Kaedah Ujian Pembawa Cakera Kuantitatif Standard ASTM E2197-17 untuk Menentukan Aktiviti Bahan Kimia Bakteria, Virucidal, Fungicidal, Mycobactericidal dan Spoicidal

Dalam piawaian "ASTM E2197-17 Standard kaedah ujian pembawa cakera kuantitatif untuk menentukan aktiviti bakteria, virucidal, fungicidal, mycobactericidal dan spoicidal bahan kimia" yang dibangunkan oleh American Society for Testing and Materials (ASTM), keluli tahan karat berus mewakili keras, bukan -permukaan persekitaran berliang dan peranti perubatan Untuk menilai keupayaan untuk menyahaktifkan bakteria vegetatif, virus, kulat, mikobakteria dan spora bakteria pada pembawa cakera. Kaedah ujian yang digunakan diterangkan.

Piawaian ini juga direka bentuk untuk mempunyai mangsa yang terselamat berbanding purata sekurang-kurangnya tiga pembawa kawalan untuk menentukan sama ada standard prestasi telah dipenuhi. Untuk penilaian statistik keputusan yang betul, bilangan organisma yang berdaya maju dalam inokulum ujian mestilah cukup tinggi untuk mengambil kira kedua-dua standard prestasi dan variasi eksperimen dalam keputusan. Selain itu, kaedah ujian ini tidak melibatkan sebarang tindakan mengelap atau menggosok. Oleh itu ia tidak direka untuk menguji pemadaman.

Untuk tujuan piawaian ini, takrifan berikut digunakan, sebagai tambahan kepada terma dan takrifan dalam "ASTM E2756-19 Terminologi Standard untuk agen antimikrob dan antivirus":

• Pembawa merujuk kepada permukaan atau objek tidak bernyawa yang disuntik dengan organisma ujian.
• Eluat merujuk kepada eluan yang mengandungi organisma atau organisma yang dipulihkan.
• Eluant ialah sebarang penyelesaian yang tidak berbahaya kepada organisma atau organisma ujian dan ditambah kepada pembawa untuk memulihkan organisma atau organisma.
• Peneutralan merujuk kepada proses pelindapkejutan aktiviti antimikrob bahan ujian. Ini boleh dicapai dengan mencairkan atau menambah satu atau lebih peneutral kimia kepada campuran organisma atau bahan ujian.
• Beban tanah ialah larutan satu atau lebih bahan organik atau bukan organik, atau kedua-duanya, ditambah kepada penggantungan organisma ujian untuk mensimulasikan kehadiran rembesan badan, perkumuhan atau bahan asing yang lain.
• Organisma ujian ialah organisma yang mempunyai ciri-ciri yang membolehkan ia dikenal pasti dengan mudah. Ia juga boleh dipanggil pengganti, simulant, atau organisma penanda.
• Bahan ujian adalah formulasi yang mengandungi bahan antimikrob.

Setiap cakera (diameter 1 cm) memuatkan 10 µL organisma ujian dengan beban tanah. Inokulum dikeringkan dan cakera kemudian diletakkan pada permukaan bawah bahagian dalam botol plastik steril sebelum menyentuh 50 µL pencairan penggunaan bahan ujian. Masa hubungan dan suhu boleh diubah mengikut keperluan. Pembawa kawalan menerima 50 µL cecair yang tidak berbahaya untuk menguji organisma dan sel perumah jika ada, tetapi sebaliknya dikendalikan dengan cara yang sama seperti pembawa ujian.

Untuk ujian terhadap bakteria vegetatif, kulat, mikobakteria dan spora bakteria, bahan ujian kemudiannya dineutralkan dan inokulum dicairkan. Eluat dan bilas seterusnya pembawa dan botol disalurkan melalui penapis membran. Plat kultur penapis diinkubasi, koloni dikira, dan pengurangan log10 dikira.

Untuk ujian virus, pencairan eluat yang sesuai diinokulasi ke dalam kultur sel yang sesuai, kultur diperiksa untuk sitopatologi/fokus berjangkit, yang dianggarkan sebagai bilangan yang paling mungkin atau dikira sebagai fokus atau plak, dan log10 dikira.

Reka bentuk ujian ini menghapuskan sebarang kehilangan organisma yang berdaya maju melalui pencucian dan dengan itu memungkinkan untuk menghasilkan data yang sah secara statistik menggunakan pembawa ujian yang lebih sedikit daripada yang diperlukan untuk kaedah berdasarkan anggaran nombor yang paling mudah.

Ketegasan dalam ujian dicapai dengan menggunakan beban tanah, topografi mikro permukaan pembawa keluli tahan karat yang disikat, dan nisbah bahan ujian yang lebih kecil kepada kawasan permukaan yang biasa digunakan untuk banyak aplikasi disinfektan. Oleh itu, bahan ujian yang dinilai menghadapi cabaran yang munasabah dalam membenarkan pemulihan organisma ujian yang cekap daripada pembawa yang diinokulasi. Cakera logam dalam ujian asas juga serasi dengan pelbagai bahan aktif.

Reka bentuk pembawa memungkinkan untuk meletakkan isipadu organisma ujian yang diukur dengan tepat (10 µL) dan mengawal cecair atau bahan ujian (50 µL) ke dalam setiap satu.

Inokulum diletakkan di tengah-tengah setiap cakera manakala isipadu bahan ujian meliputi hampir keseluruhan permukaan cakera, dengan itu hampir menghapuskan risiko pendedahan mana-mana organisma.

Dalam semua ujian kecuali ujian terhadap virus, penambahan 10 mL eluen/pencair memberikan pencairan 1:200 bahan ujian serta-merta pada akhir tempoh sentuhan. Walaupun langkah ini dengan sendirinya mencukupi untuk menghentikan aktiviti mikrobisida kebanyakan bahan aktif, protokol ujian membenarkan penambahan peneutral khusus kepada eluen/pencair jika perlu. Dengan pengecualian virus, langkah penapisan membran juga membenarkan keseluruhan eluat daripada pembawa ujian diproses dan oleh itu menangkap dan pengesanan seterusnya bagi bilangan organisma berdaya maju yang rendah yang mungkin ada. Membilas penapis membran seterusnya dengan garam juga mengurangkan risiko sebarang sisa perencat dibawa ke dalam media pemulihan.

Di antara pelbagai ujian, pengukuran, analisis dan kajian penilaian yang dijalankan untuk perniagaan dalam pelbagai sektor, syarikat kami, dengan kakitangan terlatih dan pakar serta peralatan teknologi termaju, telah membangunkan "cakera kuantitatif Standard ASTM E2197-17 untuk menentukan bakteria, virucidal, aktiviti racun kulat, mikobakterisida dan racun bahan kimia". Ia juga menyediakan perkhidmatan ujian yang ditakrifkan dalam piawaian "kaedah ujian pembawa".