Стандарт «OECD TG 442E Сенсибилизация кожи in vitro – Тест активации линии клеток человека (h-CLAT)», опубликованный в соответствии с руководящими принципами ОЭСР по ответственному ведению бизнеса для многонациональных предприятий (руководящие принципы ОЭСР), предлагается для рассмотрения активации дендритных клеток, ключевого события в неблагоприятном исходе сенсибилизации кожи.
В настоящем руководстве по испытаниям рассматривается конечная точка опасности для здоровья человека – сенсибилизация кожи после воздействия исследуемого химического вещества. Кожная сенсибилизация – это аллергическая реакция на контакт кожи с исследуемым химическим веществом, согласно определению, данному в Согласованной на глобальном уровне системе классификации и маркировки химических веществ ООН.
В настоящем стандарте предусмотрены четыре метода испытаний in vitro, которые касаются одного и того же ключевого события в цепи отрицательного результата:
Все эти методы используются для дифференциации кожных сенсибилизаторов и несенсибилизаторов в соответствии с Согласованной на глобальном уровне системой классификации и маркировки химических веществ ООН. Методы испытаний, описанные в настоящем руководстве, количественно оценивают изменения экспрессии набора генов, связанных с процессом активации моноцитов и дендритных клеток (геномная биомаркерная сигнатура), после воздействия маркеров клеточной поверхности или сенсибилизаторов.
Стандарт OECD TG 442E представляет собой надежный in vitro-тест для выявления потенциальных химических сенсибилизаторов кожи, обладающий широкой применимостью и прогностической точностью более 90%. Этот тест обеспечивает бинарное предсказание, классифицирующее тестируемые образцы как сенсибилизаторы или несенсибилизаторы кожи. Цель данного руководства — определить, может ли химическое вещество вызывать сенсибилизацию кожи, то есть аллергический контактный дерматит, путем активации специфических иммунных реакций без проведения испытаний на животных.
Тест активации линии клеток человека (h-CLAT) — это тест in vitro (без использования животных), используемый для оценки способности химического вещества вызывать сенсибилизацию кожи. Сенсибилизация кожи — это аллергическая реакция, вызванная чрезмерной реакцией иммунной системы на вещество после контакта с кожей. Тест h-CLAT разработан для моделирования ключевого биологического этапа развития сенсибилизации кожи: активации дендритных клеток (типа иммунных клеток) сенсибилизирующим химическим веществом.
Этот метод тестирования важен, поскольку он заменяет устаревшие испытания на животных. Более того, стандарт ОЭСР TG 442E ценен тем, что он предоставляет стандартизированные, научно обоснованные и признанные на международном уровне методы оценки того, вызывают ли химические вещества сенсибилизацию кожи — тип аллергической реакции, возникающий при многократном воздействии на кожу.
Метод h-CLAT позволяет количественно оценить изменения экспрессии маркеров клеточной поверхности, связанные с процессом активации моноцитов и дендритных клеток в клеточной линии моноцитарного лейкоза человека THP-1 после воздействия сенсибилизаторов. Измеренные уровни экспрессии маркеров клеточной поверхности дендритных клеток затем используются для подтверждения различий между сенсибилизаторами и десенсибилизаторами кожи.
Этот метод представляет собой анализ in vitro, который измеряет изменения экспрессии маркеров клеточной поверхности в клетках THP-1 линии клеток лейкемии моноцитов человека после 24 часов воздействия тестируемого вещества. Эти поверхностные молекулы являются типичными маркерами активации THP-1 моноцитов и могут имитировать активацию дендритных клеток, которые играют важную роль в прайминге Т-клеток. Изменения экспрессии поверхностных маркеров измеряются методом проточной цитометрии после окрашивания клеток антителами, меченными флуорохромом. Одновременно проводится измерение цитотоксичности, чтобы оценить, происходит ли повышение экспрессии поверхностных маркеров при субцитотоксических концентрациях. Относительная интенсивность флуоресценции поверхностных маркеров по сравнению с контролем растворитель/носитель рассчитывается и используется в модели прогнозирования для подтверждения различия между сенсибилизаторами и несенсибилизаторами.
Короче говоря, документ OECD TG 442 имеет решающее значение для поддержки этичных, надежных и единообразных на глобальном уровне испытаний безопасности химических веществ и потребительских товаров, особенно в свете меняющихся правил и общественного спроса на науку без жестокости.
Наша организация, которая уже много лет оказывает поддержку предприятиям всех секторов, предлагая широкий спектр мероприятий по испытаниям, измерениям, анализу и оценке, располагает сильной командой сотрудников, которые внимательно следят за мировыми достижениями в области науки и технологий и постоянно совершенствуются. В связи с этим мы также предоставляем предприятиям услуги по тестированию в соответствии со стандартом ОЭСР TG 442E «In vitro skin sensitive - Human cell activation test (h-CLAT)».
Вы можете попросить нас заполнить нашу форму, чтобы записаться на прием, получить более подробную информацию или запросить оценку.
