استاندارد فارماکوپه آمریکا (USP)، با عنوان «USP 61 بررسی میکروبیولوژیکی محصولات غیر استریل - آزمایش‌های شمارش میکروبی»، رویه‌های استاندارد شده‌ای را برای تعیین کمی میکروارگانیسم‌های زنده در محصولات دارویی غیر استریل و سایر موادی که این بخش ممکن است برای آنها قابل اجرا باشد، شرح می‌دهد. این استاندارد شامل روشی برای شمارش باکتری‌ها و قارچ‌های مزوفیل است که می‌توانند در شرایط هوازی رشد کنند.
هدف استاندارد USP 61 صرفاً تعیین وجود یا عدم وجود میکروارگانیسم‌ها نیست. در عوض، این استاندارد یک رویکرد کنترل‌شده و تکرارپذیر برای تعیین تعداد میکروبی و ارزیابی اینکه آیا یک محصول مشخصات کیفی میکروبیولوژیکی تعریف‌شده را برآورده می‌کند یا خیر، ارائه می‌دهد.
این استاندارد، آزمایش محصولات دارویی را برای تعیین فعالیت ضدمیکروبی آنها پوشش می‌دهد. هدف از این آزمایش، نشان دادن مناسب بودن محیط کشت مورد استفاده برای شمارش میکروارگانیسم‌ها است.
محصولات دارویی غیر استریل نیازی به عاری بودن کامل از میکروارگانیسم‌ها ندارند، اما سطح میکروبی آنها باید به درستی کنترل شود. آلودگی بیش از حد میکروبی می‌تواند منجر به خراب شدن محصول، تأثیر بر عملکرد و ایجاد خطرات بالقوه برای بیماران شود.
بنابراین، استاندارد USP 61 یک روش شمارش میکروبیولوژیکی استاندارد ارائه می‌دهد که می‌تواند در طول کنترل کیفیت، آزمایش محصول نهایی، تحقیقات تولید و ارزیابی کیفیت میکروبیولوژیکی مورد استفاده قرار گیرد.
این استاندارد از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است زیرا نتایج میکروبیولوژیکی می‌تواند تا حد زیادی تحت تأثیر تکنیک آماده‌سازی نمونه، شرایط کشت، بازیابی میکروارگانیسم و روش شمارش قرار گیرد. استانداردسازی این عوامل، قابلیت اطمینان و مقایسه‌پذیری نتایج آزمایش را افزایش می‌دهد.
استاندارد USP 61 در درجه اول مقدار میکروارگانیسم‌های مزوفیل هوازی زنده را مشخص می‌کند، از جمله:
این آزمایش‌ها کمی هستند، به این معنی که نتیجه به صورت شمارش میکروبی بیان می‌شود، نه صرفاً به صورت «شناسایی شده» یا «شناسایی نشده». بنابراین، استاندارد USP 61 با استاندارد USP 62 متفاوت است. در حالی که استاندارد USP 62 با تشخیص میکروارگانیسم‌های مشخص سروکار دارد، استاندارد USP 61 بر شمارش تمرکز دارد.
اصل اساسی، آماده‌سازی صحیح نمونه محصول، قرار دادن مقدار مناسبی از نمونه آماده‌شده در داخل یا روی یک محیط کشت میکروبیولوژیکی مناسب، انکوباسیون تحت شرایط مشخص و سپس شمارش کلنی‌های در حال رشد است. بسته به ماهیت محصول، تکنیک‌های شمارش مختلفی ممکن است مناسب باشند. رویکردهای رایج عبارتند از:
روش انتخاب شده باید برای محصول مناسب باشد. برخی از محصولات دارویی می‌توانند رشد میکروبی را مهار کنند، و شمارش مستقیم را غیرقابل اعتماد می‌کنند، مگر اینکه محصول به درستی رقیق، خنثی یا به روش دیگری عمل آوری شود.
یکی از مهمترین جنبه‌های استاندارد USP 61 نشان دادن این است که روش آزمایش انتخاب شده می‌تواند میکروارگانیسم‌ها را از محصول بازیابی کند. یک محصول ممکن است حاوی عوامل ضد میکروبی، مواد نگهدارنده، سطوح pH بیش از حد بالا، غلظت بالای نمک یا سایر خواصی باشد که مانع رشد میکروبی می‌شوند. اگر به این اثرات رسیدگی نشود، آزمایش ممکن است تعداد میکروبی را به طور مصنوعی پایین نشان دهد.
در نتیجه، مناسب بودن روش شمارش با استفاده از میکروارگانیسم‌های آزمایشی و کنترل‌های مناسب ارزیابی می‌شود. هدف این است که نشان داده شود میکروارگانیسم‌ها می‌توانند تحت شرایط آزمایش انتخاب شده از محصول بازیابی شوند. این یک مفهوم حیاتی کنترل کیفیت است: تعداد کم میکروب‌ها تنها در صورتی معنی‌دار است که روش آزمایش بازیابی کافی را نشان دهد.
محیط کشت مورد استفاده در آزمایش باید بتواند از رشد میکروارگانیسم‌هایی که آزمایش برای آنها در نظر گرفته شده است، پشتیبانی کند. بنابراین، استاندارد USP 61 شامل یک آزمایش محرک رشد به عنوان بخشی از کنترل میکروبیولوژیکی است. این امر به نشان دادن مناسب بودن محیط کشت برای بازیابی میکروارگانیسم‌ها کمک می‌کند. از میکروارگانیسم‌های مرجع مناسب برای آزمایش محیط استفاده می‌شود و قابلیت‌های رشد آنها تحت شرایط مشخص ارزیابی می‌شود. این امر به تشخیص جمعیت میکروبی واقعاً کم از نتیجه ضعیف ناشی از محیط کشت نامناسب یا معیوب کمک می‌کند.
کنترل‌های منفی نیز بخش مهمی از این روش هستند. از کنترل منفی برای نشان دادن عدم آلودگی سیستم آزمایش، محیط، تجهیزات و رویه‌های فرآیند استفاده می‌شود. اگر میکروارگانیسم‌ها در یک کنترل منفی مناسب رشد کنند، ممکن است لازم باشد اعتبار آزمایش بررسی شود. بنابراین، استاندارد USP 61 فقط یک روش شمارش کلنی نیست. این استاندارد شامل کنترل‌هایی است که برای نشان دادن معنادار بودن نتیجه میکروبیولوژیکی از نظر فنی طراحی شده‌اند.
آماده‌سازی نمونه تا حد زیادی به خواص فیزیکی و شیمیایی محصول بستگی دارد. مثال‌ها عبارتند از:
هدف، به دست آوردن یک نمونه معرف و در عین حال اجتناب از شرایطی است که به طور مصنوعی بازیابی میکروبی را افزایش یا کاهش می‌دهند.
پس از انکوباسیون، کلونی‌های میکروبی شمارش می‌شوند و نتیجه بر اساس مقدار محصول آزمایش شده و شرایط رقت یا فیلتراسیون مربوطه محاسبه می‌شود. نتایج را می‌توان به صورت شمارش میکروبی به شرح زیر بیان کرد:
سپس نتیجه با معیارهای پذیرش میکروبیولوژیکی قابل اجرا برای آن محصول خاص مقایسه می‌شود.
نکته مهم این است که خود استاندارد USP 61 در درجه اول یک روش آزمایش است. حد مجاز میکروبی توسط مونوگراف مربوطه، مشخصات، الزامات نظارتی یا سایر استانداردهای کیفی مناسب تعیین می‌شود، نه اینکه به طور خودکار برای هر محصول یکسان باشد.
استاندارد USP 61 در درجه اول مربوط به محصولات دارویی غیر استریل، از جمله محصولات نهایی مناسب، مواد اولیه و سایر ملزومات دارویی است که این بخش برای آنها قابل اجرا است. همچنین ممکن است برای سایر محصولات و کاربردهای تحت نظارت نیز اعمال شود. به عنوان مثال، FDA این استاندارد را به عنوان یک استاندارد اجماعی شناخته شده برای تجهیزات پزشکی فهرست می‌کند. با این حال، کاربردپذیری همیشه باید مطابق با مشخصات محصول مربوطه، مونوگراف، الزامات نظارتی و کاربرد مورد نظر تعیین شود.
استاندارد USP 61 ضروری است زیرا آلودگی میکروبی را نمی‌توان همیشه از طریق بازرسی بصری یا مشاهدات آزمایشگاهی عمومی به طور قابل اعتمادی ارزیابی کرد. این استاندارد موارد زیر را ارائه می‌دهد:
در نتیجه، استاندارد USP 61 یک استاندارد میکروبیولوژی دارویی حیاتی برای تعیین سطح میکروارگانیسم‌های زنده در محصولات غیر استریل زنده است. تمرکز اصلی آن شمارش کمی میکروارگانیسم‌های هوازی است. این استاندارد همچنین بر مناسب بودن روش، سنجش‌های محرک رشد، کنترل‌های مناسب، آماده‌سازی نمونه و شمارش قابل اعتماد تأکید دارد.
برای تولیدکنندگان، کاربرد صحیح استاندارد USP 61 بسیار مهم است، زیرا قابلیت اطمینان نتیجه شمارش میکروبی نه تنها به خود شمارش کلنی بستگی دارد، بلکه به نشان دادن این که کل روش تحلیلی قادر به بازیابی میکروارگانیسم‌ها از محصول مورد بررسی است نیز بستگی دارد.
سال‌هاست که سازمان ما با تیم متخصص و باتجربه خود، نیازهای مشتریان خود را درک کرده، خدمات تست پیشرفته مورد نیاز آنها را ارائه می‌دهد و در ایجاد، پیاده‌سازی و بهبود سیستم‌های مدیریتی به آنها کمک می‌کند. در این چارچوب، ما همچنین خدمات تست مطابق با استاندارد USP 61 را ارائه می‌دهیم.
برای دریافت قرار ملاقات، برای دریافت اطلاعات دقیق تر و یا درخواست ارزیابی، می توانید از ما بخواهید فرم ما را پر کند و به شما برسد.
