OECD 492B Метод испытания реконструированного роговичного эпителия человека (RhCE) для выявления опасности для глаз

В стандарте OECD 492B «Метод испытания реконструированного роговичного эпителия человека (RhCE) для выявления опасности для глаз», опубликованном в рамках рекомендаций ОЭСР по ответственному ведению бизнеса для транснациональных компаний (руководства ОЭСР), указано, что не существует классификации В соответствии с категориями опасности для глаз ООН GHS (Cat no Cat), описана процедура in vitro, позволяющая самостоятельно идентифицировать химические вещества (вещества и смеси), требующие классификации по раздражению глаз (Cat 2), а также те, которые требуют классификации по раздражению глаз. серьезное повреждение глаз (Кат. 1).

В этой процедуре используется реконструированный роговичноподобный эпителий человека (RhCE), который точно имитирует гистологические, морфологические, биохимические и физиологические свойства эпителия роговицы человека. Тест оценивает способность тестируемого химического вещества вызывать цитотоксичность в структуре ткани роговичного эпителия человека (RhCE), измеренную с помощью МТТ-анализа. МТТ-тест — это метод колориметрического анализа для оценки метаболической активности клеток.

Жизнеспособность роговичноподобной эпителиальной ткани человека (RhCE) после воздействия тестируемого химического вещества измеряется путем ферментативного преобразования жизненно важного красителя МТТ живыми клетками тканей в синюю формазановую соль МТТ, которую количественно измеряют после удаления из тканей. . Цитотоксичность измеряют в разные моменты времени воздействия.

Жизнеспособность роговицеподобной эпителиальной ткани человека (RhCE) определяется путем сравнения с тканями, обработанными веществом отрицательного контроля (процент жизнеспособности), а затем используется для оценки потенциальной опасности для глаз тестируемого химического вещества. Химические вещества, которые не требуют классификации и маркировки в соответствии с СГС ООН, определяются как химические вещества, которые не снижают жизнеспособность тканей ниже определенного порога (т. е. жизнеспособность тканей составляет не менее 2 процентов для неклассифицированных СГС ООН).

Метод испытаний, описанный в стандарте OECD 492B, является первым методом испытания на раздражение глаз, не относящимся к животным, который используется для различения категорий 1 и 2 СГС и неклассифицированных веществ и смесей. До недавнего времени определение раздражителей глаз категории 2 СГС основывалось на подходе, основанном на совокупности доказательств из-за неспособности одного теста in vitro отличить материалы категории 1, категории 2 и неклассифицированных тестовых материалов. Благодаря одобрению руководства по испытаниям OECD 492B теперь можно определить эти классификации.

В соответствии с Согласованной на глобальном уровне системой классификации и маркировки химических веществ Организации Объединенных Наций (СГС ООН) тестируемые вещества классифицируются по следующим категориям:

• Категория 1 СГС: Испытательные вещества или смеси, которые вызывают серьезное повреждение глаз или потерю зрения, не полностью обратимую после однократного воздействия.
• Категория 2 СГС: Раздражение глаз и изменения глаз, полностью обратимые после однократного воздействия испытуемого вещества.
• СГС Нет категории: Тестируемые вещества, не классифицированные по раздражению или серьезному повреждению глаз, определяются как вещества, не соответствующие требованиям классификации.

В настоящее время эпителиальные ткани роговицы человека обрабатывают тестируемыми веществами в соответствии с протоколом времени до токсичности. Поскольку повреждение клеток роговицы и потеря их жизнеспособности тесно связаны с неблагоприятным воздействием на функцию роговицы и остроту зрения, жизнеспособность тканей HCE измеряют после воздействия тестируемого вещества с использованием конечной точки снижения жизнеспособности МТТ.

Модель прогнозирования для категоризации СГС ООН выглядит следующим образом:

• Время токсичности TTL для жидкостей
  • Нет категории: средняя жизнеспособность тканей менее 50 процентов после всех трех воздействий.
  • Категория 2: Любая другая комбинация результатов применимости.
  • Категория 1: Средняя жизнеспособность тканей не более 50 процентов после всех трех воздействий.
• Период токсичности TTS для твердых веществ
  • Нет категории: средняя жизнеспособность тканей более 30 процентов после 40 минут воздействия и более 120 процентов после 60 минут воздействия.
  • Категория 2: Любая другая комбинация результатов применимости.
  • Категория 1: Средняя жизнеспособность тканей не более 30 процентов после 40 минут воздействия и не более 120 процентов после 60 минут воздействия.

Многие производители используют стандарт OECD TG 492B для идентификации опасностей и маркировки в целях соблюдения ряда правовых норм.

Среди многочисленных исследований по тестированию, измерениям, анализу и оценке, которые наша организация проводит для предприятий в различных секторах, с ее обученным и опытным персоналом и передовым технологическим оборудованием, наша компания, как определено в стандарте OECD 492B «Реконструированный роговичный эпителий человека ( RhCE) метод испытаний для выявления опасности для глаз». Он также предоставляет услуги по тестированию.