A fototoxicidade é definida como uma resposta tóxica a uma substância aplicada ao corpo, que ocorre ou é intensificada após exposição subsequente à luz, ou que é induzida pela irradiação da pele após a administração sistêmica de uma substância.
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O teste de fototoxicidade in vitro 3T3 NRU é usado para detectar o potencial fototóxico de uma substância de teste induzida pelo produto químico excitado após exposição à luz. O teste avalia a fotocitotoxicidade com a diminuição relativa da viabilidade das células expostas ao produto químico na presença e ausência de luz. As substâncias identificadas por este teste podem ser fototóxicas in vivo após aplicação sistêmica e distribuição na pele, ou após aplicação tópica. As definições para este método de teste estão contidas no apêndice do procedimento 432 da OCDE.
Muitos tipos de produtos químicos causam efeitos fototóxicos. Sua característica comum é a capacidade de absorver energia luminosa na faixa da luz solar. De acordo com a primeira lei da fotoquímica, a fotorreação requer absorção suficiente do quantum de luz. Portanto, antes de considerar os testes biológicos, o espectro de absorção do produto químico em estudo da OCDE deve ser determinado.
Este método de teste não foi projetado para prever outros efeitos adversos da ação combinada de um produto químico e luz. Além disso, este ensaio não foi concebido para abordar os mecanismos indiretos de fototoxicidade, os efeitos dos metabolitos da substância em estudo ou os efeitos das misturas.
O teste de fototoxicidade in vitro 3T3 NRU é baseado na comparação da citotoxicidade de um produto químico quando testado na presença e ausência de exposição a uma dose não citotóxica de luz solar simulada. A citotoxicidade neste teste é expressa como a diminuição dependente da concentração na absorção do corante vital vermelho neutro quando medida 24 horas após o tratamento com o produto químico em estudo e irradiação. O NR é um corante catiônico fraco que penetra facilmente nas membranas celulares sem difusão e se acumula nos lisossomos dentro da célula. Alterações na superfície celular da frágil membrana lisossomal levam à fragilidade lisossomal e outras alterações que gradualmente se tornam irreversíveis. Tais alterações resultam em menor absorção e ligação de NR. Assim, é possível distinguir entre células vivas, danificadas ou mortas, que é a base deste teste.
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