
A análise de razão isotópica estável usa isótopos de certos elementos naturais. Um isótopo é um átomo do mesmo elemento químico que tem o mesmo número de prótons, mas um número diferente de nêutrons. Isótopos do mesmo elemento têm massas ligeiramente diferentes. Somente isótopos estáveis, ou seja, não radioativos, são usados para análise de razão isotópica estável.

Os isótopos estáveis têm uma abundância natural, mas os processos físicos que favorecem um isótopo em detrimento de outro resultam no enriquecimento de um isótopo em relação ao outro. Na presença de oxigênio e hidrogênio, os isótopos mais leves evaporam mais facilmente e, quando chove, os mais pesados se acumulam primeiro. Em plantas e animais, esse enriquecimento ou esgotamento de um isótopo em relação a outro é medido. As amostras de teste são avaliadas quanto à consistência, por exemplo, com amostras de referência de origem conhecida.
Informações sobre onde as pessoas cresceram e o que consumiram podem ser compreendidas a partir dos ossos. Arqueólogos usam análise isotópica para determinar movimentos populacionais e padrões de dieta a partir de vestígios químicos em restos humanos antigos. A análise de isótopos estáveis, o estudo de elementos em materiais arqueológicos, fornece informações sobre clima, nutrição e origens geográficas de ossos e outros materiais.
Na análise de isótopos estáveis, são observados isótopos de diferentes elementos, ou seja, átomos com excesso ou falta de nêutrons. Ao contrário dos isótopos instáveis, como o carbono-14, que decaem com o tempo, os isótopos estáveis nunca decaem. Existem mais de 250 isótopos estáveis conhecidos, e 82 dos primeiros 80 elementos da tabela periódica os possuem. Tanto os compostos orgânicos quanto os inorgânicos contêm esses isótopos, e suas proporções entre si são como uma espécie de assinatura. Os isótopos de carbono ajudam a datar objetos antigos.
Os traços isotópicos são extremamente úteis para os pesquisadores. Por exemplo, as plantas absorvem isótopos estáveis de carbono-12 e carbono-13 da atmosfera, que possuem uma proporção consistente. Essa proporção é transferida para as plantas através do solo e da água que elas absorvem. Durante a fotossíntese, a quantidade de água, luz solar e outros fatores alteram a proporção de isótopos de carbono das plantas.
As categorias de proporção de carbono para fotossíntese de plantas dizem aos pesquisadores algo sobre onde as plantas são plantadas e quais condições ambientais elas suportam. Por outro lado, analisar a quantidade de carbono nos dentes e ossos dos animais mostra a proporção de isótopos de carbono encontrados nas plantas que eles consomem.
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