OECD TG 442E Sensitisasi Kulit In Vitro - Uji Aktivasi Lini Sel Manusia (h-CLAT)

Standar “OECD TG 442E In vitro skin sensitization – Human cell line activation test (h-CLAT)”, yang diterbitkan berdasarkan pedoman OECD tentang perilaku bisnis yang bertanggung jawab bagi perusahaan multinasional (pedoman OECD), diusulkan untuk mengatasi aktivasi sel dendritik, sebuah peristiwa penting dalam jalur hasil buruk akibat sensitisasi kulit.

Pedoman uji ini membahas titik akhir sensitisasi kulit akibat bahaya kesehatan manusia setelah terpapar bahan kimia uji. Sensitisasi kulit mengacu pada respons alergi setelah kontak kulit dengan bahan kimia uji, sebagaimana didefinisikan oleh Sistem Klasifikasi dan Pelabelan Bahan Kimia yang Diharmonisasikan Secara Global Perserikatan Bangsa-Bangsa.

Standar ini menyediakan empat metode uji in vitro yang menangani peristiwa kunci yang sama dalam jalur hasil negatif:

• Uji aktivasi garis sel manusia
• Uji aktivasi garis sel U937
• Tes gen reporter interleukin-8
• Deteksi cepat alergen genomik untuk evaluasi sensitizer kulit

Semua metode ini digunakan untuk mendukung pembedaan antara zat sensitizer kulit dan non-sensitizer sesuai dengan Sistem Klasifikasi dan Pelabelan Bahan Kimia yang Diharmonisasikan Secara Global Perserikatan Bangsa-Bangsa. Metode uji yang dijelaskan dalam panduan uji ini mengukur perubahan ekspresi serangkaian gen yang terkait dengan proses aktivasi monosit dan sel dendritik (tanda tangan biomarker genomik) setelah terpapar penanda permukaan sel atau zat sensitizer.

Standar OECD TG 442E adalah uji in vitro yang andal untuk mengidentifikasi potensi sensitizer kimia pada kulit dengan penerapan yang luas dan akurasi prediktif lebih dari 90 persen. Uji ini memberikan prediksi biner yang mengklasifikasikan sampel uji sebagai sensitizer kulit atau non-sensitizer. Tujuan pedoman ini adalah untuk menentukan apakah suatu zat kimia dapat menyebabkan sensitisasi kulit, yaitu dermatitis kontak alergi, dengan mengaktifkan respons imun spesifik tanpa melakukan uji coba pada hewan.

Uji aktivasi lini sel manusia (h-CLAT) adalah uji in vitro (non-hewan) yang digunakan untuk mengevaluasi apakah suatu bahan kimia dapat menyebabkan sensitisasi kulit. Sensitisasi kulit adalah reaksi alergi yang disebabkan oleh reaksi berlebihan sistem imun terhadap suatu zat setelah kontak dengan kulit. h-CLAT dirancang untuk memodelkan langkah biologis kunci dalam perkembangan sensitisasi kulit: aktivasi sel dendritik (sejenis sel imun) oleh bahan kimia penyebab sensitisasi.

Metode pengujian ini penting karena menggantikan pengujian berbasis hewan yang lama. Lebih lanjut, standar OECD TG 442E dinilai penting karena menyediakan metode yang terstandarisasi, tervalidasi secara ilmiah, dan diterima secara internasional untuk menilai apakah suatu bahan kimia menyebabkan sensitisasi kulit, suatu jenis reaksi alergi yang disebabkan oleh paparan berulang pada kulit.

Metode h-CLAT mengkuantifikasi perubahan ekspresi penanda permukaan sel yang berkaitan dengan proses aktivasi monosit dan sel dendritik dalam lini sel leukemia monosit manusia THP-1 setelah paparan sensitizer. Tingkat ekspresi penanda permukaan sel dendritik yang terukur kemudian digunakan untuk mendukung perbedaan antara sensitizer kulit dan desensitizer.

Metode ini merupakan uji in vitro yang mengukur perubahan ekspresi penanda permukaan sel pada sel THP-1 dari lini sel leukemia monosit manusia setelah 24 jam paparan zat kimia uji. Molekul permukaan ini merupakan penanda khas aktivasi THP-1 monosit dan dapat meniru aktivasi sel dendritik, yang berperan penting dalam priming sel T. Perubahan ekspresi penanda permukaan diukur dengan flow cytometry setelah pewarnaan sel dengan antibodi berlabel fluorokrom. Pengukuran sitotoksisitas dilakukan secara simultan untuk menilai apakah terjadi peningkatan ekspresi penanda permukaan pada konsentrasi subsitotoksik. Intensitas fluoresensi relatif penanda permukaan dibandingkan dengan kontrol pelarut/kendaraan dihitung dan digunakan dalam model prediksi untuk mendukung perbedaan antara sensitizer dan non-sensitizer.

Singkatnya, OECD TG 442 sangat penting untuk mendukung pengujian keselamatan bahan kimia dan produk konsumen yang etis, andal, dan konsisten secara global, terutama mengingat perkembangan regulasi dan permintaan publik akan ilmu pengetahuan yang bebas dari kekejaman.

Organisasi kami, yang telah mendukung bisnis di semua sektor selama bertahun-tahun melalui beragam kegiatan pengujian, pengukuran, analisis, dan evaluasi, memiliki tim karyawan yang tangguh yang senantiasa mengikuti perkembangan global dalam sains dan teknologi serta terus meningkatkan diri. Dalam konteks ini, kami juga menyediakan layanan pengujian bagi bisnis sesuai dengan standar OECD TG 442E In vitro skin sensitivity - Human cell line activation test (h-CLAT).