In vitro 3T3 NRU fototoxicitetstest (OECD 432)

Fototoxicitet definieras som en toxisk reaktion på ett ämne som appliceras på kroppen och som uppstår eller ökar efter efterföljande exponering för ljus, eller som induceras av hudbestrålning efter systemisk administrering av ett ämne.

In vitro 3T3 NRU fototoxicitetstestet används för att detektera den fototoxiska potentialen hos ett testämne som induceras av den exciterade kemikalien efter exponering för ljus. Testet bedömer fotocytotoxicitet med den relativa minskningen av livsduglighet hos celler som exponeras för kemikalien i närvaro och frånvaro av ljus. Ämnen som identifierats av detta test kan vara fototoxiska in vivo efter systemisk applicering och distribution till huden, eller efter topisk applicering. Definitioner för denna testmetod finns i bilagan till OECD-procedur 432.

Många typer av kemikalier orsakar fototoxiska effekter. Deras gemensamma drag är deras förmåga att absorbera ljusenergi i solljusområdet. Enligt fotokemins första lag kräver fotoreaktion tillräcklig absorption av ljuskvantumet. Innan man överväger biologiska tester måste därför absorptionsspektrumet för OECD-testkemikalien bestämmas.

Denna testmetod är inte utformad för att förutsäga andra skadliga effekter från den kombinerade verkan av en kemikalie och ljus. Dessutom är detta test inte utformat för att ta itu med indirekta mekanismer för fototoxicitet, effekterna av metaboliter av testämnet eller effekterna av blandningar.

In vitro 3T3 NRU-fototoxicitetstestet är baserat på en jämförelse av en kemikalies cytotoxicitet när den testas i närvaro och frånvaro av exponering för en icke-cytotoxisk dos av simulerat solljus. Cytotoxiciteten i detta test uttrycks som den koncentrationsberoende minskningen av upptaget av det vitala färgämnet neutralrött mätt 24 timmar efter behandling med testkemikalien och bestrålning. NR är ett svagt katjoniskt färgämne som lätt penetrerar cellmembran utan diffusion och ackumuleras i lysosomer inuti cellen. Förändringar i cellytan på det sköra lysosomala membranet leder till lysosomal skörhet och andra förändringar som gradvis blir irreversibla. Sådana förändringar resulterar i minskat NR-upptag och bindning. Det är alltså möjligt att skilja mellan levande, skadade eller döda celler, vilket är grunden för detta test.

Vår organisation tillhandahåller också tjänster för in vitro 3T3 NRU fototoxicitetstestning (OECD 432) med sin utbildade och sakkunniga personal och avancerad teknisk utrustning, bland de många test-, mätnings-, analys- och utvärderingsstudier som den tillhandahåller för företag inom olika sektorer.