La norme « ASTM E2180-18 Standard test for determining the activity of antimicrobien agents incorporated in polymeric or hydrophobic materials » publiée par l'American Society for Testing and Materials (ASTM) décrit une méthode de test utilisée pour évaluer (quantitativement) l'activité antimicrobienne d'agents incorporés ou liés à des surfaces hydrophobes ou polymères principalement planes (bidimensionnelles). Cette méthode se concentre principalement sur l’évaluation de l’activité antibactérienne, bien que d’autres micro-organismes tels que les levures et les conidies fongiques puissent également être testés à l’aide de cette méthode.
Le véhicule d'inoculation est une suspension d'agar qui réduit la tension superficielle du support d'inoculation salin et permet la formation d'un pseudo-biofilm, ce qui permet un contact plus uniforme de l'inoculum avec la surface du test. Cette méthode de test facilite le test des surfaces hydrophobes à l’aide de cellules maintenues dans une matrice de suspension d’agar. Cependant, cette méthode de test n’est pas adaptée pour déterminer l’activité contre les cellules du biofilm qui sont à la fois génétiquement et métaboliquement différentes des cellules planctoniques utilisées dans ce test.
La méthode d'essai décrite peut confirmer la présence d'une activité antimicrobienne dans les plastiques ou les surfaces hydrophobes et permet de déterminer les différences quantitatives d'activité antimicrobienne entre les plastiques ou polymères non traités et ceux contenant des agents antimicrobiens peu solubles dans l'eau liés ou incorporés. Des comparaisons peuvent également être faites entre le nombre de survivants sur les surfaces traitées avec un conservateur et les surfaces hydrophobes témoins.
Cette méthode permet également de déterminer la durée de conservation ou la durabilité à long terme d'un traitement antimicrobien, ce qui peut être obtenu en testant des échantillons non lavés et lavés sur un intervalle de temps. Cependant, la connaissance des techniques microbiologiques est nécessaire pour appliquer ces méthodes d’essai.
En bref, cette méthode de test peut être utilisée pour évaluer l’efficacité des antimicrobiens incorporés ou liés dans des matériaux hydrophobes tels que les plastiques, les résines époxy et d’autres surfaces dures. L'inoculum bactérien à base d'eau reste en contact étroit et uniforme avec le matériau traité sous forme de pseudo-biofilm. Le pourcentage de réduction des populations de cellules bactériennes infectées survivantes à 24 h est déterminé par rapport à celles d'un témoin non traité. Le substrat hydrophobe peut être testé à plusieurs reprises au fil du temps pour évaluer l’activité antimicrobienne persistante.
Aux fins de la présente norme, les termes et définitions suivants s'appliquent :
Cette méthode consiste à inoculer une suspension d’agar fondue (45 degrés) avec une culture cellulaire bactérienne standardisée. Une fine couche (0,5 à 1,0 ml) de la suspension d'agar inoculée est pipetée sur le matériel de test et le matériel de contrôle non traité (un minimum de trois échantillons sont utilisés). Après le temps de contact spécifié (24 h sont généralement utilisés), les micro-organismes survivants sont récupérés par élution de l'inoculum de la suspension d'agar du substrat d'essai dans le bouillon neutralisant et extraits par des méthodes qui garantissent l'élimination complète de l'inoculum de la substance d'essai (par exemple, sonication, vortex ou extraction manuelle, c'est-à-dire stomacher).
Des dilutions en série sont réalisées, puis des plaques de coulée ou d'étalement sont réalisées à partir de chaque dilution. Les plaques d'agar et les bouillons de dilution sont incubés pendant 48 à 62 heures à une température spécifiée en fonction de la température optimale pour l'organisme testé. Les colonies bactériennes de chaque série de dilution sont comptées et enregistrées. Le pourcentage de réduction bactérienne dans les échantillons traités et non traités est calculé.
Cette méthode peut être utilisée pour évaluer l’efficacité des antimicrobiens combinés/liés sur des matériaux hydrophobes tels que les plastiques, les résines époxy et d’autres surfaces dures. L'inoculum bactérien à base d'eau reste en contact étroit et uniforme avec le matériau traité sous forme de pseudo-biofilm. Le pourcentage de réduction des populations survivantes de cellules bactériennes infectées à 24 h est déterminé par rapport à celles d'un témoin non traité. Le substrat hydrophobe peut être testé à plusieurs reprises au fil du temps pour évaluer l’activité antimicrobienne persistante.
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