In vitro-aktivering i dendritiska celler (OECD 442E)

Den tredje nyckelhändelsen i de negativa utfallsvägarna för hudsensibilisering relaterar till aktivering av dendritiska celler och hänvisar till den absoluta nödvändigheten av ett sensibiliserande material för att binda och aktivera lokala dendritiska celler.

Med hjälp av OECD-procedur 442E utvärderas kemikalier som har förmågan att aktivera dendritiska celler snabbt med blandningar eller formuleringar. När denna testmetod används tillsammans med OECD-förfarandet 442C DPRA och OECD-förfarandet 442D KeratinoSens testmetoder, utvärderas negativa utfallsvägar för hudsensibilisering helt utan djur från molekylär initiering (DPRA) till nyckelstadium 3.

De in vitro-experiment för hudsensibilisering som beskrivs i OECD-procedur 442E omfattar tre olika testmetoder som behandlar aktiveringen av dendritiska celler, den tredje nyckelhändelsen vid hudsensibilisering. Metoderna som beskrivs i testriktlinjen är följande:

• Aktiveringsanalys för mänskliga cellinjer som mäter uttryck av specifika cellytmarkörer associerade med mognad av dendritiska celler, nämligen CD86 och CD54, med hjälp av flödescytometri
• U86 cellinjeaktiveringsanalys som mäter uttryck av den specifika cellytmarkören CD937
• Interleukin-8 reportergenanalys som mäter förändringar i en cytokin relaterade till aktivering av dendritiska celler genom att mäta induktionen av IL-8 mRNA

I korthet definieras hudsensibilisering av FN:s globala harmoniserade kemikalieklassificerings- och märkningssystem som en allergisk reaktion efter hudkontakt med den testade kemikalien.

Det negativa utfallet som leder till hudsensibilisering inkluderar ett antal viktiga händelser. Denna testmetod tar hänsyn till aktiveringen av dendritiska celler. Hudsensibilisatorer har rapporterats inducera expression av cellmembranmarkörer (CD54 och CD86) associerade med aktivering av dendritiska celler. Dessa ytmolekyler är typiska aktiveringsmarkörer för dendritiska celler som spelar en avgörande roll i T-cells priming av dendritiska celler, vilket aktiverar ett immunsvar. Data som genereras med denna testmetod utvärderas inom ramen för ett integrerat tillvägagångssätt, dvs i kombination med andra in vitro och kemiska hudsensibiliseringsmodeller.

Vår organisation tillhandahåller också in vitro-aktivering (OECD 442E) testtjänster i dendritiska celler med sin utbildade och expert personal och avancerad teknisk utrustning, bland de många test-, mätnings-, analys- och utvärderingsstudier som den tillhandahåller för företag inom olika sektorer.