EN ISO 16472 Krmivá pre zvieratá – Stanovenie obsahu vlákniny (aNDF) v neutrálnom detergente upravenom amylázou

Norma EN ISO 16472 Krmivo pre zvieratá – Stanovenie obsahu vlákniny (aNDF) upravenej amylázou v neutrálnom detergente, ktorá je založená na európskej norme a následne publikovaná Medzinárodnou organizáciou pre normalizáciu (ISO), opisuje metódy na stanovenie obsahu nerozpustných vláknitých zvyškov upravených amylázou v neutrálnom detergente vo všetkých druhoch krmív pre zvieratá. Táto norma obsahuje gravimetrickú rutinnú metódu a referenčnú metódu.

Na účely tejto normy sa obsah vlákniny v neutrálnom detergente ošetrenom amylázou (obsah aNDF) vzťahuje na hmotnostný podiel nerozpustných zvyškov vlákniny stanovený postupom špecifikovaným v tejto norme. Obsah aNDF sa vyjadruje v hmotnostných percentách.

V zásade sa roztok neutrálneho detergentu (ND) a tepelne odolná alfa-amyláza používajú na rozpustenie ľahko stráviteľných bielkovín, lipidov, cukrov, škrobov a pektínov v krmive, pričom zanechávajú nerozpustný vláknitý zvyšok pozostávajúci z dusíkatých látok, ktoré sú zložkami bunkových stien rastlinných materiálov (celulóza, hemicelulóza a lignín) a sú nestráviteľné v živočíšnych produktoch.

Tieto testy zvyčajne používajú bežné laboratórne vybavenie, ale najmä nasledujúce vybavenie:

• Analytická váha schopná vážiť s presnosťou čo najbližšie k 0,1 mg s odčítateľnosťou 0,1 mg.
• Cyklónový mlyn s 2 mm sitom alebo rezný mlyn s 1 mm sitom dokáže zomlieť vzorky tak, aby sa dosiahla geometrická stredná veľkosť častíc 220 µm až 260 µm.
• Refluxné zariadenie so samostatnými ohrievacími jednotkami a chladičmi studenej vody, vhodné pre nádoby s objemom 600 ml. Prijateľné je akékoľvek konvenčné zariadenie vhodné na stanovenie surovej vlákniny. Pri použití chladičov studenej vody sú nastavenia ohrievacej jednotky kalibrované tak, aby 50 ml vody zovrelo za 4 až 5 minút. Môže sa použiť zariadenie typu Fibertec, ktoré by malo zovrieť 50 ml vody za 10 minút.
• Goochove tégliky s fritovými diskami sú dostupné v dvoch formách: s hrubými pórmi (veľkosť pórov 40 µm až 60 µm), s vysokou pórovitosťou, s objemom 40 ml až 50 ml alebo P2 (veľkosť pórov 40 µm až 100 µm), s objemom 26 ml až 28 ml.

Nové tégliky a popol sa čistia pri teplote 500 stupňov Celzia počas 1 hodiny. Po každom použití sa tégliky čistia spopolnením pri teplote 500 stupňov Celzia počas 3 hodín, odstránením popola, ich prevrátením do roztoku čistiaceho prostriedku a sonikáciou počas 7 až 10 minút. Tégliky sa opláchnu v horúcej vode a nechajú sa namočené vo vode izbovej teploty najmenej 30 minút. Na vrch každého téglika sa umiestni gumená zátka vybavená lapačom a otvorom pripojeným k vákuovému potrubiu. Každý téglik sa opakovane ponára a oplachuje vodou, čím sa vytvorí silný oplachovací účinok. Rýchlosť filtrácie sa pravidelne kontroluje. Ak čistenie nezlepší rýchlosť filtrácie, téglik sa zlikviduje.

• Rozdeľovač vákuového filtra (napr. typu Fibertec), ktorý umožňuje dostatočné zmáčanie vláknitých zvyškov. Rozdeľovač by mal poskytovať vákuovotesné utesnenie s téglikom, aby sa znížila tvorba peny vo vákuových potrubiach. Na pripojenie rozdeľovača k odlučovaču a zdroju vákua sa používa hrubostenná vákuová trubica. Medzi odlučovačom a zdrojom vákua sa odporúča vákuová komora, ktorá zabezpečí dostatočnú vákuovú kapacitu na odstránenie peny.
• Používa sa generátor kontinuálnej vriacej vody alebo vhodná alternatíva. Zariadenie musí poskytovať dostatok vriacej vody (najmenej 95 stupňov) pre všetky vzorky premyté naraz a privádzať ju cez trysku, ktorá vytvára jemný prúd (prietok 35 ml až 40 ml za 10 sekúnd, prijateľná tryska je 2,5 ml jednorazová plastová pipeta). Jemná tryska minimalizuje množstvo vody potrebné na prenos častíc do téglika, ale poskytuje tlak vody potrebný na odstránenie zvyškov priľnutých k okraju banky. Pre vzorky obsahujúce škrob, pektínové látky, sliz alebo glykoproteíny je vriaca voda rozhodujúca pri pridávaní vody do téglikov. Pri zariadení typu Fibertec sa na preplachovanie kondenzátorov používa striekačka s kužeľovou rozprašovacou tryskou a na odstránenie zvyškov priľnutých k kondenzátorom sa používa 10 cm dlhá jednorazová striekačka s objemom 60 ml a ihlami kalibru 12.

Odber vzoriek nie je súčasťou metódy špecifikovanej v tejto norme. Odporúčaná metóda odberu vzoriek je zahrnutá v norme ISO 6497. Je dôležité, aby laboratórium získalo skutočne reprezentatívnu vzorku, ktorá nebola počas prepravy alebo skladovania poškodená ani zmenená.

Testovacie vzorky sa pripravujú v súlade s normou ISO 6498. Vzorky by sa mali sušiť na vzduchu (približne 90 % sušiny) pre jednoduché skladovanie a mletie. Aby sa zabránilo tvorbe umelých vlákien, mokré vzorky sa sušia pri maximálnej teplote 60 stupňov Celzia. Množstvo zvyšku zostávajúceho po extrakcii je ovplyvnené veľkosťou častíc vzorky. Reprezentatívne vzorky sa melú, aby sa dosiahla geometrická stredná veľkosť častíc 220 µm až 260 µm.

Naša organizácia už mnoho rokov podporuje podniky zo všetkých sektorov širokou škálou testovacích, meracích, analytických a hodnotiacich štúdií. Máme silný tím zamestnancov, ktorí pozorne sledujú globálny vývoj vo vede a technike a neustále sa zlepšujú. V tomto rámci poskytujeme aj testovacie služby v súlade s normou „EN ISO 16472 Krmivo pre zvieratá – Stanovenie obsahu vlákniny (aNDF) upravenej amylázou v neutrálnych detergentoch“.