OECD TG 431 Iritasi Kulit In Vitro: Metode Uji Epidermis Manusia (RhE) yang Direkonstruksi

Standar “OECD TG 431 Iritasi kulit in vitro: Metode uji epidermis manusia yang direkonstruksi (RHE)”, yang diterbitkan di bawah pedoman OECD tentang perilaku bisnis yang bertanggung jawab untuk perusahaan multinasional (pedoman OECD) , menjelaskan metode uji yang memungkinkan identifikasi bahan kimia dan campuran korosif, dan, bila didukung oleh pembobotan bukti menggunakan informasi lain yang tersedia, memungkinkan identifikasi zat dan campuran non-korosif. Protokol uji ini juga menunjukkan perbedaan antara korosif kulit yang parah dan yang kurang parah. Metode uji ini tidak memerlukan penggunaan hewan hidup atau jaringan hewan untuk penilaian korosivitas kulit.

Korosi kulit mengacu pada produksi kerusakan kulit permanen yang bermanifestasi sebagai nekrosis yang terlihat dari epidermis hingga dermis setelah penerapan bahan kimia uji. Standar OECD TG 431 menyediakan prosedur in vitro yang memungkinkan identifikasi zat dan campuran non-korosif dan korosif sesuai dengan sistem klasifikasi dan pelabelan bahan kimia yang selaras secara global. Hal ini juga memungkinkan subkategorisasi parsial bahan abrasif.

Evaluasi potensi korosi kulit akibat bahan kimia sering kali melibatkan penggunaan hewan laboratorium. Namun, selain standar OECD TG 431, standar OECD TG 430 dan OECD TG 435 juga telah divalidasi dan diterima untuk menguji potensi korosi bahan kimia. Selain itu, standar OECD TG 439 in vitro telah dikembangkan untuk menguji potensi iritasi kulit. Sebuah dokumen tentang pendekatan pengujian dan evaluasi terpadu untuk korosi dan iritasi kulit, yang mengelompokkan sumber informasi dan alat analisis serta memberikan panduan tentang cara mengintegrasikan dan menggunakan data pengujian dan non-pengujian yang ada untuk menilai potensi iritasi kulit dan korosi kulit dari bahan kimia, dan ketika pengujian lebih lanjut diperlukan. Ini menjelaskan beberapa modul yang mengusulkan suatu pendekatan.

Standar ini membahas korosi kulit pada titik akhir kesehatan manusia. Ia menggunakan epidermis manusia yang direkonstruksi (RhE) (berasal dari keratinosit epidermal asal manusia yang belum diubah) yang sangat mirip dengan sifat histologis, morfologi, biokimia, dan fisiologis bagian atas kulit manusia, yaitu epidermis.

Standar OECD TG 431 mencakup lima metode pengujian yang divalidasi menggunakan model RhE yang tersedia secara komersial.

Saat melakukan tes ini, bahan kimia uji dioleskan secara topikal ke model tiga dimensi RhE yang terdiri dari keratinosit epidermal turunan manusia yang dikultur, tidak ditransformasikan, untuk menciptakan model epidermis manusia yang berlapis-lapis dan sangat terdiferensiasi. Ini terdiri dari lapisan basal, berduri, dan granular teratur dan stratum korneum berlapis-lapis yang mengandung lapisan lipid pipih antar sel yang mewakili kelas lipid utama serupa dengan yang ditemukan in vivo.

Dua ulangan jaringan digunakan untuk setiap perlakuan (waktu pemaparan) dan kontrol. Zat korosif didefinisikan berdasarkan kemampuannya dalam menghasilkan penurunan viabilitas sel di bawah tingkat ambang batas yang ditentukan pada waktu pemaparan tertentu. Bahan kimia berwarna juga dapat diuji menggunakan prosedur HPLC (kromatografi cair kinerja tinggi). Prinsip metode pengujian model kulit manusia didasarkan pada asumsi bahwa bahan kimia korosif dapat menembus stratum korneum melalui difusi atau erosi dan bersifat sitotoksik pada lapisan sel di bawahnya. Viabilitas sel diukur dengan konversi enzimatik pewarna vital MTT menjadi garam formazan biru, yang diukur secara kuantitatif setelah dikeluarkan dari jaringan. Metode uji iritasi kulit berbasis RhE telah terbukti mendeteksi efek iritasi kulit in vivo yang dievaluasi pada kelinci menurut standar OECD TG 404.

Sebelum menggunakan salah satu dari lima metode uji RhE tervalidasi yang sesuai dengan standar ini secara rutin, laboratorium harus menunjukkan kemahirannya dengan mengklasifikasikan secara benar item kemahiran yang diusulkan sesuai dengan standar ini. Jika metode subkategorisasi digunakan, subkategorisasi yang benar juga harus ditampilkan. Jika suatu zat yang terdaftar tidak tersedia atau dibenarkan, zat lain yang memiliki data referensi in vivo dan in vitro yang memadai dapat digunakan.

Metode pengujian yang dijelaskan dalam standar ini adalah:

• EpiSkin™
• EpiDerm™ SCT
• SkinEthic™ RHE
• epiks®
• LabCyte EPI-MODEL24 SCT

Organisasi kami, di antara berbagai studi pengujian, pengukuran, analisis dan evaluasi yang dilakukannya untuk bisnis di berbagai sektor, dengan staf yang terlatih dan ahli serta peralatan teknologi canggih, menyediakan layanan pengujian.