Ativação in vitro em células dendríticas (OCDE 442E)

O terceiro evento chave nas vias de resultados adversos da sensibilização da pele refere-se à ativação das células dendríticas e refere-se à necessidade absoluta de um material sensibilizante para ligar e ativar as células dendríticas locais.

Usando o procedimento 442E da OCDE, os produtos químicos que têm a capacidade de ativar células dendríticas são rapidamente avaliados com misturas ou formulações. Quando este método de teste é usado em conjunto com o procedimento OECD 442C DPRA e o procedimento OECD 442D KeratinoSens métodos de teste, as vias de resultados adversos da sensibilização da pele são avaliadas completamente sem animais desde a iniciação molecular (DPRA) até o estágio chave 3.

Os experimentos de sensibilização cutânea in vitro descritos no procedimento 442E da OCDE envolvem três métodos de teste diferentes que abordam a ativação de células dendríticas, o terceiro evento chave na sensibilização cutânea. Os métodos descritos no guia de teste são os seguintes:

• Ensaio de ativação de linha celular humana que mede a expressão de marcadores de superfície celular específicos associados à maturação de células dendríticas, ou seja, CD86 e CD54, usando citometria de fluxo
• Ensaio de ativação de linha celular U86 medindo a expressão do marcador de superfície celular específico CD937
• Ensaio do gene repórter de interleucina-8 que mede alterações em uma citocina relacionada à ativação de células dendríticas medindo a indução de mRNA de IL-8

Resumidamente, a sensibilização da pele é definida pelo sistema global harmonizado de classificação e rotulagem química das Nações Unidas como uma reação alérgica após o contato da pele com o produto químico testado.

O caminho do resultado adverso que leva à sensibilização da pele inclui vários eventos importantes. Este método de teste considera a ativação de células dendríticas. Sensibilizadores de pele têm sido relatados para induzir a expressão de marcadores de membrana celular (CD54 e CD86) associados à ativação de células dendríticas. Essas moléculas de superfície são marcadores típicos de ativação de células dendríticas que desempenham um papel crítico na ativação de células T pelas células dendríticas, ativando uma resposta imune. Os dados gerados por este método de teste são avaliados no contexto de uma abordagem integrada, ou seja, em combinação com outros modelos in vitro e de sensibilização química da pele.

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