nghiệm. Điều này phải được chứng minh ở nhiều nồng độ khác nhau, bao gồm cả phạm vi hoạt động và không hoạt động.

Các bước kiểm tra xác minh đảm bảo rằng quá trình trung hòa không gây hại cho bào tử và các cá thể sống sót được phục hồi đúng cách.

Trong nhiều năm qua, tổ chức của chúng tôi, với đội ngũ nhân viên có năng lực và kinh nghiệm, đã thấu hiểu nhu cầu của khách hàng, cung cấp các dịch vụ kiểm thử tiên tiến mà họ yêu cầu và hỗ trợ họ trong việc thiết lập, triển khai và cải tiến các hệ thống quản lý. Trong khuôn khổ này, chúng tôi cũng cung cấp các dịch vụ kiểm thử theo tiêu chuẩn EN 13704.