Стандарт «OECD TG 435 Метод испытания мембранного барьера in vitro на раздражение кожи», опубликованный в соответствии с руководящими принципами ОЭСР по ответственному ведению бизнеса для транснациональных компаний (руководства ОЭСР), описывает метод испытания мембранного барьера in vitro, используемый для идентификации агрессивных химических веществ. В этом методе тестирования используется искусственная мембрана, предназначенная для реакции на агрессивные химические вещества аналогично коже животных.
Метод испытания мембранного барьера in vitro можно использовать для испытания твердых веществ, жидкостей и эмульсий. Однако водные вещества со значениями pH в диапазоне от 4,5 до 8,5 обычно не подходят для тестирования.
Описанный метод испытаний позволяет идентифицировать коррозионные химические вещества и смеси, а также классифицировать коррозионные вещества на подкатегории, как это разрешено глобально согласованной системой классификации и маркировки химических веществ. Эта классификация основана на времени проникновения вещества через мембранный барьер.
Эта система тестирования состоит из двух компонентов:
При применении этой тест-системы готовится соответствующее количество повторов для каждого тестируемого вещества и соответствующих ему контролей. Время нанесения тестируемого вещества на мембранный барьер фиксируется и распределяется в шахматном порядке. Время (в минутах) между нанесением испытуемого вещества на мембранный барьер и проникновением через барьер используется для определения коррозионной активности испытуемого вещества.
Разъедаемость кожи традиционно определялась путем нанесения тестируемого химического вещества на кожу живых животных и оценки степени повреждения тканей по истечении определенного периода времени. Помимо стандарта OECD TG 435, ряд других методов испытаний in vitro был принят в качестве альтернативы стандартной процедуре in vivo на коже кролика (OECD TG 404), используемой для идентификации коррозионно-активных химических веществ. Руководящие принципы ОЭСР рекомендуют использовать проверенные и принятые методы испытаний in vitro.
В этом модульном подходе положительные результаты методов испытаний in vitro используются для классификации химического вещества как коррозионного без необходимости испытаний на животных. Таким образом, цель заключается в предотвращении использования животных в испытаниях и предотвращении боли и страданий, которые могут возникнуть, если для этой цели используются животные.
Этот метод тестирования обнаруживает повреждение мембранного барьера, вызванное коррозийными тестируемыми химикатами при нанесении тестируемого химиката на поверхность синтетического макромолекулярного мембранного барьера с помощью «системы химического обнаружения», возможно, с помощью тех же механизмов раздражения, которые действуют в живой коже.
Проникновение или разрушение мембранного барьера можно измерить с помощью ряда процедур или систем химического обнаружения, включая изменение цвета индикаторного красителя pH или другого свойства индикаторного раствора под барьером.
Необходимо определить, что мембранный барьер пригоден для использования по назначению, то есть является актуальным и надежным. Это включает в себя обеспечение того, чтобы различные препараты были одинаковыми с точки зрения их барьерных свойств, таких как способность поддерживать барьер против некоррозионных химикатов, способность классифицировать коррозионные свойства химикатов среди подкатегорий коррозионной активности глобально согласованной системы классификации и маркировка химических веществ. Присвоенная классификация основана на времени, которое требуется химическому веществу для преодоления мембранного барьера и проникновения в индикаторный раствор.
Перед рутинным использованием метода испытания мембранного барьера in vitro лаборатории должны соответствовать настоящему стандарту и продемонстрировать свою техническую компетентность путем правильной классификации предлагаемых квалификационных веществ. Если указанное вещество недоступно или оправдано, может быть использовано другое вещество, для которого имеются достаточные справочные данные in vivo и in vitro.
Испытания должны проводиться при температуре окружающей среды (диапазон 17-25 градусов), а компоненты должны соответствовать условиям, указанным в стандарте.
Перед проведением испытания мембранного барьера проводится тест на химическую совместимость, чтобы определить, обнаруживается ли испытуемое химическое вещество системой химического обнаружения. Если система химического обнаружения не обнаруживает испытуемое химическое вещество, метод испытания мембранного барьера не подходит для оценки потенциальной коррозионной активности этого испытуемого химического вещества, и следует использовать другой метод испытания. Система химического обнаружения и условия воздействия, используемые для испытаний на совместимость, должны отражать воздействие при последующих испытаниях мембранного барьера.
Если испытуемый химикат, прошедший испытание на совместимость, подходит для данного метода испытаний, он должен быть подвергнут испытанию категории временной шкалы, которое представляет собой проверочный тест для различения слабых и сильных кислот или оснований. Например, в утвержденном эталонном методе испытаний используется тест на категоризацию временной шкалы, чтобы указать, какие две временные шкалы следует использовать в зависимости от того, обнаружены ли значительные запасы кислоты или щелочи. В зависимости от содержания кислоты или щелочи в испытуемом химикате следует использовать две разные шкалы времени проскока для определения коррозионной активности и глобально согласованную систему классификации и маркировки подкатегории химического воздействия на кожу.
Мембранный барьер состоит из двух компонентов: белкового макромолекулярного водного геля и проницаемой поддерживающей мембраны. Белковый гель должен быть непроницаем для жидкостей и твердых веществ, но может подвергаться эрозии и становиться проницаемым. Полностью построенный мембранный барьер должен храниться в заранее определенных условиях, которые, как было доказано, предотвращают деградацию геля, например, высыхание, рост микробов, сдвиг или растрескивание, которые могут ухудшить его характеристики. Следует определить приемлемый период хранения, и по истечении этого периода не следует использовать мембранозащитные препараты. Проницаемая поддерживающая мембрана обеспечивает механическую поддержку белкового геля во время процесса гелеобразования и воздействия тестируемого химического вещества. Поддерживающая мембрана должна предотвращать провисание или смещение геля и должна быть легко проницаема для всех тестируемых химикатов.
Что касается системы химического обнаружения, индикаторный раствор, который представляет собой тот же раствор, который используется для тестирования совместимости, должен реагировать на присутствие тестируемого химического вещества. Следует использовать краситель-индикатор pH или комбинацию красителей, таких как крезоловый красный и метилоранжевый, которые будут показывать изменение цвета в ответ на присутствие тестируемого химического вещества.
Помимо многочисленных исследований по тестированию, измерениям, анализу и оценке, которые она предоставляет предприятиям в различных секторах, наша организация также предоставляет услуги по тестированию, определенные в стандарте «OECD TG 435 In vitro, метод испытания мембранного барьера на раздражение кожи», с обученным и опытным персоналом. и современное технологическое оборудование.
Вы можете попросить нас заполнить нашу форму, чтобы записаться на прием, получить более подробную информацию или запросить оценку.
