Metode Uji Standar ASTM E2180-18 untuk Menentukan Aktivitas Agen Antimikroba yang Digabungkan dalam Bahan Polimer atau Hidrofobik

Standar "ASTM E2180-18 Standard test for determine the activity of antimicrobial agents incorporated in polymeric or hydrophobic materials" yang diterbitkan oleh American Society for Testing and Materials (ASTM) menjelaskan metode uji yang digunakan untuk mengevaluasi (secara kuantitatif) aktivitas antimikroba dari agen yang digabungkan atau terikat pada permukaan polimer atau hidrofobik yang datar (dua dimensi). Metode ini berfokus terutama pada evaluasi aktivitas antibakteri, meskipun mikroorganisme lain seperti ragi dan konidia jamur juga dapat diuji menggunakan metode ini.

Kendaraan inokulasi adalah bubur agar yang mengurangi tegangan permukaan pembawa inokulasi garam dan memungkinkan pembentukan pseudo-biofilm, yang memungkinkan kontak yang lebih merata antara inokulum dengan permukaan uji. Metode pengujian ini memfasilitasi pengujian permukaan hidrofobik menggunakan sel yang dipelihara dalam matriks bubur agar. Namun, metode pengujian ini tidak cocok untuk menentukan aktivitas terhadap sel biofilm yang secara genetik dan metabolik berbeda dari sel planktonik yang digunakan dalam pengujian ini.

Metode pengujian yang dijelaskan dapat mengonfirmasi keberadaan aktivitas antimikroba dalam plastik atau permukaan hidrofobik dan memungkinkan penentuan perbedaan kuantitatif dalam aktivitas antimikroba antara plastik atau polimer yang tidak diolah dan plastik atau polimer yang mengandung agen antimikroba yang larut dalam air rendah yang terikat atau disertakan. Perbandingan juga dapat dilakukan antara jumlah yang bertahan hidup pada permukaan hidrofobik yang diberi bahan pengawet dan permukaan hidrofobik kontrol.

Metode ini juga memungkinkan penentuan umur simpan atau daya tahan jangka panjang suatu perawatan antimikroba, yang dapat dicapai dengan menguji sampel yang belum dicuci dan yang sudah dicuci selama interval waktu tertentu. Namun, pengetahuan tentang teknik mikrobiologi diperlukan untuk menerapkan metode pengujian ini.

Singkatnya, metode pengujian ini dapat digunakan untuk mengevaluasi efektivitas antimikroba yang terkandung atau terikat dalam bahan hidrofobik seperti plastik, resin epoksi, dan permukaan keras lainnya. Inokulum bakteri berbasis air tetap berada dalam kontak yang erat dan seragam dengan bahan yang diolah sebagai pseudo-biofilm. Persentase pengurangan populasi sel bakteri yang bertahan hidup dan tertantang pada 24 jam ditentukan jika dibandingkan dengan sel bakteri kontrol yang tidak diobati. Substrat hidrofobik dapat diuji berulang kali dari waktu ke waktu untuk menilai aktivitas antimikroba yang persisten.

Untuk tujuan standar ini, istilah dan definisi berikut berlaku:

• Bubur agar merupakan cairan semigelatin yang terbentuk ketika 3 g/L agar-agar ditambahkan ke dalam larutan garam 0,85 persen.
• Dalam mikrobiologi, vaksin adalah spesimen yang terdiri dari spora hidup, bakteri, organisme bersel tunggal atau bahan hidup lainnya, ragi atau jamur berfilamen multiseluler, atau kombinasi dua atau lebih spesies mikroorganisme, yang ditempatkan dalam media uji atau sampel yang akan diuji untuk mendukung pertumbuhan mikroba atau untuk menyelidiki sifat antimikrobanya.
• Pembawa inokulum adalah larutan pembawa yang digunakan untuk membawa inokulum ke sampel atau objek tertentu.
• Air pemulihan penetral adalah media pertumbuhan cair yang digunakan untuk menetralkan efek agen antimikroba uji.

Metode ini melibatkan inokulasi bubur agar cair (45 derajat) dengan kultur sel bakteri terstandarisasi. Lapisan tipis (0,5–1,0 mL) bubur agar yang diinokulasi dipipet ke bahan uji dan bahan kontrol yang belum diolah (minimal tiga sampel digunakan). Setelah waktu kontak yang ditentukan (biasanya digunakan 24 jam), mikroorganisme yang bertahan hidup dipulihkan dengan elusi inokulum bubur agar dari substrat uji ke dalam kaldu penetral dan diekstraksi dengan metode yang memastikan penghilangan inokulum secara menyeluruh dari zat uji (misalnya sonikasi, pengvorteksan, atau ekstraksi manual, yaitu stomacher).

Pengenceran serial dilakukan, kemudian pelat tuang atau oles dibuat dari tiap pengenceran. Pelat agar dan kaldu pengenceran diinkubasi selama 48-62 jam pada suhu tertentu, tergantung pada suhu optimum bagi organisme uji. Koloni bakteri dari setiap rangkaian pengenceran dihitung dan dicatat. Persentase pengurangan bakteri dalam sampel yang diolah dan yang tidak diolah dihitung.

Metode ini dapat digunakan untuk mengevaluasi efektivitas antimikroba gabungan/terikat pada bahan hidrofobik seperti plastik, resin epoksi, dan permukaan keras lainnya. Inokulum bakteri berbasis air tetap berada dalam kontak yang erat dan seragam dengan bahan yang diolah sebagai pseudo-biofilm. Persentase pengurangan populasi sel bakteri yang bertahan hidup pada 24 jam ditentukan jika dibandingkan dengan populasi sel bakteri kontrol yang tidak diobati. Substrat hidrofobik dapat diuji berulang kali dari waktu ke waktu untuk menilai aktivitas antimikroba yang persisten.

Organisasi kami, yang telah berusaha mendukung bisnis dari setiap sektor dengan berbagai pengujian, pengukuran, analisis, dan studi evaluasi yang telah dilakukan selama bertahun-tahun, memiliki staf yang kuat yang mengikuti dengan cermat perkembangan di dunia di bidang sains dan teknologi dan terus-menerus meningkatkan dirinya. Dalam konteks ini, layanan pengujian juga diberikan kepada bisnis sesuai dengan standar “ASTM E2180-18 Standard test to determine the activity of antimicrobial substance incorporated in polymeric or hydrophobic materials”.