OECD 492B Merekonstruksi Metode Uji Human Cornea-like Epithelium (RhCE) untuk Identifikasi Bahaya Mata

Dalam standar "Metode pengujian OECD 492B Reconstructed human corneal-like epithelium (RhCE) untuk identifikasi bahaya mata" yang diterbitkan dalam lingkup pedoman OECD tentang perilaku bisnis yang bertanggung jawab untuk perusahaan multinasional (pedoman OECD), disebutkan bahwa tidak ada klasifikasi menurut kategori bahaya mata GHS PBB (Cat no Cat), dijelaskan prosedur in vitro yang memungkinkan identifikasi mandiri bahan kimia (zat dan campuran) yang memerlukan klasifikasi untuk iritasi mata (Cat 2) dan bahan kimia yang memerlukan klasifikasi untuk iritasi mata. kerusakan mata yang serius (Kat 1).

Prosedur ini menggunakan rekonstruksi epitel mirip kornea manusia (RhCE), yang sangat mirip dengan sifat histologis, morfologi, biokimia, dan fisiologis epitel kornea manusia. Tes ini mengevaluasi kemampuan bahan kimia uji untuk menginduksi sitotoksisitas dalam struktur jaringan epitel mirip kornea manusia (RhCE) yang diukur dengan uji MTT. Tes MTT adalah metode uji kolorimetri untuk mengevaluasi aktivitas metabolisme sel.

Kelangsungan hidup jaringan epitel mirip kornea manusia (RhCE) setelah terpapar bahan kimia uji diukur dengan konversi enzimatik pewarna vital MTT oleh sel-sel hidup jaringan menjadi garam formazan biru MTT, yang diukur secara kuantitatif setelah dikeluarkan dari jaringan. . Sitotoksisitas diukur pada titik waktu paparan yang berbeda.

Kelangsungan hidup jaringan epitel mirip kornea manusia (RhCE) ditentukan dengan membandingkannya dengan jaringan yang diberi zat kontrol negatif (persen viabilitas) dan kemudian digunakan untuk memperkirakan potensi bahaya mata dari bahan kimia uji. Bahan kimia yang tidak memerlukan klasifikasi dan pelabelan menurut UN GHS didefinisikan sebagai bahan kimia yang tidak mengurangi viabilitas jaringan di bawah ambang batas tertentu (yaitu viabilitas jaringan minimal 2 persen untuk UN GHS yang tidak dikategorikan).

Metode pengujian yang dijelaskan dalam standar OECD 492B adalah metode pengujian iritasi mata non-hewani tunggal pertama yang digunakan untuk membedakan antara GHS Kategori 1, Kategori 2, serta zat dan campuran yang tidak dikategorikan. Sampai saat ini, resolusi iritasi mata GHS Kategori 2 didasarkan pada pendekatan bukti karena ketidakmampuan tes in vitro tunggal untuk membedakan antara Kategori 1, Kategori 2, dan bahan uji yang tidak dikategorikan. Dengan persetujuan panduan tes OECD 492B, klasifikasi ini sekarang dapat ditentukan.

Zat uji diklasifikasikan berdasarkan bahaya iritasi mata berdasarkan Sistem Harmonisasi Global Klasifikasi dan Pelabelan Bahan Kimia (UN GHS) PBB ke dalam kategori berikut:

• GHS Kategori 1: Menguji zat atau campuran yang menyebabkan kerusakan mata serius atau kehilangan penglihatan yang tidak sepenuhnya dapat diperbaiki setelah paparan tunggal
• GHS Kategori 2: Iritasi mata dan perubahan mata yang sepenuhnya reversibel setelah paparan tunggal terhadap zat uji
• Kategori GHS No: Zat uji yang tidak diklasifikasikan untuk iritasi mata atau kerusakan mata serius didefinisikan sebagai zat yang tidak memenuhi persyaratan klasifikasi

Saat ini, jaringan epitel kornea manusia diperlakukan dengan zat uji sesuai dengan protokol waktu hingga toksisitas. Karena kerusakan sel kornea dan hilangnya viabilitas sangat terkait dengan efek buruk pada fungsi kornea dan ketajaman penglihatan, viabilitas jaringan HCE diukur setelah paparan zat uji menggunakan titik akhir reduksi viabilitas MTT.

Model prediksi kategorisasi GHS PBB adalah sebagai berikut:

• Waktu toksisitas TTL untuk cairan
  • Tanpa kategori: Rata-rata viabilitas jaringan kurang dari 50 persen setelah ketiga paparan
  • Kategori 2: Kombinasi hasil penerapan lainnya
  • Kategori 1: Rata-rata viabilitas jaringan tidak lebih dari 50 persen setelah ketiga paparan
• Periode toksisitas TTS untuk padatan
  • Tanpa kategori: Rata-rata viabilitas jaringan lebih dari 30 persen setelah paparan 40 menit dan lebih dari 120 persen setelah paparan 60 menit
  • Kategori 2: Kombinasi hasil penerapan lainnya
  • Kategori 1: Rata-rata viabilitas jaringan tidak lebih dari 30 persen setelah 40 menit paparan dan tidak lebih dari 120 persen setelah 60 menit paparan

Banyak produsen menggunakan standar OECD TG 492B untuk tujuan identifikasi dan pelabelan bahaya guna mematuhi sejumlah peraturan hukum.

Di antara banyak studi pengujian, pengukuran, analisis dan evaluasi yang disediakan organisasi kami untuk bisnis di berbagai sektor, dengan staf terlatih dan ahli serta peralatan teknologi canggih, perusahaan kami, sebagaimana didefinisikan dalam standar "OECD 492B Rekonstruksi epitel mirip kornea manusia ( RhCE) metode pengujian untuk identifikasi bahaya mata" Ini juga menyediakan layanan pengujian.