EN ISO 13906 Rações Animais - Determinação dos Teores de Fibra em Detergente Ácido (ADF) e Lignina em Detergente Ácido (ADL)

A norma “EN ISO 13906 Alimentos para animais - Determinação dos teores de fibra em detergente ácido (ADF) e lignina em detergente ácido (ADL)”, que se baseia em uma norma europeia e posteriormente publicada pela Organização Internacional de Padronização (ISO), descreve um método para a determinação de resíduos insolúveis de fibra em detergente ácido (ADF) e lignina em detergente ácido (ADL) em todos os tipos de ração animal. O limite de detecção é de 1 por cento em massa para fibra em detergente ácido e 1,5 por cento em massa para lignina em detergente ácido. São utilizados a rotina gravimétrica e o método de referência.

Para os fins desta norma, aplicam-se os seguintes termos e definições:

• Teor de fibra em detergente ácidoé a fração mássica do resíduo fibroso obtido após tratamento com detergente catiônico em ácido sulfúrico 0,5 mol/l. É constituído principalmente por celulose, lignina e complexos de proteínas insolúveis. O teor de fibras em detergente ácido é expresso em porcentagem.
• O teor de lignina em detergente ácido é a fração mássica do resíduo restante após a celulose e outras matérias orgânicas serem dissolvidas com 72 frações mássicas (12,00 mol/l) de ácido sulfúrico. O teor de lignina em detergente ácido é expresso em porcentagem.

Na primeira etapa do método, é determinado o teor de fibras em detergente ácido. A solução detergente catiônica é usada para remover carboidratos lábeis em ácido, proteínas que não se convertem em produtos Maillard (danificadas pelo calor) e gorduras. O resíduo fibroso restante é principalmente celulose e lignina (produtos vegetais) ou complexos de proteínas insolúveis (produtos de origem animal e rações danificadas pelo calor). O resíduo é pesado para determinar o teor de fibras em detergente ácido. Na segunda etapa, o resíduo restante é dissolvido com fração mássica 72 (12,00 mol/l) de ácido sulfúrico, deixando o teor de lignina em detergente ácido determinado gravimetricamente.

Como reagentes, são utilizados apenas reagentes de grau analítico reconhecido e somente água destilada ou deionizada ou água de pureza pelo menos equivalente, salvo indicação em contrário.

• Solução detergente ácida: A 1 l de ácido sulfúrico 0,5 mol/l, adiciona-se 20 g de brometo de cetil(trimetil)amônio (grau técnico), previamente padronizado. Agite para facilitar a dissolução.
• Ácido sulfúrico (fração de massa de 72% (12,00 mol/L)): O ácido sulfúrico é padronizado para uma densidade relativa de 20 a 1,634 graus, ou 12,00 mol/L, usando as equações fornecidas no padrão. Pese a água em um balão volumétrico de 1 000 ml e adicione lentamente a quantidade calculada de ácido sulfúrico, agitando ocasionalmente. O frasco é resfriado em banho-maria enquanto é adicionada a massa necessária de ácido. Ele é resfriado a 20 graus e seu volume é verificado. O menisco deve estar a 20 cm da marca de calibração a 0,5 graus. Se o volume for muito grande, 5 ml de água são removidos e 4,55 ml de ácido sulfúrico são adicionados. Se o volume for muito pequeno, retire 1,5 ml de água e adicione 2,5 ml de água.
• Auxiliar de filtragem, terra diatomácea.
• Acetona, grau técnico.
• n-Octanol, agente antiespumante.

Uma amostra representativa deve ser enviada ao laboratório. A amostra não deve ter sido danificada ou alterada durante o transporte ou armazenamento. A amostragem não faz parte do método especificado nesta norma. Um método de amostragem recomendado está incluído no padrão ISO 6497.

A amostra de teste é preparada de acordo com a norma ISO 6498. A amostra de laboratório é reduzida a aproximadamente 100 g (equivalente em peso seco) e metade dela é colocada em um recipiente fechado e à prova de umidade para determinação da umidade total. Os materiais úmidos restantes (umidade mínima de 15% da fração de massa) são secos em um forno ventilado a no máximo 60 graus até uma umidade máxima de 15% da fração de massa. A secagem a no máximo 60 graus é necessária para evitar a formação de fibras artificiais e lignina. Amostras de teste secas são moídas usando um moinho. A moagem separa os materiais, com o material mais fibroso passando pela peneira por último. O material no moedor não é descartado, mas adicionado à amostra de teste moída.

A pré-extração é necessária para amostras de teste que contenham pelo menos 10% em massa de gordura e é recomendada para amostras de teste que contenham pelo menos 5% em massa de gordura. As amostras de teste são pesadas em cadinhos pré-selecionados e secos em estufa, colocados em um coletor de filtração de cadinho, extraídos quatro vezes com 30 ml a 40 ml de acetona, o material deixado de molho em acetona por 3 a 5 minutos de cada vez, aspirado para remover todos os traços de acetona, seco ao ar por 10 a 15 minutos e transferido para um recipiente de refluxo de resíduos para análise de fibras. Após a extração com detergente ácido, o mesmo cadinho é usado para coletar o resíduo de fibra para cada porção de teste.

Para aparelhos do tipo Fibertec, o cadinho é colocado em uma unidade de extração a frio e o cadinho é preenchido com 25 ml de acetona. Deixa-se agir por 3 a 5 minutos e filtra-se mediante aplicação de vácuo. Este processo é repetido três vezes.

Nossa organização, que vem tentando dar suporte a empresas de todos os setores com uma ampla gama de estudos de testes, medições, análises e avaliações realizados há anos, conta com uma equipe forte que acompanha de perto os desenvolvimentos no mundo no campo da ciência e tecnologia e se aprimora constantemente. Neste contexto, também são prestados serviços de testes às empresas de acordo com a norma “EN ISO 13906 Alimentos para animais - Determinação dos teores de fibra em detergente ácido (ADF) e lignina em detergente ácido (ADL)”.