EN ISO 13906 Krmivá pre zvieratá - Stanovenie obsahu vlákniny (ADF) a lignínu (ADL) ako kyslého detergentu

Norma EN ISO 13906 Krmivo pre zvieratá – Stanovenie obsahu vlákniny z kyslého detergentu (ADF) a lignínu z kyslého detergentu (ADL), pôvodne európska norma a následne publikovaná Medzinárodnou organizáciou pre normalizáciu (ISO), opisuje metódu na stanovenie nerozpustného zvyšku vlákniny z kyslého detergentu (ADF) a lignínu z kyslého detergentu (ADL) vo všetkých druhoch krmív pre zvieratá. Detekčný limit je 1 % hmotnostný podiel pre vlákninu z kyslého detergentu a 1,5 % hmotnostný podiel pre lignín z kyslého detergentu. Používajú sa gravimetrické rutinné a referenčné metódy.

Na účely tohto štandardu platia nasledujúce pojmy a definície:

• Obsah vlákniny v kyslom detergenteObsah vlákniny v kyslom detergente je hmotnostný zlomok vláknitého zvyšku získaného po úprave katiónovým detergentom v kyseline sírovej s koncentráciou 0,5 mol/l. Pozostáva prevažne z celulózy, lignínu a nerozpustných proteínových komplexov. Obsah vlákniny v kyslom detergente sa vyjadruje v percentách.
• Obsah lignínu v kyslom detergente je hmotnostný zlomok zvyšku, ktorý zostáva po rozpustení celulózy a iných organických látok v kyseline sírovej s hmotnostným podielom 72 % (12,00 mol/l). Obsah lignínu v kyslom detergente sa vyjadruje v percentách.

V prvej fáze metódy sa stanoví obsah vlákniny v kyslom detergente. Na odstránenie kyselinovo labilných sacharidov, bielkovín, ktoré sa nepremieňajú na Maillardove produkty (poškodené teplom), a tukov sa používa katiónový roztok detergentu. Zostávajúci vláknitý zvyšok tvorí predovšetkým celulóza a lignín (rastlinné produkty) alebo nerozpustné proteínové komplexy (živočíšne produkty a tepelne poškodené krmivo). Zvyšok sa odváži, aby sa stanovil jeho obsah vlákniny v kyslom detergente. V druhej fáze sa zostávajúci zvyšok rozpustí v kyseline sírovej s hmotnostným podielom 72 percent (12,00 mol/l) a obsah lignínu sa stanoví gravimetricky.

Pokiaľ nie je uvedené inak, ako činidlá sa používajú iba uznávané činidlá analytickej kvality a iba destilovaná alebo deionizovaná voda alebo voda s minimálne porovnateľnou čistotou.

• Roztok kyslého detergentu: Do 1 litra kyseliny sírovej s koncentráciou 0,5 mol/l pridajte 20 g predtým štandardizovaného cetyl(trimetyl)amóniumbromidu (technickej kvality). Pretrepte, aby sa uľahčilo rozpustenie.
• Kyselina sírová (hmotnostný podiel 72 % (12,00 mol/l)): Kyselina sírová sa štandardizuje na relatívnu hustotu 1,634 pri 20 stupňoch Celzia alebo 12,00 mol/l pomocou rovníc uvedených v norme. Voda sa odváži do 1000 ml odmernej banky a pomaly sa pridáva vypočítané množstvo kyseliny sírovej, občas sa pretrepáva. Počas pridávania požadovaného množstva kyseliny sa banka ochladí vo vodnom kúpeli. Ochladí sa na 20 stupňov Celzia a overí sa objem. Meniskus by mal byť do 0,5 cm od kalibračnej značky pri 20 stupňoch Celzia. Ak je objem príliš veľký, odoberie sa 5 ml vody a pridá sa 4,55 ml kyseliny sírovej. Ak je objem príliš malý, odoberie sa 1,5 ml vody a pridá sa 2,5 ml vody.
• Filtračná pomocná látka: kremelina.
• Acetón, technický.
• n-oktanol, protipenivé činidlo.

Do laboratória sa musí zaslať reprezentatívna vzorka. Vzorka nesmie byť počas prepravy alebo skladovania poškodená ani zmenená. Odber vzoriek nie je súčasťou metódy opísanej v tejto norme. Odporúčaná metóda odberu vzoriek je uvedená v norme ISO 6497.

Skúšobná vzorka sa pripraví podľa normy ISO 6498. Laboratórna vzorka sa zredukuje na približne 100 g (ekvivalent suchej hmotnosti) a polovica sa umiestni do vlhkotesnej, uzavretej nádoby na stanovenie celkovej vlhkosti. Zvyšný mokrý materiál (s hmotnostným podielom vlhkosti najmenej 15 %) sa suší vo vetranej peci pri maximálnej teplote 60 stupňov Celzia na maximálny hmotnostný podiel vlhkosti 15 %. Sušenie pri maximálnej teplote 60 stupňov Celzia je potrebné, aby sa zabránilo tvorbe umelých vlákien a lignínu. Suché skúšobné vzorky sa melú pomocou mlyna. Mletím sa oddelí materiál s najvláknitejšou časťou, ktorá prešla sitom ako posledná. Materiál z mlyna sa neodhadzuje, ale pridáva sa k mletej skúšobnej vzorke.

Predbežná extrakcia je potrebná pre testované vzorky obsahujúce najmenej 10 hmotnostných percent tuku a odporúča sa pre testované vzorky obsahujúce najmenej 5 hmotnostných percent tuku. Testované vzorky sa odvážia do predosiatych, v peci vysušených téglikov, téglik sa umiestni do filtračného potrubia, štyrikrát sa extrahuje 30 ml až 40 ml acetónu, pričom sa materiál nechá namočený v acetóne 3 až 5 minút, vákuom sa odstránia všetky stopy acetónu, suší sa na vzduchu 10 až 15 minút a zvyšok sa prenesie do refluxnej nádoby na analýzu vlákien. Ten istý téglik sa používa na zhromaždenie zvyškov vlákien pre každú testovaciu dávku po extrakcii kyslým detergentom.

V prípade zariadenia typu Fibertec sa téglik umiestni do jednotky na studenú extrakciu a naplní sa 25 ml acetónu. Nechá sa pôsobiť 3 až 5 minút a potom sa prefiltruje pomocou vákua. Tento proces sa opakuje trikrát.

Naša organizácia, ktorá už roky podporuje podniky zo všetkých sektorov širokou škálou testovacích, meracích, analytických a hodnotiacich štúdií, má silnú pracovnú silu, ktorá pozorne sleduje vývoj vedy a techniky na celom svete a neustále sa zlepšuje. V tomto rámci poskytujeme podnikom aj testovacie služby v súlade s normou „EN ISO 13906 Krmivo pre zvieratá – Stanovenie obsahu vlákniny v kyslom detergente (ADF) a lignínu v kyslom detergente (ADL)“.