Standar “Metode uji penghalang membran in vitro OECD TG 435 untuk iritasi kulit” yang diterbitkan berdasarkan pedoman OECD tentang perilaku bisnis yang bertanggung jawab untuk perusahaan multinasional (pedoman OECD) menjelaskan metode uji penghalang membran in vitro yang digunakan untuk mengidentifikasi bahan kimia korosif. Metode pengujian ini menggunakan membran buatan yang dirancang untuk bereaksi terhadap bahan kimia korosif dengan cara yang mirip dengan kulit binatang.
Metode pengujian penghalang membran in vitro dapat digunakan untuk menguji padatan, cairan dan emulsi. Namun, zat berair dengan nilai pH berkisar antara 4,5 hingga 8,5 umumnya tidak cocok untuk pengujian.
Metode pengujian yang dijelaskan memungkinkan identifikasi bahan kimia korosif dan campurannya serta subkategorisasi bahan korosif sebagaimana diizinkan dalam sistem klasifikasi dan pelabelan bahan kimia yang selaras secara global. Klasifikasi ini didasarkan pada waktu penetrasi suatu zat melalui penghalang membran.
Sistem pengujian ini terdiri dari dua komponen:
Saat menerapkan sistem pengujian ini, jumlah ulangan yang sesuai disiapkan untuk setiap zat uji dan kontrol terkait. Waktu penerapan zat uji pada penghalang membran dicatat dan diatur secara bertahap. Waktu (dalam menit) antara penerapan zat uji pada penghalang membran dan penetrasi penghalang digunakan untuk menentukan sifat korosif zat uji.
Sifat korosif kulit secara tradisional ditentukan dengan menerapkan bahan kimia uji pada kulit hewan hidup dan menilai tingkat kerusakan jaringan setelah jangka waktu tertentu. Selain standar OECD TG 435, sejumlah metode uji in vitro lainnya telah diadopsi sebagai alternatif terhadap prosedur standar kulit kelinci in vivo (OECD TG 404) yang digunakan untuk mengidentifikasi bahan kimia korosif. Pedoman OECD merekomendasikan penggunaan metode uji in vitro yang tervalidasi dan diterima.
Dalam pendekatan modular ini, hasil positif dari metode pengujian in vitro digunakan untuk mengklasifikasikan bahan kimia sebagai bahan korosif tanpa memerlukan pengujian pada hewan. Dengan cara ini, bertujuan untuk mencegah penggunaan hewan dalam pengujian dan untuk mencegah rasa sakit dan kesusahan yang mungkin timbul jika hewan digunakan untuk tujuan ini.
Metode pengujian ini mendeteksi kerusakan penghalang membran yang disebabkan oleh bahan kimia uji korosif pada saat bahan kimia uji diaplikasikan ke permukaan penghalang membran makromolekul sintetik melalui “sistem deteksi bahan kimia”, kemungkinan melalui mekanisme iritasi yang sama seperti yang terjadi pada kulit hidup.
Penetrasi atau pecahnya penghalang membran dapat diukur dengan sejumlah prosedur atau sistem deteksi kimia, termasuk perubahan warna pewarna indikator pH atau sifat lain larutan indikator di bawah penghalang.
Harus ditentukan bahwa penghalang membran valid untuk tujuan penggunaannya, yaitu relevan dan dapat diandalkan. Hal ini mencakup memastikan bahwa persiapan yang berbeda konsisten dalam hal sifat penghalangnya, seperti mampu mempertahankan penghalang terhadap bahan kimia non-korosif, mampu mengkategorikan sifat korosif bahan kimia di antara subkategori sifat korosif dari sistem klasifikasi dan harmonisasi global. pelabelan bahan kimia. Klasifikasi yang diberikan didasarkan pada waktu yang diperlukan suatu bahan kimia untuk melewati penghalang membran dan menembus larutan indikator.
Sebelum penggunaan rutin metode uji penghalang membran in vitro, laboratorium harus mematuhi standar ini dan menunjukkan kompetensi teknisnya dengan mengklasifikasikan zat kualifikasi yang diusulkan dengan benar. Jika suatu zat yang terdaftar tidak tersedia atau dibenarkan, zat lain yang memiliki data referensi in vivo dan in vitro yang memadai dapat digunakan.
Pengujian harus dilakukan pada suhu sekitar (kisaran 17-25 derajat) dan komponen harus memenuhi kondisi yang ditentukan dalam standar.
Sebelum melakukan pengujian penghalang membran, uji kompatibilitas bahan kimia dilakukan untuk menentukan apakah bahan kimia uji dapat dideteksi oleh sistem deteksi bahan kimia. Jika sistem deteksi bahan kimia tidak mendeteksi bahan kimia uji, metode uji penghalang membran tidak cocok untuk menilai potensi korosif bahan kimia uji tersebut dan metode pengujian yang berbeda harus digunakan. Sistem deteksi bahan kimia dan kondisi paparan yang digunakan untuk pengujian kompatibilitas harus mencerminkan paparan dalam pengujian penghalang membran berikutnya.
Jika cocok untuk metode pengujian, bahan kimia uji yang memenuhi syarat pengujian kompatibilitas harus dilakukan pengujian kategori skala waktu, yaitu pengujian penyaringan untuk membedakan antara asam atau basa lemah dan kuat. Misalnya, dalam metode pengujian referensi yang divalidasi, pengujian kategorisasi skala waktu digunakan untuk menunjukkan dua skala waktu mana yang harus digunakan bergantung pada apakah cadangan asam atau basa signifikan terdeteksi. Tergantung pada cadangan asam atau alkali dari bahan kimia yang diuji, dua skala waktu terobosan yang berbeda harus digunakan untuk menentukan sifat korosif dan sistem yang diselaraskan secara global untuk klasifikasi dan pelabelan bahan kimia subkategori sifat korosif kulit.
Penghalang membran terdiri dari dua komponen: gel berair makromolekul berprotein dan membran pendukung permeabel. Gel berprotein harus kedap terhadap cairan dan padatan tetapi dapat terkikis dan menjadi permeabel. Penghalang membran yang dibangun sepenuhnya harus disimpan dalam kondisi yang telah ditentukan yang telah terbukti mencegah degradasi gel, seperti pengeringan, pertumbuhan mikroba, geseran atau retak, yang akan menurunkan kinerjanya. Jangka waktu penyimpanan yang dapat diterima harus ditentukan dan sediaan penghalang membran tidak boleh digunakan setelah jangka waktu tersebut. Membran pendukung yang permeabel memberikan dukungan mekanis pada gel berprotein selama proses gelasi dan paparan bahan kimia uji. Membran pendukung harus mencegah gel kendur atau bergeser dan harus mudah ditembus oleh semua bahan kimia uji.
Dalam sistem deteksi bahan kimia, larutan indikator, yang merupakan larutan yang sama yang digunakan untuk pengujian kompatibilitas, harus merespons keberadaan bahan kimia uji. Pewarna indikator pH atau kombinasi pewarna, seperti merah kresol dan jingga metil, harus digunakan, yang akan menunjukkan perubahan warna sebagai respons terhadap adanya bahan kimia uji.
Di antara berbagai studi pengujian, pengukuran, analisis, dan evaluasi yang disediakan untuk bisnis di berbagai sektor, organisasi kami juga menyediakan layanan pengujian yang ditentukan dalam standar "Metode uji penghalang membran in vitro OECD TG 435 untuk iritasi kulit", dengan staf yang terlatih dan ahli. dan peralatan teknologi canggih.
Anda dapat meminta kami untuk mengisi formulir kami untuk mendapatkan janji, untuk mendapatkan informasi lebih lanjut atau untuk meminta evaluasi.
