Guia padrão ASTM E2315 para avaliação da atividade antimicrobiana usando o procedimento de eliminação de tempo

A norma "ASTM E2315 Standard Guide for Evaluation of Antimicrobial Activity Using Time-Killing Procedure", publicada pela Sociedade Americana de Testes e Materiais (ASTM), fornece um exemplo de um método que mede mudanças em populações de microrganismos aeróbicos ao longo de um período de amostragem especificado, quando materiais de teste antimicrobianos estão disponíveis. Esta norma oferece diversas opções para seleção e crescimento de organismos, preparação do inóculo, tempos de amostragem e temperaturas.

Quando a técnica é aplicada como um método de teste específico, é fundamental que as variáveis ​​mencionadas acima sejam padronizadas. A atividade antimicrobiana de materiais específicos medidos por esta técnica pode variar significativamente dependendo das variáveis ​​selecionadas. É importante compreender as limitações dos testes in vitro, particularmente ao comparar resultados de testes realizados com diferentes parâmetros. Por exemplo, resultados de testes de microrganismos que requerem suplementos de crescimento ou condições específicas de incubação podem não ser diretamente comparáveis ​​aos de organismos avaliados sem as condições especificadas. O conhecimento de técnicas microbiológicas é necessário para este procedimento.

Este procedimento pode ser usado para avaliar a redução in vitro da população microbiana de organismos de teste após exposição a um material de teste.

O teste de eliminação microbiana por suspensão é um ensaio laboratorial que mede o desempenho antimicrobiano de uma amostra líquida em um curto período de tempo. O teste mede a redução no número de bactérias de uma vacina microbiana conhecida durante tempos de contato específicos. Este método determina a taxa de eliminação microbiana efetiva de um produto final e geralmente é expressa em porcentagem (por exemplo, elimina 99,9% das bactérias em 30 segundos).

O teste padrão de tempo de eliminação pode ser realizado em qualquer produto líquido acabado, como higienizadores para as mãos, produtos de limpeza desinfetantes, sabonetes líquidos antibacterianos, enxaguantes bucais e muito mais.

O tempo de contato selecionado para a eliminação do tempo de suspensão deve ser apropriado para o tipo de produto final a ser testado. Por exemplo, um desinfetante para as mãos pode ser testado com um tempo de contato de 30 segundos, enquanto um limpador de superfícies duras pode ser testado por um tempo maior, dependendo das instruções de uso.

O teste de eliminação requer uma amostra de 250 g do seu produto líquido. A amostra é inoculada com uma cultura mista de quatro culturas bacterianas padrão. Em intervalos específicos (por exemplo, 30 segundos, 1 minuto, 2 minutos, 3 minutos e 5 minutos), 1 g da amostra inoculada é removido e colocado em um diluente biostático para inativar os biocidas presentes na amostra. O diluente é então colocado em um meio adequado e incubado, permitindo a quantificação do número de micróbios sobreviventes usando o método de contagem em placa.

A ASTM E2315 é uma ferramenta essencial para avaliar a eficácia de agentes antimicrobianos. Esta norma inclui um método para avaliar a redução das populações microbianas após a exposição a materiais de teste antimicrobianos in vitro e as alterações nas populações de microrganismos aeróbicos ao longo de um período específico. Esta norma foi elaborada para avaliar a eficácia de produtos como desinfetantes, higienizadores para as mãos, biocidas e produtos de limpeza. Esta norma enfatiza a flexibilidade, oferecendo uma variedade de opções para seleção de organismos, condições de crescimento, preparação do inóculo, tempos de amostragem e temperaturas para atender a diferentes necessidades de teste. No entanto, enfatiza a importância de padronizar essas variáveis ​​para garantir resultados consistentes e comparáveis ​​quando o método for usado como um teste específico.

As principais características desta norma são:

• Aplicabilidade: Adequado para testar agentes antimicrobianos líquidos ou sólidos que formam uma solução homogênea em água.
• Microrganismos: Concentra-se em microrganismos aeróbicos, com opções que incluem bactérias, fungos e leveduras, como Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Candida albicans.
• Variáveis: Permite a personalização das condições de teste (por exemplo, temperatura, intervalos de tempo), mas requer padronização para testes específicos para garantir a repetibilidade.
• Limitações: Os resultados podem variar dependendo das variáveis ​​selecionadas, e as comparações entre testes sob diferentes condições (por exemplo, microrganismos que requerem suplementos especiais de crescimento) podem não ser válidas.

A norma ASTM E2315 descreve um procedimento de eliminação de tempo que mede quantitativamente a redução das populações microbianas ao longo do tempo. O processo inclui as seguintes etapas:

• Preparação da suspensão microbiana: Uma suspensão microbiana padrão é preparada usando cepas representativas ou padrão apropriadas para o uso pretendido do produto.
• Exposição ao material de teste: O material de teste antimicrobiano (ou sua diluição) é misturado à suspensão microbiana sob condições controladas, como uma temperatura específica (por exemplo, 25 graus, alternativas como 22 graus, 30 graus ou 38 graus, dependendo da aplicação).
• Amostragem e neutralização: As amostras são coletadas em intervalos de tempo predeterminados (por exemplo, 15 segundos, 30 segundos, 60 segundos ou mais) e neutralizadas para inibir a atividade antimicrobiana. A neutralização garante a enumeração precisa dos microrganismos sobreviventes.
• Quantificação: Os microrganismos sobreviventes são contados usando técnicas de contagem em placas e a redução é calculada como redução log10 ou redução percentual em comparação à população microbiana inicial.

Como esta norma não especifica critérios de aprovação/reprovação, ela permite que os usuários definam a eficácia com base em suas necessidades específicas. Cada concentração de teste é normalmente realizada em duplicata para garantir a confiabilidade.

A norma ASTM E2315 é amplamente utilizada para avaliar a eficácia antimicrobiana de produtos e fornece dados essenciais para o desenvolvimento, validação e conformidade regulatória de produtos. Sua importância reside em sua capacidade de:

• Medição da eficácia antimicrobiana: o teste de eliminação baseado no tempo mede a eficácia com que um agente antimicrobiano reduz populações microbianas e fornece informações sobre as taxas de eliminação de bactérias, fungos e outros patógenos.
• Suporte ao desenvolvimento de produtos: os fabricantes usam esses testes para otimizar formulações e garantir que os produtos atendam às expectativas de desempenho antes de serem lançados no mercado.
• Garantindo a conformidade regulatória: o protocolo padronizado ajuda os fabricantes a demonstrar conformidade com os padrões do setor, aumentando a confiabilidade do produto nos mercados globais.
• Ampla aplicabilidade: Este método pode ser aplicado em todos os setores, incluindo saúde (por exemplo, desinfetantes), produtos de consumo (por exemplo, desinfetantes para as mãos) e aplicações industriais (por exemplo, biocidas).

Esta norma também reconhece as limitações dos testes in vitro, afirmando que os resultados podem não refletir diretamente as condições do mundo real e que as comparações entre testes com parâmetros diferentes devem ser feitas com cautela.

A norma ASTM E2315 enfatiza que os usuários devem determinar práticas adequadas de segurança e saúde, pois o procedimento pode envolver substâncias, processos ou equipamentos perigosos. Os usuários também devem determinar a aplicabilidade dos requisitos regulatórios antes de realizar os testes.

Como resultado, a norma ASTM E2315 é um elemento fundamental na avaliação da eficácia de produtos antimicrobianos. Sua metodologia flexível, porém rigorosa, apoia o desenvolvimento de produtos e a conformidade regulatória, permitindo que os fabricantes avaliem a redução microbiana em condições controladas. Ao fornecer uma abordagem padronizada e garantir resultados confiáveis ​​e reprodutíveis, esta norma tornou-se uma ferramenta indispensável para as indústrias que buscam combater eficazmente a contaminação microbiana.

Nossa organização, que atua há muitos anos e acompanha meticulosamente os desenvolvimentos globais em ciência e tecnologia, conta com uma equipe qualificada e ampla infraestrutura para realizar testes, medições e análises em uma ampla gama de áreas para empresas de todos os setores. Nesse contexto, também oferecemos serviços de testes em conformidade com o Guia Padrão ASTM E2315 para Avaliação da Atividade Antimicrobiana Utilizando o Procedimento de Eliminação Temporal.