OECD 492B-Testmethode für rekonstruiertes menschliches korneaähnliches Epithel (RhCE) zur Identifizierung von Augengefahren

In der im Rahmen der OECD-Leitlinien zum verantwortungsvollen Geschäftsgebaren für multinationale Unternehmen (OECD-Leitlinien) veröffentlichten Norm „OECD 492B Reconstructed human corneal-like epithelium (RhCE) test method for Eye Hazard Identifikation“ wird darauf hingewiesen, dass es keine Einstufung gibt Gemäß den Augengefahrenkategorien des UN-GHS (Kat.-Nr. Kat.) wird ein In-vitro-Verfahren beschrieben, das die Selbstidentifizierung von Chemikalien (Stoffen und Gemischen) ermöglicht, die eine Einstufung für Augenreizungen (Kat. 2) erfordern und für die eine Einstufung erforderlich ist schwere Augenschädigung (Kategorie 1).

Bei diesem Verfahren wird rekonstruiertes menschliches Hornhautepithel (RhCE) verwendet, das die histologischen, morphologischen, biochemischen und physiologischen Eigenschaften des menschlichen Hornhautepithels genau nachahmt. Der Test bewertet die Fähigkeit einer Testchemikalie, Zytotoxizität in einer menschlichen Hornhaut-ähnlichen Epithelgewebestruktur (RhCE) zu induzieren, gemessen mit dem MTT-Assay. Der MTT-Test ist eine kolorimetrische Testmethode zur Bewertung der Stoffwechselaktivität von Zellen.

Die Lebensfähigkeit von menschlichem Hornhautepithelgewebe (RhCE) nach Exposition gegenüber einer Prüfchemikalie wird durch die enzymatische Umwandlung des lebenswichtigen Farbstoffs MTT durch lebende Zellen des Gewebes in ein blaues Formazansalz von MTT gemessen, das nach Entfernung aus dem Gewebe quantitativ gemessen wird . Die Zytotoxizität wird zu verschiedenen Zeitpunkten der Exposition gemessen.

Die Lebensfähigkeit von menschlichem Hornhaut-ähnlichem Epithelgewebe (RhCE) wird durch Vergleich mit Geweben, die mit einer negativen Kontrollsubstanz behandelt wurden (prozentuale Lebensfähigkeit), bestimmt und dann zur Abschätzung des Augengefährdungspotenzials der Prüfchemikalie verwendet. Chemikalien, die gemäß UN GHS keiner Einstufung und Kennzeichnung bedürfen, werden als Chemikalien definiert, die die Lebensfähigkeit des Gewebes nicht unter einen bestimmten Schwellenwert reduzieren (d. h. die Lebensfähigkeit des Gewebes beträgt mindestens 2 Prozent für nicht kategorisiertes UN GHS).

Die im OECD-Standard 492B beschriebene Testmethode ist die erste einzelne, nicht an Tieren durchgeführte Testmethode zur Augenreizung, die zur Unterscheidung zwischen GHS-Kategorie 1, Kategorie 2 und nicht kategorisierten Stoffen und Gemischen verwendet wird. Bis vor Kurzem basierte die Entscheidung über augenreizende Stoffe der GHS-Kategorie 2 auf einem Beweiskraftansatz, da ein einzelner In-vitro-Test nicht in der Lage war, zwischen Testmaterialien der Kategorie 1, der Kategorie 2 und nicht kategorisierten Testmaterialien zu unterscheiden. Mit der Genehmigung des OECD-Testleitfadens 492B ist es nun möglich, diese Klassifizierungen festzulegen.

Testsubstanzen werden gemäß dem Global Harmonisierten System zur Einstufung und Kennzeichnung von Chemikalien der Vereinten Nationen (UN GHS) hinsichtlich der Gefahr einer Augenreizung in die folgenden Kategorien eingeteilt:

• GHS-Kategorie 1: Testsubstanzen oder Gemische, die nach einmaliger Exposition schwere Augenschäden oder einen Sehverlust verursachen, der nicht vollständig reversibel ist
• GHS-Kategorie 2: Augenreizungen und Augenveränderungen, die nach einmaliger Exposition gegenüber einer Testsubstanz vollständig reversibel sind
• GHS-Kategorie Nr.: Testsubstanzen, die nicht als Augenreizung oder schwere Augenschädigung eingestuft sind, werden als Substanzen definiert, die die Klassifizierungsanforderungen nicht erfüllen

Derzeit werden menschliche Hornhautepithelgewebe nach einem Time-to-Toxizitätsprotokoll mit Testsubstanzen behandelt. Da eine Schädigung der Hornhautzellen und ein Verlust der Lebensfähigkeit in hohem Maße mit nachteiligen Auswirkungen auf die Hornhautfunktion und die Sehschärfe einhergehen, wird die Lebensfähigkeit von HCE-Geweben nach Exposition gegenüber der Testsubstanz anhand des MTT-Reduktionslebensfähigkeitsendpunkts gemessen.

Das Vorhersagemodell für die UN-GHS-Kategorisierung lautet wie folgt:

• TTL-Toxizitätszeit für Flüssigkeiten
  • Keine Kategorie: Durchschnittliche Gewebelebensfähigkeit weniger als 50 Prozent nach allen drei Expositionen
  • Kategorie 2: Jede andere Kombination von Anwendbarkeitsergebnissen
  • Kategorie 1: Durchschnittliche Gewebelebensfähigkeit nicht mehr als 50 Prozent nach allen drei Expositionen
• TTS-Toxizitätszeitraum für Feststoffe
  • Keine Kategorie: Durchschnittliche Gewebelebensfähigkeit über 30 Prozent nach 40-minütiger Exposition und über 120 Prozent nach 60-minütiger Exposition
  • Kategorie 2: Jede andere Kombination von Anwendbarkeitsergebnissen
  • Kategorie 1: Durchschnittliche Gewebelebensfähigkeit nicht mehr als 30 Prozent nach 40-minütiger Exposition und nicht mehr als 120 Prozent nach 60-minütiger Exposition

Viele Hersteller verwenden den OECD TG 492B-Standard zur Gefahrenidentifizierung und -kennzeichnung, um eine Reihe gesetzlicher Vorschriften einzuhalten.

Unter den zahlreichen Test-, Mess-, Analyse- und Bewertungsstudien, die unsere Organisation mit ihrem geschulten und fachkundigen Personal und ihrer fortschrittlichen technologischen Ausrüstung für Unternehmen in verschiedenen Branchen durchführt, ist unser Unternehmen, wie in der Norm „OECD 492B Rekonstruiertes menschliches kornealähnliches Epithel ( RhCE)-Testmethode zur Identifizierung von Augengefahren“ Es bietet auch Testdienstleistungen an.