ASTM E2197-17 Standard kvantitativ skivbärartestmetod för bestämning av kemikaliers bakteriedödande, virusdödande, svampdödande, mykobaktericida och sporicida aktivitet

I standarden "ASTM E2197-17 Standard kvantitativ diskbärare testmetod för att bestämma bakteriedödande, virusdödande, svampdödande, mykobaktericida och spoicida aktiviteter av kemikalier" som utvecklats av American Society for Testing and Materials (ASTM), representerar borstat rostfritt stål hårt, icke -porösa miljöytor och medicinsk utrustning För att utvärdera förmågan att inaktivera vegetativa bakterier, virus, svampar, mykobakterier och bakteriesporer på skivbärare. En använd testmetod beskrivs.

Denna standard är också utformad för att ha överlevande jämfört med genomsnittet av minst tre kontrollbärare för att avgöra om prestationsstandarden har uppfyllts. För korrekt statistisk utvärdering av resultaten måste antalet livsdugliga organismer i testympningen vara tillräckligt högt för att ta hänsyn till både prestandastandarden och experimentella variationer i resultaten. Dessutom involverar denna testmetod ingen avtorkning eller gnuggning. Därför är den inte utformad för att testa borttagningar.

För ändamålen med denna standard gäller följande definitioner, utöver termerna och definitionerna i "ASTM E2756-19 Standardterminologi för antimikrobiella och antivirala medel":

• En bärare hänvisar till en livlös yta eller föremål som inokulerats med testorganismen.
• Eluat avser ett elueringsmedel som innehåller den eller de återvunna organismerna.
• Elueringsmedel är vilken lösning som helst som är ofarlig för testorganismen eller testorganismerna och som tillsätts till en bärare för att återvinna organismen eller organismerna.
• Neutralisering avser processen att släcka den antimikrobiella aktiviteten hos en testsubstans. Detta kan åstadkommas genom att späda ut eller tillsätta en eller flera kemiska neutralisatorer till blandningen av organismer eller testämnen.
• En jordbelastning är en lösning av en eller flera organiska eller oorganiska ämnen, eller båda, tillsatta till suspensionen av testorganismen för att simulera närvaron av kroppssekret, utsöndringar eller andra främmande ämnen.
• En testorganism är en organism som har egenskaper som gör att den lätt kan identifieras. Det kan också kallas ett surrogat, en simulator eller en markörorganism.
• Testsubstansen är en formulering som innehåller antimikrobiella ingredienser.

Varje skiva (1 cm i diameter) rymmer 10 µL testorganism med en mängd jord. Inokulumet torkas och skivan placeras sedan på den inre bottenytan av en steril plastflaska innan den kommer i kontakt med 50 µL av användningsutspädningen av testsubstansen. Kontakttid och temperatur kan varieras efter behov. Kontrollbärare får 50 µL vätska som är ofarlig för testorganismer och värdceller om de finns, men som i övrigt hanteras på samma sätt som testbärare.

För tester mot vegetativa bakterier, svampar, mykobakterier och bakteriesporer neutraliseras sedan testämnet och inokulumet elueras. Eluatet och efterföljande sköljningar av bäraren och flaskan passeras genom membranfiltret. Filterodlingsplattor inkuberas, kolonier räknas och log10-reduktioner beräknas.

För virusanalyser inokuleras lämpliga utspädningar av eluatet i lämpliga cellkulturer, kulturerna undersöks med avseende på cytopatologi/infektiösa foci, vilka uppskattas som det mest sannolika antalet eller räknas som foci eller plack, och log10 beräknas.

Utformningen av detta test eliminerar all förlust av livsdugliga organismer genom tvättning och gör det således möjligt att producera statistiskt giltiga data med mycket färre testbärare än vad som skulle krävas för metoder baserade på enkla mest sannolika antal uppskattningar.

Noggrannhet vid testning uppnås genom användning av en jordbelastning, mikrotopografin på bärytan av borstat rostfritt stål och det mindre förhållandet mellan testämne och ytarea som är typiskt för många desinfektionsmedelstillämpningar. Testsubstansen som utvärderas står således inför en rimlig utmaning när det gäller att möjliggöra effektiv återvinning av testorganismer från inokulerade bärare. Metallskivorna i grundtestet är också kompatibla med en lång rad aktiva substanser.

Bärarnas design gör det möjligt att placera en exakt uppmätt volym av testorganismen (10 µL) och kontrollvätska eller testsubstans (50 µL) i varje.

Inokulumet placeras i mitten av varje skiva medan volymer av testämnet täcker nästan hela skivans yta, vilket praktiskt taget eliminerar risken för exponering av alla organismer.

I alla tester utom de mot virus ger tillsatsen av 10 ml elueringsmedel/spädningsmedel en utspädning av testsubstansen 1:200 omedelbart i slutet av kontaktperioden. Även om detta steg i sig är tillräckligt för att stoppa den mikrobicida aktiviteten hos de flesta aktiva substanser, tillåter analysprotokollet tillsats av en specifik neutralisator till eluenten/spädningsmedlet om nödvändigt. Med undantag för virus tillåter membranfiltreringssteget också att hela eluatet från testbärarna kan bearbetas och därför fånga in och efterföljande detektering av även ett lågt antal livsdugliga organismer som kan finnas. Att skölja membranfiltren med saltlösning efteråt minskar också risken för att eventuella inhibitorrester förs in i återvinningsmediet.

Bland de många test-, mätnings-, analys- och utvärderingsstudier som genomförts för företag inom olika sektorer, har vårt företag, med sin utbildade och sakkunniga personal och avancerad teknisk utrustning, utvecklat "ASTM E2197-17 Standard kvantitativ skiva för att fastställa bakteriedödande, virusdödande, fungicida, mykobaktericida och spoicida aktiviteter av kemikalier". Det tillhandahåller också testtjänster definierade i standarden "bärartestmetoden".