Активиране in vitro в дендритни клетки (OECD 442E)

Третото ключово събитие в пътищата на неблагоприятния резултат от сенсибилизирането на кожата се отнася до активирането на дендритни клетки и се отнася до абсолютната необходимост от сенсибилизиращ материал да се свърже и активира локалните дендритни клетки.

Използвайки процедура 442E на OECD, химикалите, които имат способността да активират дендритни клетки, се оценяват бързо със смеси или формулировки. Когато този метод за изпитване се използва във връзка с методите за тестване на процедурата 442C DPRA на OECD и процедурата на OECD 442D KeratinoSens, пътищата за неблагоприятни резултати от сенсибилизация на кожата се оценяват напълно без животни от молекулярно иницииране (DPRA) до ключов етап 3.

Експериментите за in vitro сенсибилизация на кожата, описани в процедура 442E на OECD, включват три различни метода за изпитване, които разглеждат активирането на дендритни клетки, третото ключово събитие при сенсибилизацията на кожата. Методите, описани в ръководството за изпитване, са следните:

• Анализ за активиране на човешка клетъчна линия, който измерва експресията на специфични маркери на клетъчната повърхност, свързани с узряването на дендритни клетки, а именно CD86 и CD54, използвайки поточна цитометрия
• Тест за активиране на клетъчна линия U86, измерващ експресията на специфичния клетъчен повърхностен маркер CD937
• Анализ на репортерния ген на интерлевкин-8, който измерва промените в цитокина, свързани с активирането на дендритни клетки чрез измерване на индуцирането на IL-8 иРНК

Накратко, кожната сенсибилизация се дефинира от глобалната хармонизирана система за класификация и етикетиране на химикалите на ООН като алергична реакция след контакт на кожата с тествания химикал.

Пътят на неблагоприятния резултат, водещ до сенсибилизация на кожата, включва редица важни събития. Този метод на изпитване разглежда активирането на дендритни клетки. Съобщава се, че кожните сенсибилизатори индуцират експресия на маркери на клетъчните мембрани (CD54 и CD86), свързани с активиране на дендритни клетки. Тези повърхностни молекули са типични маркери за активиране на дендритни клетки, които играят критична роля в праймирането на Т-клетки от дендритни клетки, активирайки имунния отговор. Данните, генерирани от този метод за изпитване, се оценяват в контекста на интегриран подход, т.е. в комбинация с други in vitro и химически модели за сенсибилизация на кожата.

Нашата организация също така предоставя услуги за тестване in vitro активиране (OECD 442E) в дендритни клетки със своя обучен и експертен персонал и модерно технологично оборудване, сред многобройните изследвания, измервания, анализи и оценка, които предоставя за бизнеса в различни сектори.