Prueba de fototoxicidad in vitro 3T3 NRU (OECD 432)

La fototoxicidad se define como una respuesta tóxica a una sustancia aplicada al cuerpo que se produce o se intensifica tras una exposición posterior a la luz, o que es inducida por la irradiación de la piel tras la administración sistémica de una sustancia.

La prueba de fototoxicidad 3T3 NRU in vitro se usa para detectar el potencial fototóxico de una sustancia de prueba inducida por el producto químico excitado después de la exposición a la luz. La prueba evalúa la fotocitotoxicidad con la reducción relativa de la viabilidad de las células expuestas a la sustancia química en presencia y ausencia de luz. Las sustancias identificadas por esta prueba pueden ser fototóxicas in vivo después de la aplicación sistémica y distribución en la piel, o después de la aplicación tópica. Las definiciones de este método de prueba se encuentran en el apéndice del procedimiento 432 de la OCDE.

Muchos tipos de productos químicos causan efectos fototóxicos. Su característica común es su capacidad para absorber energía luminosa en el rango de la luz solar. Según la primera ley de la fotoquímica, la fotorreacción requiere una absorción suficiente del cuanto de luz. Por lo tanto, antes de considerar las pruebas biológicas, se debe determinar el espectro de absorción de la sustancia de prueba de la OCDE.

Este método de prueba no está diseñado para predecir otros efectos adversos de la acción combinada de una sustancia química y la luz. Además, esta prueba no está diseñada para abordar los mecanismos indirectos de fototoxicidad, los efectos de los metabolitos de la sustancia de prueba o los efectos de las mezclas.

La prueba de fototoxicidad 3T3 NRU in vitro se basa en la comparación de la citotoxicidad de una sustancia química cuando se prueba en presencia y ausencia de exposición a una dosis no citotóxica de luz solar simulada. La citotoxicidad en esta prueba se expresa como la disminución dependiente de la concentración en la absorción del vital colorante rojo neutro cuando se mide 24 horas después del tratamiento con la sustancia problema y la irradiación. NR es un colorante catiónico débil que penetra fácilmente en las membranas celulares sin difusión y se acumula en los lisosomas dentro de la célula. Los cambios en la superficie celular de la frágil membrana lisosomal conducen a la fragilidad de los lisosomas y otros cambios que gradualmente se vuelven irreversibles. Dichos cambios dan como resultado una menor captación y unión de NR. Así, es posible distinguir entre células vivas, dañadas o muertas, que es la base de esta prueba.

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