ASTM E2180-18 Standardtestmetod för bestämning av aktiviteten hos antimikrobiella medel som ingår i polymera eller hydrofoba material

Standarden ”ASTM E2180-18 Standardtest för bestämning av aktiviteten hos antimikrobiella medel inkorporerade i polymera eller hydrofoba material” publicerad av American Society for Testing and Materials (ASTM) beskriver en testmetod som används för att utvärdera (kvantitativt) den antimikrobiella aktiviteten hos medel inkorporerade i eller bundna till huvudsakligen plana (tvådimensionella) hydrofoba eller polymera ytor. Denna metod fokuserar främst på att utvärdera antibakteriell aktivitet, även om andra mikroorganismer såsom jäst- och svampkonidier också kan testas med denna metod.

Inokuleringsbäraren är en agaruppslamning som minskar ytspänningen hos saltlösningsinokuleringsbäraren och möjliggör bildandet av en pseudobiofilm, vilket möjliggör jämnare kontakt mellan inokulatet och testytan. Denna testmetod underlättar testning av hydrofoba ytor med hjälp av celler som hålls i en agaruppslamningsmatris. Denna testmetod är dock inte lämplig för att bestämma aktivitet mot biofilmceller som både genetiskt och metaboliskt skiljer sig från de planktonceller som används i detta test.

Den beskrivna testmetoden kan bekräfta förekomsten av antimikrobiell aktivitet i plaster eller hydrofoba ytor och möjliggör bestämning av kvantitativa skillnader i antimikrobiell aktivitet mellan obehandlade plaster eller polymerer och de som innehåller bundna eller inkorporerade lågvattenlösliga antimikrobiella medel. Jämförelser kan också göras mellan antalet överlevande på konserveringsmedelsbehandlade och kontrollhydrofoba ytor.

Denna metod möjliggör också bestämning av hållbarheten eller den långsiktiga hållbarheten hos en antimikrobiell behandling, vilket kan uppnås genom att testa både otvättade och tvättade prover över ett tidsintervall. Kunskap om mikrobiologiska tekniker krävs dock för att tillämpa dessa testmetoder.

Kortfattat kan denna testmetod användas för att utvärdera effektiviteten hos antimikrobiella medel som är inkorporerade eller bundna i hydrofoba material såsom plast, epoxihartser och andra hårda ytor. Det vattenbaserade bakterieinokulatet förblir i nära, enhetlig kontakt med det behandlade materialet som en pseudobiofilm. Den procentuella minskningen av populationer av överlevande utmanade bakterieceller efter 24 timmar bestäms jämfört med de från en obehandlad kontroll. Det hydrofoba substratet kan testas upprepade gånger över tid för att bedöma ihållande antimikrobiell aktivitet.

För denna standards syften gäller följande termer och definitioner:

• Agaruppslamning är den halvgelatinösa vätska som bildas när 3 g/L agar-agar tillsätts till 0,85 procent saltlösning.
• Inom mikrobiologi är ett vaccin ett prov bestående av levande sporer, bakterier, encelliga organismer eller annat levande material, jäst eller flercelliga filamentösa svampar, eller en kombination av två eller flera arter av mikroorganismer, som placeras i ett testmedium eller ett prov som ska testas för att stödja mikrobiell tillväxt eller för att undersöka dess antimikrobiella egenskaper.
• Inokulumbärare är den bärarlösning som används för att transportera inokulatet till ett visst prov eller objekt.
• Neutraliserande återvinningsvatten är det flytande tillväxtmedium som används för att neutralisera effekterna av det antimikrobiella testmedlet.

Denna metod innebär att man inokulerar smält (45 grader) agaruppslamning med en standardiserad bakteriecellkultur. Ett tunt lager (0,5–1,0 ml) av den inokulerade agaruppslamningen pipetteras på testmaterialet och det obehandlade kontrollmaterialet (minst tre prover används). Efter den angivna kontakttiden (vanligtvis 24 timmar) utvinns överlevande mikroorganismer genom eluering av agarslaminokulumet från testsubstratet till neutralisationsbuljongen och extraheras med metoder som säkerställer fullständigt avlägsnande av inokulumet från testsubstansen (t.ex. sonikering, vortexning eller manuell extraktion, t.ex. stomacher).

Seriella utspädningar görs, sedan görs häll- eller spridningsplattor från varje utspädning. Agarplattor och utspädningsbuljonger inkuberas i 48–62 timmar vid en specificerad temperatur beroende på den optimala temperaturen för testorganismen. Bakteriekolonier från varje utspädningsserie räknas och registreras. Procentandelen bakteriell minskning i behandlade och obehandlade prover beräknas.

Denna metod kan användas för att utvärdera effektiviteten hos kombinerade/bundna antimikrobiella medel på hydrofoba material såsom plast, epoxihartser och andra hårda ytor. Det vattenbaserade bakterieinokulatet förblir i nära, enhetlig kontakt med det behandlade materialet som en pseudobiofilm. Den procentuella minskningen av överlevande populationer av utmanade bakterieceller efter 24 timmar bestäms jämfört med de från en obehandlad kontroll. Det hydrofoba substratet kan testas upprepade gånger över tid för att bedöma ihållande antimikrobiell aktivitet.

Vår organisation, som i åratal har försökt stödja företag från alla sektorer med ett brett utbud av test-, mät-, analys- och utvärderingsstudier, har en stark personalstyrka som noggrant följer utvecklingen i världen inom vetenskap och teknik och ständigt förbättrar sig. I detta sammanhang tillhandahålls även testtjänster till företag i enlighet med standarden ”ASTM E2180-18 Standardtest för att bestämma aktiviteten hos antimikrobiella substanser som ingår i polymera eller hydrofoba material”.