Стандартът „OECD TG 442E In vitro кожна сенсибилизация – тест за активиране на човешки клетъчни линии (h-CLAT)“, публикуван съгласно насоките на OECD за отговорно бизнес поведение за мултинационални предприятия (насоки на OECD), е предложен за справяне с активирането на дендритни клетки, ключово събитие в пътя на неблагоприятния резултат от кожната сенсибилизация.
Това ръководство за изпитване разглежда крайната точка на опасност за човешкото здраве - кожната сенсибилизация след излагане на изпитвано химично вещество. Кожната сенсибилизация се отнася до алергична реакция след контакт на кожата с изпитваното химично вещество, както е определено от Глобално хармонизираната система за класификация и етикетиране на химикали на Организацията на обединените нации.
Този стандарт предоставя четири метода за in vitro изпитване, които разглеждат едно и също ключово събитие в пътя на отрицателния резултат:
Всички тези методи се използват за подпомагане на разграничаването между сенсибилизатори на кожата и несенсибилизатори в съответствие с Глобално хармонизираната система за класификация и етикетиране на химикали на Организацията на обединените нации. Методите за изпитване, описани в това ръководство за изпитване, определят количествено промените в експресията на набор от гени, свързани с процеса на активиране на моноцити и дендритни клетки (геномна биомаркерна сигнатура) след излагане на маркери на клетъчната повърхност или сенсибилизатори.
Стандартът OECD TG 442E е надежден in vitro тест за идентифициране на потенциални химически кожни сенсибилизатори с широко приложение и над 90% точност на прогнозиране. Този тест предоставя двоична прогноза, която класифицира тестовите проби като кожни сенсибилизатори или несенсибилизатори. Целта на това ръководство е да се определи дали дадено химично вещество може да причини кожна сенсибилизация, т.е. алергичен контактен дерматит, чрез активиране на специфични имунни отговори, без да се извършват тестове върху животни.
Тестът за активиране на човешки клетъчни линии (h-CLAT) е in vitro (без животни) тест, използван за оценка дали даден химикал може да причини кожна сенсибилизация. Кожната сенсибилизация е алергична реакция, причинена от свръхреакция на имунната система към вещество след контакт с кожата. h-CLAT е предназначен да моделира ключов биологичен етап в развитието на кожната сенсибилизация: активирането на дендритни клетки (вид имунна клетка) от сенсибилизиращ химикал.
Този метод на изпитване е важен, защото замества по-старите тестове, базирани на животни. Освен това, стандартът OECD TG 442E е ценен, защото предоставя стандартизирани, научно валидирани и международно приети методи за оценка дали химикалите причиняват кожна сенсибилизация, вид алергична реакция, причинена от многократно излагане на кожата.
Методът h-CLAT количествено определя промените в експресията на маркери на клетъчната повърхност, свързани с процеса на активиране на моноцити и дендритни клетки в клетъчната линия THP-1 на човешка моноцитна левкемия след излагане на сенсибилизатори. Измерените нива на експресия на маркери на дендритните клетки на клетъчната повърхност се използват за подпомагане на разграничението между кожни сенсибилизатори и десенсибилизатори.
Този метод е in vitro анализ, който измерва промените в експресията на повърхностни клетъчни маркери в клетки от човешка моноцитна левкемия THP-1 след 24 часа излагане на изпитвано химично вещество. Тези повърхностни молекули са типични маркери за активиране на моноцитния THP-1 и могат да имитират активирането на дендритни клетки, които играят критична роля в праймирането на Т-клетките. Промените в експресията на повърхностни маркери се измерват чрез флуоцитометрия след оцветяване на клетките с флуорохром-маркирани антитела. Измерването на цитотоксичността се извършва едновременно, за да се оцени дали се наблюдава повишаване на експресията на повърхностни маркери при субцитотоксични концентрации. Относителният интензитет на флуоресценция на повърхностните маркери в сравнение с контролата разтворител/носител се изчислява и използва в модела за прогнозиране, за да се подпомогне разграничението между сенсибилизатори и несенсибилизатори.
Накратко, OECD TG 442 е от съществено значение за подкрепа на етични, надеждни и глобално последователни тестове за безопасност на химикали и потребителски продукти, особено в светлината на променящите се разпоредби и общественото търсене на наука, нецелесъобразна с животните.
Нашата организация, която от години подкрепя бизнеса във всички сектори чрез широк спектър от дейности по тестване, измерване, анализ и оценка, разполага със силен екип от служители, които следят отблизо световните развития в науката и технологиите и непрекъснато се усъвършенстват. В този контекст, ние също така предоставяме услуги за тестване на бизнеса в съответствие със стандарта на OECD TG 442E In vitro кожна чувствителност - тест за активиране на човешки клетъчни линии (h-CLAT).
Можете да ни помолите да попълним формуляра, за да получим среща, да получим по-подробна информация или да поискаме оценка.
