Test sterylności USP 71

Badania sterylności wyrobów medycznych, produktów farmaceutycznych i radiofarmaceutyków, zgodnie z definicją zawartą w normie „USP 71 Sterility Testing” opublikowanej przez Farmakopeę Stanów Zjednoczonych (USP), to proces testowania wymagany do weryfikacji sterylizacji i zwolnienia partii. Badania te są przeprowadzane na trzy główne sposoby w następujących zastosowaniach:

• Filtracja membranowa, stosowana głównie w produktach farmaceutycznych: Metoda badania sterylności filtracji membranowej, zazwyczaj stosowana w przypadku produktów farmaceutycznych filtrowalnych, wykorzystuje filtr o średnicy porów 0,45 mikrometra do zbierania mikroorganizmów z próbki. Filtr jest następnie przenoszony do środowiska tlenowego lub beztlenowego, w zależności od rodzaju badanych mikroorganizmów. W tej metodzie zazwyczaj stosuje się następujące media:
  • Płynne podłoże tioglikolanowe, inkubowane w temperaturze 30-35 stopni Celsjusza. Podłoże to jest stosowane do hodowli mikroorganizmów beztlenowych.
  • Podłoże na bazie soi, inkubowane w temperaturze 20-25 stopni Celsjusza. Podłoże to jest przeznaczone do hodowli mikroorganizmów tlenowych, w tym drożdży i pleśni.

Podłoże jest badane w ciągu 14-dniowego okresu inkubacji pod kątem oznak wzrostu mikroorganizmów, w tym zmętnienia i tworzenia błonki. Obecność wszelkich zanieczyszczeń jest następnie potwierdzana i identyfikowana za pomocą pasm agarowych. Podobnie jak w przypadku wszystkich procesów badawczych, sprzęt do filtracji membranowej jest walidowany w celu zapewnienia dokładnych wyników. Filtracja membranowa jest preferowaną metodą, szczególnie w przypadku produktów farmaceutycznych zawierających konserwanty lub inne substancje hamujące wzrost mikroorganizmów.

• Transfer bezpośredni, stosowany głównie w przypadku wyrobów medycznych: Metoda badania sterylności metodą transferu bezpośredniego, zazwyczaj stosowana w przypadku wyrobów medycznych, polega na zanurzeniu całego produktu w medium testowym, co umożliwia przeniesienie mikroorganizmów z produktu do medium. Proces ten jest szczególnie przydatny w sytuacjach, gdy produkt medyczny lub urządzenie medyczne nie zostały odpowiednio wysterylizowane, co spowodowało uszkodzenie, ale nie zniszczenie mikrobów. Dzięki metodzie transferu bezpośredniego mikroby te mogą się samoistnie zregenerować, a tym samym zostać precyzyjnie zidentyfikowane.

Transfer bezpośredni zazwyczaj odbywa się w dwóch rodzajach pożywek. Przestrzegane są odpowiednie procedury aseptycznego rozdzielania produktu na dwie lub więcej porcji do badań w obu rodzajach pożywek. Przetwarzane są również większe produkty, co wymaga identyfikacji, usunięcia i zbadania miejsc kontaktu. Próbki są inkubowane przez 14 dni, w trakcie których pożywki są regularnie badane pod kątem oznak wzrostu mikroorganizmów.

• Mycie produktu w przypadku produktów w tubach pustych: Metoda badania sterylności mycia produktu, zazwyczaj stosowana w przypadku produktów w tubach pustych, polega na myciu tuby i filtrowaniu eluatu przez membranę submikronową. Próbka jest następnie przenoszona na płynne pożywki tioglikolanowe i pożywki na bazie soi na okres 14 dni inkubacji i regularnie badana pod kątem wzrostu mikroorganizmów.

Zaawansowane laboratoria przestrzegają wszystkich wytycznych kwalifikacyjnych USP 71 dotyczących testów sterylności. Obejmują one test zgodności, który gwarantuje, że obecne w pożywce drobnoustroje będą się rozwijać, oraz test weryfikacyjny, który gwarantuje, że próbka testowa nie hamuje wzrostu drobnoustrojów poprzez bezwładność. Te procesy weryfikacji mają kluczowe znaczenie dla zapewnienia zgodności procesów testowych firmy i wspierania jej celów w zakresie zatwierdzania i wprowadzania do obrotu.

Koncepcja badania przydatności metody jest prosta. Do produktu dodaje się niewielką liczbę drobnoustrojów, filtruje się go, a następnie umieszcza na podłożu filtracyjnym. Produkt można również zaszczepić bezpośrednio na podłożu. Podłoże to inkubuje się maksymalnie przez 5 dni. Po inkubacji, jeśli wykrycie drobnoustrojów zostanie potwierdzone wizualnym zmętnieniem, a test zostanie powtórzony dla panelu organizmów Gram-ujemnych, Gram-dodatnich, pleśni i drożdży, test przydatności wykryje te organizmy, jeśli są one obecne w produkcie podczas rutynowego badania partii. Jednak test USP 71 wymaga 14-dniowego okresu inkubacji.

Farmakopee na całym świecie wykorzystują dostępne dane do określenia 14-dniowego progu sterylności. Dostępne dane potwierdzają skuteczność metody 14-dniowej sterylności w izolacji różnych organizmów:

• Organizmy chorobotwórcze stanowiące poważne zagrożenie dla zdrowia (E. coli, S. aureus)
• Stresujące izolaty środowiskowe, które mogą powstać podczas produkcji (pleśnie takie jak Penicillium i bakterie tworzące przetrwalniki takie jak Bacillus)
• Wolno rosnące organizmy, które można hodować, ale wymagają aż 14 dni, aby można je było wykryć wzrokowo (w szczególności C. acnes)
• Organizmy obecne w próbce w minimalnych ilościach

Norma USP 71 zawiera wszystkie dostępne dane dotyczące badania sterylności tą tradycyjną metodą, potwierdzając jej zdolność do odzyskiwania tych organizmów. Testowanie zgodności metody wskazuje jedynie na ogólne problemy danego produktu z odzyskiwaniem żywych mikrobów.

Krótko mówiąc, norma USP 71 ma kluczowe znaczenie dla przemysłu farmaceutycznego i biotechnologicznego, ponieważ ustanawia wytyczne dotyczące zapewnienia, że ​​produkty sterylne są wolne od żywych mikroorganizmów. Norma ta jest ważna z następujących powodów:

• Bezpieczeństwo pacjenta: Testy sterylności pomagają zagwarantować, że produkty takie jak preparaty do wstrzykiwań, implanty chirurgiczne i preparaty okulistyczne są wolne od szkodliwych mikroorganizmów, które mogą prowadzić do infekcji lub poważnych komplikacji zdrowotnych.
• Zgodność z przepisami: Zgodność ze standardem USP 71 jest wymagana przez organy regulacyjne, takie jak FDA, EMA i inne organizacje globalne. Standard ten gwarantuje, że produkty lecznicze spełniają rygorystyczne standardy sterylności, co czyni je bezpiecznymi do stosowania u ludzi.
• Zapewnienie jakości: Zgodność ze standardem USP 71 pomaga producentom utrzymać wysoki poziom kontroli jakości. Testując produkty pod kątem sterylności, producenci mogą zidentyfikować potencjalne zanieczyszczenia przed wprowadzeniem ich na rynek, co pomaga im utrzymać reputację producenta bezpiecznych i niezawodnych produktów.
• Spójność i niezawodność: Norma ta określa ustrukturyzowaną, naukowo potwierdzoną metodę przeprowadzania testów sterylności, gwarantującą ich spójność i niezawodność. Ma to kluczowe znaczenie w przypadku produktów przeznaczonych do stosowania w środowisku sterylnym.
• Zapobieganie zanieczyszczeniom mikrobiologicznym: Testy opisane w normie USP 71 pomagają wykryć zarówno zanieczyszczenie mikrobiologiczne, które może wystąpić podczas produkcji, jak i zanieczyszczenie mikrobiologiczne, które może wystąpić podczas przechowywania lub obsługi. Pomaga to zapobiegać rozwojowi mikroorganizmów, które mogłyby wpłynąć na jakość i bezpieczeństwo produktu.

Nasza organizacja, która od lat wspiera firmy z wszystkich sektorów, oferując szeroki zakres usług testowania, pomiarów, analiz i ewaluacji, dysponuje silnym zespołem pracowników, którzy uważnie śledzą światowe osiągnięcia w dziedzinie nauki i technologii oraz stale się rozwijają. W tym kontekście oferujemy również usługi testowe zgodne ze standardem USP 71 Sterility Testing.