มาตรฐาน “OECD TG 442E In vitro skin sensitization – Human cell line activation test (h-CLAT)” ที่เผยแพร่ภายใต้แนวปฏิบัติของ OECD เกี่ยวกับการดำเนินธุรกิจอย่างมีความรับผิดชอบสำหรับองค์กรข้ามชาติ (แนวปฏิบัติของ OECD) ได้รับการเสนอเพื่อจัดการกับการกระตุ้นเซลล์เดนไดรต์ ซึ่งเป็นเหตุการณ์สำคัญในเส้นทางผลลัพธ์ที่ไม่พึงประสงค์สำหรับภาวะแพ้ผิวหนัง
แนวทางการทดสอบนี้ระบุถึงอันตรายต่อสุขภาพของมนุษย์ที่ทำให้เกิดการแพ้ทางผิวหนังหลังจากสัมผัสสารเคมีทดสอบ การแพ้ทางผิวหนังหมายถึงปฏิกิริยาภูมิแพ้หลังจากสัมผัสสารเคมีทดสอบทางผิวหนัง ตามนิยามของระบบการจำแนกประเภทและการติดฉลากสารเคมีที่ประสานกันทั่วโลกของสหประชาชาติ
มาตรฐานนี้กำหนดวิธีการทดสอบในหลอดทดลองสี่วิธีซึ่งกล่าวถึงเหตุการณ์สำคัญเดียวกันในเส้นทางผลลบ:
วิธีการทั้งหมดนี้ใช้เพื่อสนับสนุนการแยกแยะระหว่างสารก่อภูมิแพ้ผิวหนังและสารที่ไม่ก่อภูมิแพ้ตามระบบการจำแนกประเภทและการติดฉลากสารเคมีที่ประสานกันทั่วโลกของสหประชาชาติ วิธีการทดสอบที่อธิบายไว้ในคู่มือการทดสอบนี้วัดปริมาณการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของชุดยีนที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการกระตุ้นเซลล์โมโนไซต์และเซลล์เดนไดรต์ (ลายเซ็นไบโอมาร์กเกอร์จีโนม) หลังจากสัมผัสกับสารก่อภูมิแพ้หรือสารก่อภูมิแพ้ที่ผิวเซลล์
มาตรฐาน OECD TG 442E เป็นการทดสอบในหลอดทดลองที่มีประสิทธิภาพสำหรับการระบุสารเคมีที่ก่อให้เกิดการแพ้ต่อผิวหนัง ซึ่งมีการนำไปใช้ได้อย่างกว้างขวางและมีความแม่นยำในการทำนายมากกว่า 90 เปอร์เซ็นต์ การทดสอบนี้ให้การทำนายแบบไบนารีที่จำแนกตัวอย่างทดสอบเป็นสารที่ก่อให้เกิดการแพ้ต่อผิวหนังหรือไม่ วัตถุประสงค์ของแนวปฏิบัตินี้คือเพื่อพิจารณาว่าสารเคมีสามารถก่อให้เกิดการแพ้ต่อผิวหนัง เช่น ผิวหนังอักเสบจากการสัมผัสสารก่อภูมิแพ้ได้หรือไม่ โดยการกระตุ้นการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันเฉพาะโดยไม่ต้องทดลองกับสัตว์
การทดสอบการกระตุ้นเซลล์ไลน์ในมนุษย์ (h-CLAT) เป็นการทดสอบในหลอดทดลอง (ไม่ใช่การทดสอบในสัตว์) ที่ใช้ประเมินว่าสารเคมีสามารถทำให้เกิดการแพ้ทางผิวหนังได้หรือไม่ ภาวะการแพ้ทางผิวหนังคือปฏิกิริยาภูมิแพ้ที่เกิดจากการตอบสนองที่มากเกินไปของระบบภูมิคุ้มกันต่อสารหลังจากการสัมผัสผิวหนัง h-CLAT ถูกออกแบบมาเพื่อจำลองขั้นตอนทางชีวภาพที่สำคัญในการพัฒนาของการแพ้ทางผิวหนัง นั่นคือการกระตุ้นเซลล์เดนไดรต์ (เซลล์ภูมิคุ้มกันชนิดหนึ่ง) โดยสารเคมีที่ทำให้เกิดการแพ้
วิธีการทดสอบนี้มีความสำคัญเนื่องจากมาแทนที่การทดสอบที่ใช้สัตว์แบบเก่า นอกจากนี้ มาตรฐาน OECD TG 442E ยังได้รับการยอมรับเนื่องจากเป็นวิธีการที่ได้มาตรฐาน ได้รับการรับรองทางวิทยาศาสตร์ และเป็นที่ยอมรับในระดับสากล สำหรับการประเมินว่าสารเคมีก่อให้เกิดภาวะภูมิแพ้ผิวหนัง ซึ่งเป็นอาการแพ้ชนิดหนึ่งที่เกิดจากการสัมผัสผิวหนังซ้ำๆ หรือไม่
วิธี h-CLAT ประเมินการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของเครื่องหมายบนพื้นผิวเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการกระตุ้นของโมโนไซต์และเซลล์เดนไดรติกในเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวโมโนไซต์สายพันธุ์ THP-1 ของมนุษย์หลังจากได้รับสารกระตุ้นความไวต่อแสง จากนั้นนำระดับการแสดงออกของเครื่องหมายบนพื้นผิวเซลล์เดนไดรติกที่วัดได้ไปใช้เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างสารกระตุ้นความไวต่อแสงและสารลดความไวต่อแสงของผิวหนัง
วิธีนี้เป็นการทดสอบในหลอดทดลองที่วัดการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของเครื่องหมายบนพื้นผิวเซลล์ในเซลล์ THP-1 ของเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวโมโนไซต์ของมนุษย์หลังจากได้รับสารเคมีทดสอบเป็นเวลา 24 ชั่วโมง โมเลกุลบนพื้นผิวเหล่านี้เป็นเครื่องหมายทั่วไปของการกระตุ้นโมโนไซต์ THP-1 และสามารถเลียนแบบการกระตุ้นของเซลล์เดนไดรต์ ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการเตรียมเซลล์ที การเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของเครื่องหมายบนพื้นผิวจะถูกวัดโดยโฟลว์ไซโตเมทรีหลังจากการย้อมเซลล์ด้วยแอนติบอดีที่ติดฉลากฟลูออโรโครม การวัดความเป็นพิษต่อเซลล์จะดำเนินการพร้อมกันเพื่อประเมินว่าการเพิ่มขึ้นของการแสดงออกของเครื่องหมายบนพื้นผิวเกิดขึ้นที่ความเข้มข้นต่ำกว่าระดับความเป็นพิษต่อเซลล์หรือไม่ ความเข้มของการเรืองแสงสัมพัทธ์ของเครื่องหมายบนพื้นผิวเมื่อเทียบกับตัวควบคุมตัวทำละลาย/ตัวกลางจะถูกคำนวณและใช้ในแบบจำลองการทำนายเพื่อสนับสนุนการแยกความแตกต่างระหว่างสารกระตุ้นความไวและสารที่ไม่กระตุ้นความไว
โดยสรุป OECD TG 442 มีความจำเป็นต่อการสนับสนุนการทดสอบความปลอดภัยของสารเคมีและผลิตภัณฑ์สำหรับผู้บริโภคที่ถูกต้องตามจริยธรรม เชื่อถือได้ และสอดคล้องกันทั่วโลก โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อคำนึงถึงกฎระเบียบที่เปลี่ยนแปลงไปและความต้องการของประชาชนต่อวิทยาศาสตร์ที่ปราศจากการทารุณกรรมสัตว์
องค์กรของเราซึ่งให้การสนับสนุนธุรกิจในทุกภาคส่วนมายาวนาน ผ่านกิจกรรมการทดสอบ การวัดผล การวิเคราะห์ และการประเมินที่หลากหลาย มีทีมงานที่แข็งแกร่งซึ่งติดตามความก้าวหน้าทางวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีระดับโลกอย่างใกล้ชิดและพัฒนาตนเองอย่างต่อเนื่อง ในส่วนนี้ เรายังให้บริการทดสอบแก่ธุรกิจต่างๆ ตามมาตรฐาน OECD TG 442E ว่าด้วยความไวต่อการกระตุ้นของผิวหนังในหลอดทดลอง - การทดสอบการกระตุ้นเซลล์ไลน์ของมนุษย์ (h-CLAT)
คุณสามารถขอให้เรากรอกแบบฟอร์มของเราเพื่อรับการนัดหมายเพื่อรับข้อมูลรายละเอียดเพิ่มเติมหรือเพื่อขอการประเมินผล
