Kaedah Ujian OECD 492B Epitelium Seperti Kornea Manusia (RhCE) yang Dibina Semula untuk Pengenalpastian Bahaya Mata

Dalam kaedah ujian "OECD 492B Reconstructed human cornea-like epithelium (RhCE) untuk pengecaman bahaya mata" yang diterbitkan dalam skop garis panduan OECD mengenai kelakuan perniagaan yang bertanggungjawab untuk syarikat multinasional (garis panduan OECD), dinyatakan bahawa tiada klasifikasi. mengikut kategori bahaya okular UN GHS (Cat no Cat ), prosedur in vitro diterangkan yang membolehkan pengecaman sendiri bahan kimia (bahan dan campuran) yang memerlukan pengelasan untuk kerengsaan mata (Cat 2) dan yang memerlukan pengelasan untuk kerosakan mata yang serius (Kucing 1).

Prosedur ini menggunakan epitelium seperti kornea manusia (RhCE) yang telah dibina semula, yang menyerupai sifat histologi, morfologi, biokimia dan fisiologi epitelium kornea manusia. Ujian ini menilai keupayaan bahan kimia ujian untuk mendorong sitotoksisiti dalam struktur tisu epitelium seperti kornea manusia (RhCE) seperti yang diukur oleh ujian MTT. Ujian MTT ialah kaedah ujian kolorimetrik untuk menilai aktiviti metabolik sel.

Daya tahan tisu epitelium seperti kornea manusia (RhCE) selepas pendedahan kepada bahan kimia ujian diukur dengan penukaran enzimatik pewarna penting MTT oleh sel hidup tisu kepada garam formazan biru MTT, yang diukur secara kuantitatif selepas penyingkiran daripada tisu . Sitotoksisiti diukur pada titik masa pendedahan yang berbeza.

Daya maju tisu epitelium seperti kornea manusia (RhCE) ditentukan dengan perbandingan dengan tisu yang dirawat dengan bahan kawalan negatif (peratus daya maju) dan kemudian digunakan untuk menganggar potensi bahaya mata bahan kimia ujian. Bahan kimia yang tidak memerlukan pengelasan dan pelabelan mengikut GHS PBB ditakrifkan sebagai bahan kimia yang tidak mengurangkan daya maju tisu di bawah ambang tertentu (iaitu daya maju tisu sekurang-kurangnya 2 peratus untuk UN GHS tidak dikategorikan).

Kaedah ujian yang diterangkan dalam piawaian OECD 492B ialah kaedah ujian kerengsaan mata bukan haiwan tunggal pertama yang digunakan untuk membezakan antara GHS Kategori 1, Kategori 2 dan bahan dan campuran yang tidak dikategorikan. Sehingga baru-baru ini, penyelesaian perengsa mata GHS Kategori 2 adalah berdasarkan pendekatan bukti berat kerana ketidakupayaan ujian in vitro tunggal untuk membezakan antara Kategori 1, Kategori 2 dan bahan ujian tidak dikategorikan. Dengan kelulusan panduan ujian OECD 492B, kini adalah mungkin untuk menentukan klasifikasi ini.

Bahan ujian dikelaskan untuk bahaya kerengsaan mata di bawah Sistem Pengelasan dan Pelabelan Bahan Kimia Harmoni Global Pertubuhan Bangsa-Bangsa Bersatu (UN GHS) ke dalam kategori berikut:

• GHS Kategori 1: Uji bahan atau campuran yang menyebabkan kerosakan mata yang serius atau kehilangan penglihatan yang tidak boleh diterbalikkan sepenuhnya selepas satu pendedahan
• GHS Kategori 2: Kerengsaan mata dan perubahan mata yang boleh diterbalikkan sepenuhnya selepas pendedahan tunggal kepada bahan ujian
• GHS Tiada kategori: Bahan ujian yang tidak dikelaskan untuk kerengsaan mata atau kerosakan mata yang serius ditakrifkan sebagai bahan yang tidak memenuhi keperluan pengelasan

Pada masa ini, tisu epitelium kornea manusia dirawat dengan bahan ujian mengikut protokol masa kepada ketoksikan. Oleh kerana kerosakan sel kornea dan kehilangan daya maju sangat dikaitkan dengan kesan buruk pada fungsi kornea dan ketajaman penglihatan, daya maju tisu HCE diukur selepas pendedahan kepada bahan ujian menggunakan titik akhir daya maju pengurangan MTT.

Model ramalan untuk pengkategorian GHS PBB adalah seperti berikut:

• Masa ketoksikan TTL untuk cecair
  • Tiada kategori: Purata daya maju tisu kurang daripada 50 peratus selepas ketiga-tiga pendedahan
  • Kategori 2: Mana-mana gabungan lain keputusan kebolehgunaan
  • Kategori 1: Purata daya maju tisu tidak melebihi 50 peratus selepas ketiga-tiga pendedahan
• Tempoh ketoksikan TTS untuk pepejal
  • Tiada kategori: Purata daya maju tisu melebihi 30 peratus selepas 40 minit pendedahan dan lebih 120 peratus selepas 60 minit pendedahan
  • Kategori 2: Mana-mana gabungan lain keputusan kebolehgunaan
  • Kategori 1: Purata daya maju tisu tidak lebih daripada 30 peratus selepas 40 minit pendedahan dan tidak lebih daripada 120 peratus selepas 60 minit pendedahan

Banyak pengeluar menggunakan piawaian OECD TG 492B untuk tujuan pengecaman dan pelabelan bahaya untuk mematuhi beberapa peraturan undang-undang.

Di antara pelbagai ujian, pengukuran, analisis dan kajian penilaian yang disediakan oleh organisasi kami untuk perniagaan dalam pelbagai sektor, dengan kakitangan terlatih dan pakar serta peralatan teknologi canggih, syarikat kami, seperti yang ditakrifkan dalam piawaian "OECD 492B Reconstructed human cornea-like epitelium ( kaedah ujian RhCE) untuk pengecaman bahaya mata" Ia juga menyediakan perkhidmatan ujian.