Standarden ”OECD TG 431 In vitro skin irritation: Reconstructed human epidermis (RHE) test method”, publicerad enligt OECD:s riktlinjer för ansvarsfullt affärsuppförande för multinationella företag (OECD:s riktlinjer) , beskriver en testmetod som möjliggör identifiering av frätande kemikalier och blandningar, och, när den stöds av bevisviktning med hjälp av annan tillgänglig information, möjliggör identifiering av icke-frätande ämnen och blandningar. Detta testprotokoll visar också skillnaden mellan allvarliga och mindre allvarliga hudfrätande ämnen. Denna testmetod kräver inte användning av levande djur eller djurvävnad för bedömning av hudfrätande egenskaper.
-test-yontemi.jpg "OECD TG 431 Hudirritation in vitro: testmetod för rekonstruerad mänsklig epidermis (RhE)")
Hudfrätning avser produktionen av irreversibla hudskador som visar sig som synlig nekros från epidermis till dermis efter applicering av en testkemikalie. OECD TG 431-standarden tillhandahåller ett in vitro-förfarande som möjliggör identifiering av icke-frätande och frätande ämnen och blandningar i enlighet med det globalt harmoniserade systemet för klassificering och märkning av kemikalier. Det tillåter också en partiell underkategorisering av slipmedel.
Utvärdering av kemikaliers hudkorrosionspotential har ofta involverat användning av försöksdjur. Men förutom OECD TG 431-standarden har OECD TG 430 och OECD TG 435-standarderna också validerats och accepterats för att testa kemikaliers korrosionspotential. Dessutom har in vitro OECD TG 439-standarden utvecklats för att testa hudirritationspotential. Ett dokument om integrerade test- och utvärderingsmetoder för hudfrätning och hudirritation, som grupperar informationskällor och analysverktyg och ger vägledning om hur man integrerar och använder befintliga testdata och icke-testdata för att bedöma kemikaliers hudirritation och hudfrätningspotential, och när ytterligare testning krävs. Den beskriver flera moduler som föreslår ett tillvägagångssätt.
Den här standarden tar upp den mänskliga hälsoeffektpunkten för hudfrätning. Den använder rekonstruerad human epidermis (RhE) (härledd från otransformerade epidermala keratinocyter av mänskligt ursprung) som nära efterliknar de histologiska, morfologiska, biokemiska och fysiologiska egenskaperna hos de övre delarna av mänsklig hud, det vill säga epidermis.
OECD TG 431-standarden inkluderar fem validerade testmetoder som använder kommersiellt tillgängliga RhE-modeller.
När detta test utförs appliceras testkemikalien topiskt på en tredimensionell modell av RhE som består av odlade, otransformerade, mänskliga epidermala keratinocyter för att skapa en flerskiktad, mycket differentierad modell av mänsklig epidermis. Den består av regelbundna basala, taggiga och granulära skikt och ett flerskiktat stratum corneum som innehåller intercellulära lamellära lipidskikt som representerar stora lipidklasser liknande de som finns in vivo.
Två vävnadsreplikat används för varje behandling (exponeringstid) och kontroller. Frätande ämnen definieras efter deras förmåga att ge en minskning av cellviabiliteten under definierade tröskelnivåer vid specificerade exponeringstider. Färgade kemikalier kan också testas med en HPLC-procedur (high-performance liquid chromatography). Principen för testmetoden för human hudmodell bygger på antagandet att frätande kemikalier kan penetrera stratum corneum genom diffusion eller erosion och är cytotoxiska för de underliggande cellskikten. Cellviabilitet mäts genom den enzymatiska omvandlingen av det vitala färgämnet MTT till ett blått formazansalt, vilket mäts kvantitativt efter avlägsnande från vävnader. RhE-baserade testmetoder för hudirritation har visat sig detektera hudirritationseffekter in vivo utvärderade hos kaniner enligt OECD TG 404-standarden.
Före rutinmässig användning av någon av de fem validerade RhE-testmetoderna som överensstämmer med denna standard, måste laboratorier visa sin kompetens genom att korrekt klassificera de föreslagna färdighetsartiklarna i överensstämmelse med denna standard. Om en metod för underkategorisering används ska även korrekt underkategorisering visas. Om ett förtecknat ämne inte är tillgängligt eller motiverat kan ett annat ämne för vilket det finns tillräckliga referensdata in vivo och in vitro användas.
Testmetoderna som beskrivs i denna standard är:
Vår organisation, bland de många tester, mätningar, analyser och utvärderingsstudier som den genomför för företag inom olika sektorer, med sin utbildade och expert personal och avancerad teknisk utrustning, tillhandahåller det också testtjänster.
Du kan be oss fylla i vårt formulär för att få en tid, för att få mer detaljerad information eller för att begära en utvärdering.
