ASTM E2197-17 Стандартен количествен метод за изпитване на дискови носители за определяне на бактерицидната, вируцидната, фунгицидната, микобактерицидната и споицидната активност на химикали

В стандарта „ASTM E2197-17 Стандартен количествен метод за изпитване на дискови носители за определяне на бактерицидната, вирулицидната, фунгицидната, микобактерицидната и споицидната активност на химикалите“, разработен от Американското дружество за изпитване и материали (ASTM), полираната неръждаема стомана представлява твърда, не - порести повърхности на околната среда и медицински изделия за оценка на способността за инактивиране на вегетативни бактерии, вируси, гъбички, микобактерии и бактериални спори върху дискови носители. Описан е използван метод за изпитване.

Този стандарт също така е проектиран да има оцелели в сравнение със средната стойност на поне три контролни носители, за да се определи дали стандартът за ефективност е изпълнен. За правилна статистическа оценка на резултатите, броят на жизнеспособните организми в тестовия инокулум трябва да бъде достатъчно висок, за да отчете както стандарта за ефективност, така и експерименталните вариации в резултатите. Освен това, този метод на тестване не включва никакво избърсване или търкане. Следователно не е проектиран да тества изтривания.

За целите на този стандарт се прилагат следните дефиниции, в допълнение към термините и дефинициите в „ASTM E2756-19 Стандартна терминология за антимикробни и антивирусни агенти“:

• Носителят се отнася до нежива повърхност или обект, инокулиран с тестовия организъм.
• Елуатът се отнася до елуент, съдържащ възстановения организъм или организми.
• Елуент е всеки разтвор, който е безвреден за тестовия организъм или организми и се добавя към носител за възстановяване на организма или организмите.
• Неутрализацията се отнася до процеса на потискане на антимикробната активност на тестваното вещество. Това може да бъде постигнато чрез разреждане или добавяне на един или повече химически неутрализатори към сместа от организми или изпитвани вещества.
• Почвеният товар е разтвор на едно или повече органични или неорганични вещества, или и двете, добавени към суспензията на тестовия организъм, за да се симулира наличието на телесни секрети, екскрети или други чужди вещества.
• Тестовият организъм е организъм, който има характеристики, които позволяват лесното му идентифициране. Може също да се нарече сурогат, симулант или маркерен организъм.
• Тестваното вещество е формулировка, съдържаща антимикробни съставки.

Всеки диск (1 cm в диаметър) съдържа 10 µL от тестовия организъм с натоварване от почва. Инокулумът се изсушава и след това дискът се поставя върху вътрешната долна повърхност на стерилен пластмасов флакон, преди да влезе в контакт с 50 µL от използваното разреждане на тестваното вещество. Времето за контакт и температурата могат да се променят според нуждите. Контролните носители получават 50 µL течност, която е безвредна за тестовите организми и клетките гостоприемници, ако има такива, но с тях се работи по същия начин като с тестовите носители.

За тестове срещу вегетативни бактерии, гъбички, микобактерии и бактериални спори, тестваното вещество след това се неутрализира и инокулумът се елуира. Елуатът и последващите изплаквания на носителя и флакона преминават през мембранния филтър. Плаките с филтърна култура се инкубират, колониите се преброяват и log10 редукциите се изчисляват.

За вирусни анализи, подходящи разреждания на елуата се инокулират в подходящи клетъчни култури, културите се изследват за цитопатология/инфекциозни огнища, които се оценяват като най-вероятен брой или се броят като огнища или плаки, и се изчислява log10.

Дизайнът на този тест елиминира всяка загуба на жизнеспособни организми чрез измиване и по този начин прави възможно получаването на статистически валидни данни, като се използват много по-малко тестови носители, отколкото биха били необходими за методи, базирани на прости оценки на броя с най-голяма вероятност.

Строгостта при тестване се постига чрез използването на натоварване на почвата, микротопографията на носещата повърхност от полирана неръждаема стомана и по-малкото съотношение на тестваното вещество към повърхностната площ, което е типично за много дезинфектантни приложения. По този начин изпитваното вещество, което се оценява, е изправено пред разумно предизвикателство да позволи ефективно възстановяване на тестовите организми от инокулирани носители. Металните дискове в основния тест също са съвместими с широк спектър от активни вещества.

Конструкцията на носителите позволява да се постави точно измерен обем от тестовия организъм (10 µL) и контролната течност или изпитваното вещество (50 µL) във всеки.

Инокулумът се поставя в центъра на всеки диск, докато обемите от тестваното вещество покриват почти цялата повърхност на диска, като по този начин на практика се елиминира рискът от излагане на всякакви организми.

При всички тестове, с изключение на тези срещу вируси, добавянето на 10 mL елуент/разредител осигурява разреждане 1:200 на тестваното вещество непосредствено в края на периода на контакт. Докато тази стъпка сама по себе си е достатъчна за спиране на микробицидната активност на повечето активни вещества, протоколът за анализ позволява добавянето на специфичен неутрализатор към елуента/разредителя, ако е необходимо. С изключение на вирусите, етапът на мембранна филтрация също така позволява целият елуат от тестовите носители да бъде обработен и следователно улавяне и последващо откриване дори на малък брой жизнеспособни организми, които могат да присъстват. Последващото изплакване на мембранните филтри с физиологичен разтвор също намалява риска от пренасяне на остатък от инхибитор в средата за възстановяване.

Сред многобройните проучвания за тестване, измерване, анализ и оценка, извършени за предприятия в различни сектори, нашата компания, със своя обучен и експертен персонал и усъвършенствано технологично оборудване, е разработила „ASTM E2197-17 Стандартен количествен диск за определяне на бактерицидни, вирусоцидни, фунгицидни, микобактерицидни и споицидни активности на химикали". Той също така предоставя услуги за тестване, определени в стандарта "метод за изпитване на носител".