Standarden ”OECD TG 442E In vitro-hudsensibilisering – Aktiveringstest för mänskliga celllinjer (h-CLAT)”, publicerad enligt OECD:s riktlinjer för ansvarsfullt affärsuppförande för multinationella företag (OECD:s riktlinjer), föreslås för att hantera aktiveringen av dendritiska celler, en viktig händelse i den negativa utfallsvägen för hudsensibilisering.
Denna testriktlinje behandlar hudsensibilisering vid hälsorisk för människor efter exponering för en testkemikalie. Hudsensibilisering avser en allergisk reaktion efter hudkontakt med testkemikalien, enligt definitionen i FN:s globalt harmoniserade system för klassificering och märkning av kemikalier.
Denna standard tillhandahåller fyra in vitro-testmetoder som behandlar samma nyckelhändelse i processen för negativa resultat:
Alla dessa metoder används för att stödja skillnaden mellan hudsensibiliserande och icke-sensibiliserande ämnen i enlighet med FN:s globalt harmoniserade system för klassificering och märkning av kemikalier. Testmetoderna som beskrivs i denna testguide kvantifierar förändringar i uttrycket av en uppsättning gener associerade med aktiveringsprocessen hos monocyter och dendritiska celler (genomisk biomarkörsignatur) efter exponering för cellytmarkörer eller sensibiliserande ämnen.
OECD TG 442E-standarden är ett robust in vitro-test för att identifiera potentiella kemiska hudsensibiliseringsmedel med bred tillämpbarhet och över 90 procents prediktiv noggrannhet. Detta test ger en binär prediktion som klassificerar testprover som hudsensibiliseringsmedel eller icke-sensibiliseringsmedel. Syftet med denna riktlinje är att avgöra om ett kemiskt ämne kan orsaka hudsensibilisering, dvs. allergisk kontaktdermatit, genom att aktivera specifika immunsvar utan att utföra djurförsök.
Det humana celllinjeaktiveringstestet (h-CLAT) är ett in vitro-test (icke-djurtest) som används för att utvärdera om en kemikalie kan orsaka hudsensibilisering. Hudsensibilisering är en allergisk reaktion som orsakas av en överreaktion av immunsystemet på ett ämne efter hudkontakt. h-CLAT är utformat för att modellera ett viktigt biologiskt steg i utvecklingen av hudsensibilisering: aktiveringen av dendritiska celler (en typ av immuncell) av en sensibiliserande kemikalie.
Denna testmetod är viktig eftersom den ersätter äldre djurbaserade tester. Dessutom är OECD TG 442E-standarden värdefull eftersom den tillhandahåller standardiserade, vetenskapligt validerade och internationellt accepterade metoder för att bedöma om kemikalier orsakar hudsensibilisering, en typ av allergisk reaktion som orsakas av upprepad hudexponering.
h-CLAT-metoden kvantifierar förändringar i uttrycket av cellytemarkörer associerade med aktiveringsprocessen av monocyter och dendritiska celler i den humana monocytleukemicellinjen THP-1 efter exponering för sensibiliserande ämnen. De uppmätta uttrycksnivåerna av dendritiska cellytemarkörer används sedan för att stödja skillnaden mellan hudsensibiliserande ämnen och desensibiliserande ämnen.
Denna metod är en in vitro-analys som mäter förändringar i uttryck av cellytemarkörer i THP-1-celler i den humana monocyt-leukemicellinjen efter 24 timmars exponering för en testkemikalie. Dessa ytmolekyler är typiska markörer för monocyt-THP-1-aktivering och kan härma aktiveringen av dendritiska celler, vilka spelar en avgörande roll i T-cellsaktivering. Förändringar i uttryck av ytmarkörer mäts med flödescytometri efter cellfärgning med fluorokrommärkta antikroppar. Cytotoxicitetsmätning utförs samtidigt för att bedöma om uppreglering av ytmarköruttryck sker vid subcytotoxiska koncentrationer. Den relativa fluorescensintensiteten hos ytmarkörer jämfört med lösningsmedels-/vehikelkontrollen beräknas och används i prediktionsmodellen för att stödja skillnaden mellan sensibiliserande och icke-sensibiliserande ämnen.
Kort sagt är OECD TG 442 avgörande för att stödja etiska, tillförlitliga och globalt konsekventa säkerhetstester av kemikalier och konsumentprodukter, särskilt mot bakgrund av föränderliga regleringar och allmänhetens efterfrågan på cruelty-free vetenskap.
Vår organisation, som i åratal har stöttat företag inom alla sektorer genom ett brett utbud av test-, mät-, analys- och utvärderingsaktiviteter, har ett starkt team av medarbetare som noggrant följer den globala utvecklingen inom vetenskap och teknik och ständigt förbättrar sig. I detta sammanhang tillhandahåller vi även testtjänster till företag i enlighet med OECD TG 442E In vitro skin sensitivity - Human cell line activation test (h-CLAT) standard.
Du kan be oss fylla i vårt formulär för att få en tid, för att få mer detaljerad information eller för att begära en utvärdering.
