Test de stérilité USP 71

Les tests de stérilité des dispositifs médicaux, des produits pharmaceutiques et des produits radiopharmaceutiques, tels que définis dans la norme « USP 71 Sterility Testing » publiée par la Pharmacopée américaine (USP), sont un processus de test requis pour la vérification de la stérilisation et la libération des lots. Ces tests sont réalisés de trois manières principales pour les applications suivantes :

• Filtration membranaire, principalement utilisée pour les produits pharmaceutiques : La méthode de test de stérilité par filtration membranaire, généralement utilisée pour les produits pharmaceutiques filtrables, utilise un filtre de 0,45 micron pour collecter les micro-organismes d'un échantillon. Le filtre est ensuite transféré dans un environnement aérobie ou anaérobie, selon les microbes testés. Les milieux suivants sont généralement utilisés dans cette méthode :
  • Milieu liquide au thioglycolate incubé à 30-35 °C. Ce milieu est utilisé pour les micro-organismes anaérobies.
  • Milieu à base de soja incubé à 20-25 °C. Ce milieu est utilisé pour les micro-organismes aérobies, notamment les levures et les moisissures.

Le milieu est examiné pendant la période d'incubation de 14 jours afin de détecter tout signe de croissance microbienne, notamment la turbidité et la formation de pellicules. La présence de contaminants est ensuite confirmée et identifiée par des stries d'agar. Comme pour tous les procédés d'analyse, l'équipement de filtration membranaire est validé afin de garantir des résultats précis. La filtration membranaire est la méthode privilégiée, notamment pour les produits pharmaceutiques contenant des conservateurs ou d'autres substances inhibant la croissance microbienne.

• Transfert direct, principalement utilisé pour les dispositifs médicaux : La méthode de test de stérilité par transfert direct, généralement utilisée pour les dispositifs médicaux, consiste à immerger le produit entier dans le milieu de test, ce qui permet aux micro-organismes de se transférer du produit au milieu. Ce procédé est particulièrement utile lorsqu'un produit ou dispositif médical n'a pas été correctement stérilisé, entraînant des microbes endommagés, mais non détruits. Grâce à la méthode de transfert direct, ces microbes peuvent se réparer et être ainsi identifiés avec précision.

Le transfert direct s'effectue généralement dans deux types de milieux. Des procédés appropriés sont suivis pour séparer aseptiquement le produit en deux aliquotes ou plus afin de pouvoir être testé dans les deux types de milieux. Les produits plus volumineux sont également manipulés, ce qui nécessite l'identification, le retrait et le test des zones de contact. Les échantillons sont incubés pendant 14 jours, période durant laquelle les milieux sont régulièrement examinés pour détecter tout signe de croissance microbienne.

• Lavage des tubes creux : La méthode de test de stérilité par lavage, généralement utilisée pour les tubes creux, consiste à laver le tube et à filtrer l'éluat à travers une membrane submicronique. L'échantillon est ensuite transféré dans un milieu liquide au thioglycolate et un milieu à base de soja pour une période d'incubation de 14 jours, puis est régulièrement examiné pour détecter la croissance microbienne.

Les laboratoires de pointe adhèrent à toutes les directives de qualification des tests de stérilité de l'USP 71. Celles-ci comprennent un test de conformité, qui garantit que les microbes, s'ils sont présents, se développeront dans le milieu d'essai, et un test de vérification, qui garantit que l'échantillon testé n'inhibe pas la croissance des microbes par inertie. Ces processus de vérification sont essentiels pour garantir la conformité des processus d'essai d'une entreprise et soutenir ses objectifs d'approbation et de mise en circulation.

Le concept de test d'aptitude est simple. Une petite quantité de microbes est ajoutée au produit, celui-ci est filtré, puis placé sur le milieu filtrant. Le produit peut également être inoculé directement dans le milieu. Ce dernier est incubé pendant 5 jours maximum. Après incubation, si la détection des microbes est confirmée par la turbidité visuelle et que le test est répété sur un panel d'organismes Gram-négatifs, d'organismes Gram-positifs, de moisissures et de levures, le test d'aptitude détectera ces organismes s'ils sont présents dans le produit lors des tests de routine d'un lot. Cependant, le test USP 71 requiert une période d'incubation de 14 jours.

Les pharmacopées du monde entier utilisent les données disponibles pour déterminer la limite de 14 jours. Ces données confirment l'efficacité de la méthode de stérilité de 14 jours pour la récupération de divers organismes :

• Organismes pathogènes préoccupants pour la santé (E. coli, S. aureus)
• Isolats environnementaux stressants susceptibles d'apparaître pendant la production (moisissures telles que Penicillium et sporulées telles que Bacillus)
• Organismes à croissance lente qui peuvent être cultivés mais nécessitent 14 jours complets pour être détectables visuellement (notamment C. acnes)
• Organismes présents à des niveaux minimes dans l'échantillon

La norme USP 71 fournit toutes les données disponibles pour les tests de stérilité utilisant cette méthode traditionnelle, confirmant ainsi sa capacité à récupérer ces organismes. Les tests de conformité de la méthode indiquent simplement les problèmes généraux rencontrés par un produit donné pour récupérer des microbes viables.

En résumé, la norme USP 71 est essentielle pour les industries pharmaceutiques et biotechnologiques, car elle établit des lignes directrices pour garantir que les produits stériles sont exempts de micro-organismes viables. Cette norme est importante pour les raisons suivantes :

• Sécurité des patients : les tests de stérilité permettent de garantir que les produits tels que les produits injectables, les implants chirurgicaux et les préparations ophtalmiques sont exempts de micro-organismes nocifs pouvant entraîner des infections ou de graves complications de santé.
• Conformité réglementaire : La conformité à la norme USP 71 est exigée par les autorités réglementaires telles que la FDA, l’EMA et d’autres organisations internationales. Cette norme garantit que les médicaments répondent à des normes de stérilité rigoureuses, garantissant ainsi leur sécurité pour l’usage humain.
• Assurance qualité : La conformité à la norme USP 71 permet aux fabricants de maintenir un niveau élevé de contrôle qualité. En testant la stérilité des produits, ils peuvent identifier une contamination potentielle avant leur mise sur le marché, ce qui leur permet de maintenir leur réputation de fabricant de produits sûrs et fiables.
• Cohérence et fiabilité : Cette norme fournit une méthode structurée et scientifiquement validée pour la réalisation des tests de stérilité, garantissant leur cohérence et leur fiabilité. Ceci est essentiel pour les produits destinés à être utilisés en environnement stérile.
• Prévention de la contamination microbienne : Les tests décrits dans la norme USP 71 permettent de détecter la contamination microbienne pouvant survenir pendant la production et le stockage ou la manipulation. Cela permet de prévenir la prolifération microbienne susceptible d'affecter la qualité et la sécurité des produits.

Notre organisation, qui accompagne depuis des années des entreprises de tous secteurs grâce à un large éventail d'activités de tests, de mesures, d'analyses et d'évaluations, dispose d'une équipe solide qui suit de près les avancées scientifiques et technologiques mondiales et s'améliore constamment. Dans ce contexte, nous proposons également des services de tests conformes à la norme USP 71 relative aux tests de stérilité.