OECD TG 431 การระคายเคืองผิวหนังภายนอกร่างกาย: วิธีทดสอบหนังกำพร้ามนุษย์ (RhE) ที่สร้างใหม่

มาตรฐาน “OECD TG 431 การทดสอบการระคายเคืองผิวหนังในหลอดทดลอง: วิธีทดสอบหนังกำพร้ามนุษย์ที่สร้างขึ้นใหม่ (RHE)” ซึ่งเผยแพร่ภายใต้แนวทางปฏิบัติของ OECD เกี่ยวกับการดำเนินธุรกิจอย่างมีความรับผิดชอบสำหรับบริษัทข้ามชาติ (แนวทางปฏิบัติของ OECD) อธิบายวิธีการทดสอบที่ช่วยให้สามารถระบุสารเคมีและสารผสมที่มีฤทธิ์กัดกร่อนได้ และเมื่อได้รับการสนับสนุนด้วยการถ่วงน้ำหนักหลักฐานโดยใช้ข้อมูลอื่น ๆ ที่มีอยู่ จะช่วยให้สามารถระบุสารและสารผสมที่ไม่กัดกร่อนได้ โปรโตคอลการทดสอบนี้ยังแสดงให้เห็นถึงความแตกต่างระหว่างสารกัดกร่อนผิวหนังที่รุนแรงและไม่รุนแรง วิธีการทดสอบนี้ไม่จำเป็นต้องใช้สัตว์มีชีวิตหรือเนื้อเยื่อสัตว์ในการประเมินความกัดกร่อนของผิวหนัง

การกัดกร่อนของผิวหนังหมายถึงการผลิตความเสียหายต่อผิวหนังที่ไม่สามารถรักษาให้หายขาดได้ ซึ่งปรากฏเป็นเนื้อตายที่มองเห็นได้ตั้งแต่ชั้นหนังกำพร้าไปจนถึงชั้นหนังแท้หลังจากการใช้สารเคมีทดสอบ มาตรฐาน OECD TG 431 จัดให้มีขั้นตอนในหลอดทดลองที่ช่วยให้สามารถระบุสารและสารผสมที่ไม่กัดกร่อนและกัดกร่อนได้ตามระบบการจำแนกประเภทและการติดฉลากสารเคมีที่เป็นระบบเดียวกันทั่วโลก นอกจากนี้ยังช่วยให้มีการแบ่งประเภทย่อยของสารกัดกร่อนได้บางส่วน

การประเมินศักยภาพในการกัดกร่อนผิวหนังของสารเคมีมักเกี่ยวข้องกับการใช้สัตว์ทดลอง อย่างไรก็ตาม นอกเหนือจากมาตรฐาน OECD TG 431 แล้ว มาตรฐาน OECD TG 430 และ OECD TG 435 ยังได้รับการตรวจสอบและยอมรับเพื่อทดสอบศักยภาพในการกัดกร่อนของสารเคมีอีกด้วย นอกจากนี้ มาตรฐาน OECD TG 439 ในหลอดทดลอง ยังได้รับการพัฒนาเพื่อทดสอบศักยภาพในการระคายเคืองผิวหนัง เอกสารเกี่ยวกับแนวทางการทดสอบและประเมินผลแบบบูรณาการสำหรับการกัดกร่อนและการระคายเคืองผิวหนัง ซึ่งจัดกลุ่มแหล่งข้อมูลและเครื่องมือวิเคราะห์ และให้คำแนะนำเกี่ยวกับวิธีการบูรณาการและใช้ข้อมูลการทดสอบและข้อมูลที่ไม่ใช่การทดสอบที่มีอยู่ เพื่อประเมินการระคายเคืองผิวหนังและศักยภาพในการกัดกร่อนผิวหนังของสารเคมี และ เมื่อจำเป็นต้องมีการทดสอบเพิ่มเติม โดยจะอธิบายหลายโมดูลที่เสนอแนวทาง

มาตรฐานนี้กล่าวถึงการกัดกร่อนของผิวหนังจุดสิ้นสุดด้านสุขภาพของมนุษย์ ใช้หนังกำพร้าของมนุษย์ที่สร้างขึ้นใหม่ (RhE) (ได้มาจากเซลล์เคราติโนไซต์ของผิวหนังชั้นนอกที่ยังไม่เปลี่ยนรูปจากต้นกำเนิดของมนุษย์) ซึ่งเลียนแบบคุณสมบัติทางเนื้อเยื่อวิทยา สัณฐานวิทยา ชีวเคมี และสรีรวิทยาของส่วนบนของผิวหนังมนุษย์อย่างใกล้ชิด ซึ่งก็คือหนังกำพร้า

มาตรฐาน OECD TG 431 มีวิธีการทดสอบที่ได้รับการตรวจสอบแล้ว XNUMX วิธีโดยใช้แบบจำลอง RhE ที่มีจำหน่ายในท้องตลาด

เมื่อทำการทดสอบนี้ สารเคมีทดสอบจะถูกนำไปใช้กับแบบจำลองสามมิติของ RhE ซึ่งประกอบด้วยเซลล์เคราติโนไซต์จากผิวหนังชั้นนอกที่เพาะเลี้ยงและยังไม่เปลี่ยนรูป ซึ่งได้มาจากมนุษย์ เพื่อสร้างแบบจำลองหลายชั้นและมีความแตกต่างสูงของหนังกำพร้าของมนุษย์ ประกอบด้วยชั้นฐาน หนาม และชั้นเม็ดปกติ และชั้น corneum หลายชั้นที่มีชั้นไขมัน lamellar ระหว่างเซลล์ ซึ่งเป็นชั้นไขมันหลักที่คล้ายกับชั้นไขมันที่พบในสิ่งมีชีวิต

มีการใช้การจำลองเนื้อเยื่อสองแบบสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง (เวลาสัมผัส) และการควบคุม สารที่มีฤทธิ์กัดกร่อนถูกกำหนดตามความสามารถในการลดความอยู่รอดของเซลล์ให้ต่ำกว่าระดับเกณฑ์ที่กำหนด ณ เวลาสัมผัสที่กำหนด สารเคมีที่มีสีสามารถทดสอบได้โดยใช้ขั้นตอน HPLC (โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง) หลักการของวิธีทดสอบแบบจำลองผิวหนังของมนุษย์นั้นตั้งอยู่บนสมมติฐานที่ว่าสารเคมีที่มีฤทธิ์กัดกร่อนสามารถทะลุผ่านชั้นผิวหนังชั้นนอกผ่านการแพร่กระจายหรือการกัดเซาะ และเป็นพิษต่อเซลล์ในชั้นเซลล์ที่อยู่ด้านล่าง ความมีชีวิตของเซลล์วัดได้จากการเปลี่ยนเอนไซม์ของสีย้อมสำคัญ MTT ไปเป็นเกลือฟอร์มาซานสีน้ำเงิน ซึ่งวัดในเชิงปริมาณหลังจากนำออกจากเนื้อเยื่อ มีการแสดงวิธีทดสอบการระคายเคืองผิวหนังที่ใช้ RhE เพื่อตรวจจับผลการระคายเคืองผิวหนัง ภายในร่างกาย ซึ่งประเมินในกระต่ายตามมาตรฐาน OECD TG 404

ก่อนที่จะใช้วิธีทดสอบ RhE ที่ได้รับการตรวจสอบความถูกต้องทั้ง 5 วิธีเป็นประจำซึ่งเป็นไปตามมาตรฐานนี้ ห้องปฏิบัติการจะต้องแสดงความสามารถของตนโดยจำแนกประเภทรายการความสามารถที่เสนออย่างถูกต้องเพื่อให้เป็นไปตามมาตรฐานนี้ หากใช้วิธีการจัดหมวดหมู่ย่อย จะต้องแสดงการจัดหมวดหมู่ย่อยที่ถูกต้องด้วย ในกรณีที่ไม่มีสารตามรายการหรือมีเหตุผลสมควร อาจใช้สารอื่นที่มีข้อมูลอ้างอิงในสิ่งมีชีวิตและในหลอดทดลองเพียงพอ

วิธีการทดสอบที่อธิบายไว้ในมาตรฐานนี้คือ:

• เอพิสกิน™
• เอพิเดอร์ม™ SCT
• สกินเอธิค™ RHE
• เอพิคส์®
• LabCyte EPI-MODEL24 SCT

องค์กรของเรามีการศึกษาการทดสอบ การวัด การวิเคราะห์ และการประเมินผลที่ดำเนินการสำหรับธุรกิจในภาคส่วนต่างๆ ด้วยพนักงานที่ได้รับการฝึกอบรมและเชี่ยวชาญและอุปกรณ์เทคโนโลยีขั้นสูง องค์กรของเรายังให้บริการการทดสอบอีกด้วย