OECD TG 430 Iritasi Kulit In Vitro: Uji Resistensi Listrik Transkutan (TER)

Standar “OECD TG 430 Iritasi kulit in vitro: uji (TER)” , yang diterbitkan di bawah pedoman OECD tentang perilaku bisnis yang bertanggung jawab untuk perusahaan multinasional (pedoman OECD) , menjelaskan metode uji resistansi listrik transkutan yang digunakan dalam penilaian iritasi kulit in vitro.

Pedoman OECD untuk pengujian bahan kimia terdiri dari sekitar 150 metode pengujian yang diterima secara internasional yang digunakan oleh pemerintah, industri, dan laboratorium independen untuk mengidentifikasi dan mengkarakterisasi potensi bahaya bahan kimia. Ini adalah serangkaian metode bagi para profesional yang digunakan terutama dalam pengujian keselamatan peraturan dan selanjutnya dalam deklarasi bahan kimia dan produk kimia, registrasi bahan kimia dan evaluasi bahan kimia. Metode pengujian ini juga digunakan untuk seleksi dan pemeringkatan kandidat bahan kimia selama pengembangan bahan kimia dan produk baru serta dalam penelitian toksikologi.

Sistem klasifikasi dan pelabelan bahan kimia yang diselaraskan secara global mendefinisikan iritasi kulit sebagai terjadinya kerusakan jaringan permanen pada kulit setelah penerapan bahan uji.

Saat menerapkan metode pengujian OECD TG 430, 150 µL bahan uji untuk cairan atau padatan dan 150 µL air deionisasi ditambahkan diterapkan pada permukaan epidermis cakram kulit hingga 24 jam. Tiga cakram pengikat digunakan untuk setiap zat uji dan kontrol dan diberikan dalam sistem pengujian dua ruang di mana cakram pengikat berfungsi sebagai pemisah antar ruang.

Evaluasi korosivitas kulit sering kali melibatkan penggunaan hewan laboratorium. Selain standar OECD TG 430, standar OECD TG 431 dan OECD TG 435 yang digunakan untuk mengidentifikasi bahan kimia korosif telah divalidasi dan diterima. Selain itu, beberapa metode uji in vitro yang divalidasi dengan standar OECD TG 439 telah dikembangkan untuk digunakan dalam menguji iritasi kulit.

Standar OECD TG 430 mengatasi iritasi kulit pada titik akhir kesehatan manusia. Standar ini didasarkan pada metode pengujian resistensi listrik transkutan (TER) kulit tikus, yang menggunakan cakram kulit untuk mengidentifikasi bahan abrasif berdasarkan kemampuannya untuk kehilangan integritas normal stratum korneum dan fungsi penghalang.

Dalam studi validasi, ditentukan bahwa metode pengujian hambatan listrik transkutan pada kulit tikus dapat membedakan antara bahan korosif dan non-korosif pada kulit dengan sensitivitas keseluruhan sebesar 122 persen dan spesifisitas 94 persen untuk database 71 zat.

Saat pengujian, bahan kimia uji diaplikasikan pada permukaan epidermis cakram kulit hingga 24 jam dalam sistem pengujian dua ruang dimana cakram kulit berfungsi sebagai pemisah antar ruang.

Cakram kulit diperoleh dari tikus yang disembelih manusia berusia 28–30 hari. Bahan kimia korosif didefinisikan berdasarkan kemampuannya menyebabkan hilangnya integritas stratum korneum normal dan fungsi penghalang. Hal ini diukur sebagai penurunan di bawah tingkat ambang batas dalam uji resistansi listrik transkutan . Untuk resistansi listrik transkutan kulit tikus, nilai ambang batas 5 kΩ telah dipilih berdasarkan data ekstensif untuk berbagai macam zat, di mana sebagian besar nilai jelas jauh di atas (biasanya serendah 10 kΩ) atau jauh di bawah (biasanya setinggi 3 kΩ) nilai ini. Secara umum, bahan kimia uji yang tidak korosif tetapi mengiritasi atau tidak mengiritasi hewan tidak akan menyebabkan resistansi listrik transkutan turun di bawah nilai ambang batas ini. Lebih lanjut, penggunaan preparat kulit lain atau peralatan lain dapat mengubah nilai ambang batas dan memerlukan verifikasi lebih lanjut.

Langkah pengikatan pewarna dimasukkan dalam prosedur pengujian untuk memastikan hasil positif pada hambatan listrik transkutan, termasuk nilai sekitar 5 kΩ. Tahap pengikatan pewarna menentukan apakah peningkatan permeabilitas ionik disebabkan oleh kerusakan fisik stratum korneum. Metode pengujian hambatan listrik transkutan menggunakan kulit tikus telah terbukti mendeteksi iritasi in vivo pada kelinci yang dievaluasi berdasarkan standar OECD TG 404.

Sebelum penggunaan rutin metode pengujian hambatan listrik transkutan kulit tikus yang sesuai dengan standar ini, laboratorium harus menunjukkan kemahirannya dengan mengklasifikasikan secara benar item kemahiran yang diusulkan sesuai dengan standar ini. Jika suatu zat yang terdaftar tidak tersedia atau dibenarkan, zat lain yang memiliki data referensi in vivo dan in vitro yang memadai dapat digunakan.

Di antara berbagai pengujian, pengukuran, analisis, dan studi evaluasi yang disediakan untuk bisnis di berbagai sektor, organisasi kami menyediakan layanan pengujian yang ditentukan dalam standar "Iritasi kulit in vitro OECD TG 430: Uji resistensi listrik transkutan (TER)", dengan staf yang terlatih dan staf ahli dan peralatan teknologi canggih.