EN ISO 16472 Piensos para animales: determinación del contenido de fibra detergente neutra tratada con amilasa (aNDF)

La norma “EN ISO 16472 Alimentos para animales. Determinación del contenido de fibra detergente neutra tratada con amilasa (aNDF)”, que se basa en una norma europea y posteriormente publicada por la Organización Internacional de Normalización (ISO), describe métodos para determinar el contenido de residuos de fibra insoluble en detergente neutro tratado con amilasa en todos los tipos de alimentos para animales. Esta norma incluye un método de rutina gravimétrico y un método de referencia.

A los efectos de esta norma, el contenido de fibra detergente neutra tratada con amilasa (contenido de aNDF) se refiere a la fracción de masa de residuos de fibra insoluble determinada mediante el procedimiento especificado en esta norma. El contenido de aNDF se expresa como porcentaje en masa.

En principio, se utilizan soluciones de detergente neutro (ND) y alfa-amilasa termoestable para disolver proteínas, lípidos, azúcares, almidones y pectinas fácilmente digeribles en los alimentos, dejando un residuo fibroso insoluble que consiste en sustancias nitrogenadas que son componentes de la pared celular de los materiales vegetales (celulosa, hemicelulosa y lignina) e indigeribles en los productos animales.

Además del equipamiento habitual de laboratorio, en estas pruebas se utilizan los siguientes equipos:

• Balanza analítica con legibilidad de 0,1 mg, capaz de pesar con una precisión de 0,1 mg.
• Molino ciclónico con malla de 220 mm o molino de corte con malla de 260 mm que puede moler muestras para obtener un tamaño de partícula medio geométrico de 2 µm a 1 µm
• Dispositivo de reflujo con unidades de calentamiento separadas y condensadores de agua fría, adecuado para recipientes de 600 ml. Cualquier instrumento convencional adecuado para la determinación de fibra cruda es aceptable. Al utilizar condensadores de agua fría, los ajustes de la unidad de calentamiento están calibrados para que 50 ml de agua hiervan en 4 a 5 minutos. Se puede utilizar un dispositivo tipo Fibertec que debería hervir 50 ml de agua en 10 minutos.
• Crisol Gooch con disco fritado, crisol de poros gruesos (tamaño de poro de 40 µm a 60 µm), forma alta, capacidad de 40 ml a 50 ml o P2 (tamaño de poro de 40 µm a 100 µm), capacidad de 26 ml a 28 ml.

Los crisoles nuevos y las cenizas se limpian a 1 grados durante 500 hora. Después de cada uso, los crisoles se limpian incinerándolos a 3 grados durante 500 horas, retirando la ceniza, colocándolos boca abajo en la solución de detergente y sonicándolos durante 7 a 10 minutos. Los crisoles se enjuagan con agua caliente y se dejan en agua a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos. En la parte superior de cada crisol se coloca un tapón de goma, equipado con una trampa y un puerto conectado a la línea de vacío. Al sumergir y retirar repetidamente cada olla, se lava a contracorriente con agua, lo que crea un fuerte efecto de enjuague. La tasa de filtración se comprueba ocasionalmente. Si la limpieza no mejora la tasa de filtración, se desecha el crisol.

• Colector de filtro de vacío (por ejemplo, tipo Fibertec) que permite una humectación adecuada de los residuos fibrosos. El colector debe proporcionar un sello hermético al vacío con el crisol para reducir la formación de espuma en las líneas de vacío. Se utilizan tubos de vacío de paredes gruesas para conectar el colector a una trampa y a una fuente de vacío. Se recomienda una cámara de vacío entre la trampa y la fuente de vacío para proporcionar una capacidad de vacío adecuada para eliminar la espuma.
• Se utiliza un generador de agua hirviendo continuo o una alternativa adecuada. El instrumento debe proporcionar suficiente agua hirviendo (al menos 95 grados) para todas las muestras lavadas a la vez y debe alimentarse a través de una boquilla que produzca un chorro fino (un caudal de 10 ml a 35 ml en 40 segundos, una punta de pipeta de plástico desechable de 2,5 ml constituye una boquilla aceptable). Una boquilla fina minimiza el agua necesaria para transferir partículas al crisol, pero proporciona la presión de agua necesaria para eliminar los residuos adheridos al costado del matraz. Es fundamental que el agua hierva al añadirla a los crisoles, especialmente para muestras que contienen almidón, sustancias pectínicas, mucílagos o glicoproteínas. Para el dispositivo tipo Fibertec, se utiliza una jeringa con boquilla cónica para enjuagar los condensadores y una jeringa descartable de 10 ml con una aguja calibre 12 de 60 cm de largo para retirar los residuos adheridos a los condensadores.

El muestreo no es parte del método especificado en esta norma. La norma ISO 6497 incluye un método de muestreo recomendado. Es importante que el laboratorio reciba una muestra que sea verdaderamente representativa y que no haya sido dañada o alterada durante el transporte o almacenamiento.

Las muestras de prueba se preparan de acuerdo con la norma ISO 6498. Las muestras deben secarse al aire (aproximadamente 90 por ciento de materia seca) para facilitar su almacenamiento y molienda. Para evitar la formación de fibras artificiales, las muestras húmedas se secan a un máximo de 60 grados. La cantidad de residuo que queda después de la extracción se ve afectada por el tamaño de partícula de la muestra. Se muelen muestras representativas para obtener un tamaño de partícula medio geométrico de 220 µm a 260 µm.

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