"EPI-200-SIT အရေပြားယားယံခြင်းစမ်းသပ်မှု" သည် ဥရောပသမဂ္ဂ အမျိုးအစားခွဲခြားမှုစနစ်အရ အရေပြားယားယံခြင်းအန္တရာယ်ကို ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်းနှင့် အမျိုးအစားခွဲခြင်းဆိုင်ရာ အခြေအနေတွင် အရေပြားယားယံခြင်း ဖြစ်နိုင်ချေကို ခန့်မှန်းရန် ဒီဇိုင်းထုတ်ထားသည်။ ၎င်းသည် ဥရောပသမဂ္ဂနှင့် ဓာတုပစ္စည်းများ အမျိုးအစားခွဲခြင်းနှင့် တံဆိပ်ကပ်ခြင်းဆိုင်ရာ ကမ္ဘာလုံးဆိုင်ရာ သဟဇာတဖြစ်မှုစနစ် (GHS) တို့နှင့် ညီညွတ်သောကြောင့်၊ ဤစံနှုန်းတွင် ဖော်ပြထားသော လုပ်ထုံးလုပ်နည်းသည် GHS နှင့်အညီ ယားယံခြင်းများကို အန္တရာယ်ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်းကိုလည်း ခွင့်ပြုပေးပါသည်။
ဤစံနှုန်းသည် အမျိုးအစား 2 ယားယံခြင်း နှင့် ယားယံခြင်းမဟုတ်သော အမျိုးအစား ခွဲခြားမှုကို ခွင့်ပြုပါသည်။ ဖော်ပြထားသော စမ်းသပ်နည်းလမ်းသည် GHS ၏ မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော အမျိုးအစားခွဲများကြားတွင် ပိုင်းခြားခြင်းမရှိပါ၊ ဆိုလိုသည်မှာ၊ ၎င်းသည် GHS အမျိုးအစား 2 နှင့် အမျိုးအစား 3 ယားယံခြင်းကြားတွင် ခွဲခြားခြင်းမရှိပါ။
EPI-200-SIT စံနှုန်းတွင် ဖော်ပြထားသော နည်းလမ်းသည် ဆဲလ်ရှင်သန်နိုင်စွမ်းကို စမ်းသပ်ပြီးနောက် လူ့အရေပြားလွှာ၏ ပြန်လည်တည်ဆောက်ထားသော ပုံစံသို့ သန့်စင်သော စမ်းသပ်ဓာတုပစ္စည်းများကို ထိတွေ့မှု ပါဝင်ပါသည်။ ဆဲလ်များ၏ရှင်သန်နိုင်စွမ်းကို MTT ၏ dehydrogenase အဖြစ်ပြောင်းလဲခြင်းဖြင့်တိုင်းတာသည်၊ ၎င်းသည်ဆဲလ် mitochondria တွင်ပါရှိသောအပြာရောင်ဖော်မာဇန်ဆားအဖြစ်သို့ပြောင်းသည်၊၊ တစ်ရှူးများကိုဖယ်ရှားပြီးနောက်အရေအတွက်အားဖြင့်တိုင်းတာသည်။
အနုတ်လက္ခဏာထိန်းချုပ်မှုများ (ရေဖြင့်ပြုလုပ်ထားသော) နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ဓာတုပစ္စည်းများနှင့် ထိတွေ့နိုင်သော တစ်ရှူးများ၏ ရှင်သန်နိုင်စွမ်း လျော့ကျမှုကို အရေပြားယားယံခြင်း ဖြစ်နိုင်ချေကို ခန့်မှန်းရန် အသုံးပြုသည်။ အရေပြားယားယံမှုကို ခန့်မှန်းရန် အမျိုးမျိုးသော endpoints များကို အသုံးပြု၍ လူသား epidermis မော်ဒယ်များတွင် မကြာသေးမီက နှိုင်းယှဉ်လေ့လာမှုများက MTT endpoint သည် ထုတ်လွှတ်ခြင်းကဲ့သို့သော စက်ပိုင်းဆိုင်ရာ အဆုံးမှတ်များပင်လျှင် ထူးခြားသောအားသာချက်ရှိကြောင်း ပြသခဲ့သည်။
ပြန်လည်တည်ဆောက်ထားသော လူသား epidermal မော်ဒယ်တွင် လူသား epidermis ၏ အလွှာပေါင်းစုံ၊ အလွန်ကွဲပြားသော ကွဲပြားခြားနားသော စံနမူနာတစ်ခုအဖြစ် မွေးမြူထားသော သာမန်လူမှဆင်းသက်လာသော epidermal keratinocytes များ ပါဝင်သည်။ ၎င်းတွင် ပုံမှန် basal၊ spiny နှင့် granular layers နှင့် intercellular lamellar lipid အလွှာများပါဝင်သော multilayered stratum corneum သည် သက်ရှိတစ်ရှူးတွင်တွေ့ရသော ပုံစံများနှင့် ဆင်တူသည်။ ပြန်လည်တည်ဆောက်ထားသော လူ့အရေပြားမော်ဒယ်များနှင့် လိုက်လျောညီထွေဖြစ်စေမည့် ယေဘူယျဖော်ပြချက်အား OECD စမ်းသပ်မှုလမ်းညွှန်ချက်အသစ် (“431 In vitro skin corrosion: Human skin model” နှင့် “439 in vitro skin irritation- reconstructed human epidermis test method ”)
epidermis နှင့် culture medium ၏ ဇီဝအစိတ်အပိုင်းအားလုံးကို ဗိုင်းရပ်စ်၊ ဘက်တီးရီးယား၊ မှိုနှင့် mycoplasma ညစ်ညမ်းမှုများအတွက် ထုတ်လုပ်သူမှ စမ်းသပ်ထားသည်။ ရလဒ်များသည် သမိုင်းဒေတာဘေ့စ်မှ သတ်မှတ်သည့် အတိုင်းအတာတစ်ခုအတွင်းတွင် ရှိနေမည်ဟု မျှော်လင့်ပါသည်။
ပေါက်ဖွားပြီးနောက် အချိန်ကြာမြင့်သောကြောင့် စမ်းသပ်မှုကို အဏုဇီဝဘေးကင်းရေး ကက်ဘိနက် (laminar flow hood) တွင် ပိုးမွှားအခြေအနေများအောက်တွင် ပြုလုပ်ရပါမည်။
EPI-200-SIT အရေပြားယားယံမှုစမ်းသပ်မှုကို အလှကုန်နှင့် ဆေးဝါးပါဝင်ပစ္စည်းများ အပါအဝင် ဓာတုပစ္စည်းများပါဝင်သည့် ဓာတုပစ္စည်းများကို စမ်းသပ်စစ်ဆေးရန်အတွက် တီထွင်ပြီး အတည်ပြုထားသည်။ မပေါက်ဖွားမီ၊ မိနစ် 60 ထိတွေ့မှု၊ 42 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားပြီးနောက် နှင့် MTT ရှင်သန်နိုင်စွမ်းစမ်းသပ်ခြင်း တို့ပါ၀င်သည့် စမ်းသပ်ခြင်းအား 4 ရက်တာကာလအတွင်း လုပ်ဆောင်ပါသည်။ တစ်ရှူးများကို ရိတ်သိမ်းပြီး ညတွင်းချင်း ကြိုတင်ပေါက်ဖွားပြီးနောက် (နေ့ 0) တွင် တစ်ရှူးများသည် အရည်၊ semisolid၊ အစိုင်အခဲ သို့မဟုတ် ဖယောင်း ဖြစ်နိုင်သည့် စမ်းသပ်ဓာတုပစ္စည်းများ (နေ့ 1) နှင့် ထိတွေ့သည်။ စမ်းသပ်မှုတစ်ခုစီတွင် ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာ တစ်ရှူးသုံးခုနှင့် အပြုသဘောဆောင်သော ထိန်းချုပ်မှုတစ်ခု (aqueous sodium dodecyl sulfate ၅ ရာခိုင်နှုန်း) နှင့် အနုတ်လက္ခဏာထိန်းချုပ်မှုတစ်ခုအတွက် အသုံးပြုပါသည်။ ဓာတုဗေဒ ထိတွေ့မှုမှာ မိနစ် 5 ကြာမြင့်ပြီး ၎င်းတို့အနက်မှ တစ်ရှူးများကို 60 မိနစ် ၃၇ ဒီဂရီတွင် မီးဖိုထဲတွင် သိမ်းဆည်းထားသည်။ ထို့နောက် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် ဆေးကြောသည့်နည်းလမ်းဖြင့် တစ်ရှူးမျက်နှာပြင်မှ စမ်းသပ်ပစ္စည်းများကို ဖယ်ရှားသည်။ တစ်ရှူးထည့်သွင်းမှုများကို စွန်းထင်းပြီး လတ်ဆတ်သောအလတ်စားသို့ လွှဲပြောင်းပေးသည်။
24 နာရီကြာပေါက်ဖွားပြီးနောက် (ရက် 2) တွင်အလယ်အလတ်ကိုပြောင်းသည်။ cytokines သို့မဟုတ် အခြားစိတ်ဝင်စားဖွယ် အဆုံးအဖြတ်များကို ထပ်မံခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန်အတွက် မီဒီယာကို သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။ မီဒီယာပြောင်းလဲမှုပြီးနောက်၊ တစ်ရှူးများကို နောက်ထပ် 18 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားသည်။ 42 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားပြီးနောက် (ရက် 3) တွင် တစ်ရှူးများကို အဝါရောင် MTT ဖြေရှင်းချက်သို့ လွှဲပြောင်းပြီး 3 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားသည်။
အဓိကအားဖြင့် mitochondrial metabolism ဖြင့်ဖွဲ့စည်းထားသော ခရမ်းရောင်-အပြာရောင်ဖော်မာဇန်ဆားကို isopropanol သုံးပြီး 2 နာရီကြာထုတ်ယူသည်။ ထုတ်ယူထားသော ဖော်မာဇန်၏ အလင်းသိပ်သည်းဆကို spectrophotometer ဖြင့် ဆုံးဖြတ်သည်။ တစ်သျှူးများ၏ ရှင်သန်နိုင်စွမ်း 50 ရာခိုင်နှုန်းအောက် ကျဆင်းပါက အနုတ်လက္ခဏာ ထိန်းချုပ်မှုဖြင့် ကုသထားသော တစ်ရှူးများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ဓာတုပစ္စည်းတစ်မျိုးကို ဒေါသထွက်စေသည်။ ဤလုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို ဥရောပသမဂ္ဂစည်းမျဉ်းများနှင့်အညီ အန္တရာယ်ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်းနှင့် ဓာတုပစ္စည်းများတံဆိပ်ကပ်ခြင်းအတွက် vivo ယုန်အရေပြားယားယံခြင်းစမ်းသပ်မှုအတွက် ပြီးပြည့်စုံသောအစားထိုးအဖြစ် အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။
ကဏ္ဍအသီးသီးရှိ စီးပွားရေးလုပ်ငန်းများအတွက် ပံ့ပိုးပေးသော စမ်းသပ်ခြင်း၊ တိုင်းတာခြင်း၊ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် အကဲဖြတ်ခြင်းဆိုင်ရာ လေ့လာမှုများစွာတို့တွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့၏အဖွဲ့အစည်းသည် "EPI-200-SIT အရေပြားယားယံခြင်းစမ်းသပ်မှု" စံသတ်မှတ်ချက်တွင် သတ်မှတ်ထားသော စမ်းသပ်ဝန်ဆောင်မှုများကို ပေးဆောင်ထားပြီး၊ လေ့ကျင့်သင်ကြားပေးထားသော ကျွမ်းကျင်ဝန်ထမ်းများနှင့် အဆင့်မြင့်နည်းပညာပစ္စည်းများဖြင့်၊ .
ရက်ချိန်းယူရန်၊ အသေးစိတ်အချက်အလက်ရယူရန်သို့မဟုတ်အကဲဖြတ်ရန်တောင်းဆိုရန်ကျွန်ုပ်တို့၏ပုံစံကိုဖြည့်ရန်ကျွန်ုပ်တို့အားသင်တောင်းဆိုနိုင်သည်။
