ASTM E2180-18 Стандартный метод испытаний для определения активности антимикробных агентов, включенных в полимерные или гидрофобные материалы

Стандарт «ASTM E2180-18 Стандартный тест для определения активности антимикробных агентов, включенных в полимерные или гидрофобные материалы», опубликованный Американским обществом по испытаниям и материалам (ASTM), описывает метод испытания, используемый для оценки (количественной) антимикробной активности агентов, включенных или связанных с преимущественно плоскими (двумерными) гидрофобными или полимерными поверхностями. Данный метод в первую очередь направлен на оценку антибактериальной активности, хотя с его помощью можно также тестировать и другие микроорганизмы, такие как дрожжи и конидии грибов.

Средство для инокуляции представляет собой агаровую суспензию, которая снижает поверхностное натяжение солевого раствора-носителя и обеспечивает образование псевдобиопленки, что обеспечивает более равномерный контакт инокулята с исследуемой поверхностью. Этот метод испытаний облегчает тестирование гидрофобных поверхностей с использованием клеток, содержащихся в матрице агаровой суспензии. Однако этот метод испытаний не подходит для определения активности против клеток биопленки, которые как генетически, так и метаболически отличаются от планктонных клеток, используемых в этом испытании.

Описанный метод испытаний может подтвердить наличие антимикробной активности в пластиках или гидрофобных поверхностях и позволяет определить количественные различия в антимикробной активности между необработанными пластиками или полимерами и теми, которые содержат связанные или включенные малорастворимые в воде антимикробные агенты. Можно также провести сравнение между количеством выживших на обработанных консервантом и контрольных гидрофобных поверхностях.

Этот метод также позволяет определить срок годности или долгосрочную эффективность антимикробной обработки, что можно сделать путем тестирования как немытых, так и промытых образцов в течение определенного промежутка времени. Однако для применения этих методов испытаний необходимы знания микробиологических методов.

Вкратце, этот метод испытаний можно использовать для оценки эффективности противомикробных препаратов, включенных или связанных с гидрофобными материалами, такими как пластик, эпоксидные смолы и другие твердые поверхности. Бактериальный инокулят на водной основе остается в тесном и равномерном контакте с обрабатываемым материалом в виде псевдобиопленки. Процентное снижение популяции выживших обработанных бактериальных клеток через 24 часа определяется по сравнению с необработанным контролем. Гидрофобный субстрат можно многократно тестировать с течением времени для оценки стойкой антимикробной активности.

Для целей настоящего стандарта применяются следующие термины и определения:

• Агаровая суспензия представляет собой полустуденистую жидкость, образующуюся при добавлении 3 г/л агар-агара к 0,85-процентному физиологическому раствору.
• В микробиологии вакцина — это образец, состоящий из живых спор, бактерий, одноклеточных организмов или другого живого материала, дрожжей или многоклеточных нитчатых грибов, или комбинации двух или более видов микроорганизмов, который помещается в испытательную среду или образец для тестирования с целью поддержки роста микроорганизмов или исследования его антимикробных свойств.
• Носитель инокулята — это раствор-носитель, используемый для переноса инокулята к определенному образцу или объекту.
• Нейтрализующая восстановительная вода — это жидкая питательная среда, используемая для нейтрализации воздействия тестируемого антимикробного агента.

Этот метод включает в себя инокуляцию расплавленной (45 градусов) агаровой суспензии стандартизированной бактериальной клеточной культурой. Тонкий слой (0,5–1,0 мл) инокулированной агаровой суспензии наносят пипеткой на исследуемый и необработанный контрольный материал (используют минимум три образца). По истечении указанного времени контакта (обычно 24 часа) выжившие микроорганизмы извлекаются путем элюирования инокулята агаровой суспензии из исследуемого субстрата в нейтрализующий бульон и извлекаются методами, обеспечивающими полное удаление инокулята из исследуемого вещества (например, обработка ультразвуком, встряхивание или ручная экстракция, например, в гомогенизаторе).

Делаются последовательные разведения, затем из каждого разведения делаются заливки или посевы на чашки Петри. Чашки с агаром и бульоны для разведения инкубируют в течение 48–62 часов при определенной температуре в зависимости от оптимальной температуры для тестируемого организма. Подсчитываются и регистрируются бактериальные колонии из каждой серии разведений. Рассчитывается процент снижения количества бактерий в обработанных и необработанных образцах.

Этот метод можно использовать для оценки эффективности комбинированных/связанных противомикробных препаратов на гидрофобных материалах, таких как пластики, эпоксидные смолы и другие твердые поверхности. Бактериальный инокулят на водной основе остается в тесном и равномерном контакте с обрабатываемым материалом в виде псевдобиопленки. Процент снижения выживших популяций подвергнутых воздействию бактериальных клеток через 24 часа определяется по сравнению с необработанным контролем. Гидрофобный субстрат можно многократно тестировать с течением времени для оценки стойкой антимикробной активности.

Наша организация, которая на протяжении многих лет стремится оказывать поддержку предприятиям всех секторов посредством широкого спектра испытаний, измерений, анализа и оценочных исследований, имеет сильный штат сотрудников, которые внимательно следят за мировыми достижениями в области науки и технологий и постоянно совершенствуются. В этом контексте предприятиям также предоставляются услуги по проведению испытаний в соответствии со стандартом «ASTM E2180-18. Стандартный тест для определения активности антимикробных веществ, включенных в полимерные или гидрофобные материалы».